杨金宏

摘要：GspF是细菌Ⅱ型分泌系统的内膜平台的重要蛋白，利用PCR扩增技术，获得了桑青枯雷尔氏菌MR111的含有该类基因功能性结构域的GspF基因。NCBI在线BLASTP分析发现，该基因与雷尔氏菌属来源的同源基因的一致性在90%以上；在聚类分析中，首先所有雷尔氏菌属同源基因聚合在同一分支，后与皮氏罗尔斯顿菌的同源基因聚合。基因结构分析表明，该基因有2个由α螺旋组成的具有高度相似性的、跨膜胞质结构域，揭示该基因可能参与细菌的跨膜分泌。

关键词：桑青枯雷尔氏菌；Ⅱ型分泌系统；GspF基因；结构分析

中图分类号：S888.71+1 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2015）07-0038-03

植物致病细菌Ⅱ型分泌系统（T2SS）是由12～15个分泌途径转膜蛋白（GSP）基因簇为中心组成的复合体，向细胞外分泌毒性因子、胞外酶、毒素等许多重要的蛋白质，通过2步将蛋白从细胞内转移到细胞外[1]。GspF、GspL、GspM、GspE等共同组成T2SS的内膜平台，组装其他分泌元件，控制分泌通道的开启[2]。GspF是内膜平台中具有重要作用、并具有广泛分布的胞质膜蛋白，Thomas等通过分析GspF的氨基酸序列，结合欧文氏杆菌（Erwinia carotovora）的GspF与BlaM融合试验证实GspF穿过内膜3次，其N末端和C末端分别位于细胞质和周质[3]。2007年Arts等进一步通过碱性磷酸酶融合试验证实了绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）中GspF的同源物的拓扑结构，证实了GspF是一个质膜蛋白[4]。2009年，Abendroth等对来自霍乱弧菌（Vibrio cholerae）的EpsF（GspF的同源基因）的N末端的胞质结构域的晶体结构进行了解析，其由6个反向平行α螺旋组成。2个分子EpsF蛋白的N-末端结构域形成1个紧密的二聚体并具有保守的结合界面[5]。……