魏冬梅 陈宏 尹钢 仲丽 周忠光

关键词：蝙蝠葛酚性碱；Glil；胰腺癌中图分类号：R285.5

文献标志码：A

文章编号：1007 - 2349（ 2015） 03 - 0064 - 02

PAMD为多种脂溶性生物碱的混合物，是从中药北豆根（防己科植物蝙蝠葛根茎）中所提取。为了证实PAMD抗胰腺癌的相关作用机理是否与通过抑制Hedgehog信号通路的激活所发挥的作用有关，本实验主要采用了RT - PCR检测PAMD对人胰腺癌细胞株BxPC -3裸鼠移植瘤Hedgehog信号通路中关键分子GlilmRNA表达的影响，探讨PAMD的抗肿瘤作用以及Hedgehog信号通路在胰腺癌中的作用机制，为临床上抗肿瘤新药的研发提供了新的方向和思路。1 实验材料

PAMD购自于黑龙江中医药大学药学院；5-氟尿嘧啶（5 - Fu）购自sigma公司；人源性胰腺癌BxPC -3细胞株购自中国科学院（上海生命科学院细胞资源中心）；实验动物购自上海斯莱克动物实验有限公司；胰蛋白酶（GIBCO分装伯安生命技术有限公司）；DU800核酸蛋白分析仪购自Beckman公司；SYBR Premix Ex Taq试剂盒购自TaKaRa公司：Prime -Script RT试剂盒购自TaKaRa公司；ABI 7500实时荧光PCR仪购自Applied Biosystems公司。2实验方法2.1 动物分组50只裸鼠，雌性，（4 -6）W龄。造模24 h后，随机将其分成5组，分别为模型对照组、空白组、5 - FU组、PAMD低剂量组、PAMD高剂量组，每组10只。2.2给药途径及剂量实验分组和给药剂量：模型组及空白组：每天给予同等容积的生理盐水（0. 9% NaCl），但空白组不需要接种瘤株；5 - FU组：按20 mg/kg腹腔注射给药PAMD；低剂量组：按10 mg/kg腹腔注射给药；PAMD高剂量组：按20 mg/kg腹腔注射给药。各实验用药治疗组均连续给药21 d。2.3造模及取材取冻存胰腺癌细胞株BXPC -3，投入37℃水中，1min内融化，离心去除冻存液，用约10倍冷RPMI1640完全培养液洗1次，接种于培养瓶中，置于37C、饱和湿度、5% C02培养箱中，隔日换液，细胞长成单层后，用0.25%胰酶、EDTA消化、传代，并以倒置显微镜监控。……