王丽，王华伟，李瑞

生长抑素对颅脑损伤伴休克大鼠肝损伤的保护作用

王丽，王华伟，李瑞

［作者单位］250031山东济南，解放军456医院特检科（王丽，王华伟，李瑞）

目的观察生长抑素（SST）对颅脑损伤伴失血性休克（TBIS）大鼠肝损伤的保护作用。方法Wistar大鼠36只，按随机数字表法分成假手术组（C组）、TBIS模型组和SST治疗组，每组12只。对大鼠血清肿瘤坏死因子（TNF）-α、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）及肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽（GSH）的水平进行检测；病理切片观察肝组织病理学改变。结果与C组比较，TBIS组血清TNF-α、ALT及AST水平与肝组织匀浆MDA水平明显升高（P＜0.01）；肝组织匀浆SOD及GSH水平均明显降低（P＜0.01）。与TBIS组比较，SST治疗组血清TNF-α、ALT及AST水平，肝组织匀浆MDA水平均明显降低（P＜0.01），肝组织匀浆SOD及GSH水平均明显升高（P＜0.01）。病理学检查可见TBIS组肝组织形态明显受损，SST治疗组肝组织受损较小。结论SST干预可抑制氧自由基产生及促炎细胞因子的释放，从而减轻TBIS大鼠继发性肝损伤。

颅脑损伤；休克；肝损伤；生长抑素

颅脑损伤伴失血性休克（TBIS）病情凶险、并发症多见，是临床上常见的危重症之一，救治难度大，预后较差，而过度炎症反应是引起机体二次损伤的重要原因［1］。在TBIS进展过程中，肝的损伤对患者的预后起着非常重要的作用。因此，如何抑制过度炎症反应，减轻肝的损伤，对改善患者预后具有重要的意义。有研究证实生长抑素（SST）能够抑制免疫过度激活，减轻炎症反应［2，3］。

本研究对TBIS大鼠进行SST干预，检测血清肿瘤坏死因子（TNF）-α、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转移酶（AST）、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及谷胱甘肽（GSH）的水平，并观察肝组织病理学改变，旨在探讨SST对TBIS大鼠肝损伤的保护作用及可能机制。

1　材料与方法

1.1实验动物分组清洁级雄性Wistar大鼠36只，体重220～250 g，由山东大学医学院实验动物中心提供，实验前8 h禁食。按随机数字表法分成假手术组（C组）、TBIS模型组和SST干预组，每组12只。

SST干预组于模型制成后0.5、1、2 h皮下注射SST（注射用SST由瑞士默克雪兰诺公司生产），给予量为20 μg/kg体重。C组及TBIS组皮下注射等量生理盐水。

本研究动物处置方法符合动物伦理学标准。

1.2动物模型制备大鼠实验前禁食12 h，不禁水。采用自由落体复制颅脑外伤合并休克模型［1］。假手术组仅开颅窗后骨蜡封闭骨窗，不予以打击及放血。在各组模型制成120 min后快速从颈动脉采血，处死取肝组织。

1.3标本留取及指标测定

1.3.1血清TNF-α、ALT及AST水平测定取血2 ml，室温放置30 min，离心取上清。以酶联免疫吸附法测定TNF-α，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。用Olympus AU2700全自动生化分析仪测定ALT及AST活性，试剂盒由上海申能-德赛有限公司提供。

1.3.2肝组织MDA、SOD及GSH水平测定取肝组织，立即置于-70℃低温冰箱保存。以硫代巴比妥酸法测定MDA，以黄嘌呤氧化酶法测定SOD，以二硫代硝基苯甲酸比色法测定GSH，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3.3肝组织形态学观察取肝组织1 cm×1 cm× 1 cm，用10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，切片，用HE染色，在光镜下观察肝组织形态学改变。

1.4统计学处理采用SPSS 12.0统计软件包进行分析。计量资料以均数±标准差表示，多组间比较采用方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1血清TNF-α、ALT及AST水平比较TBIS组血清TNF-α、ALT及AST水平明显高于C组（P＜0.01）；SST干预组与TBIS组比较，SST干预组血清TNF-α、ALT及AST水平明显降低（P＜0.01）。见表1。

表1　血清TNF-α、ALT及AST水平比较

表1　血清TNF-α、ALT及AST水平比较

注：与C组比较，＊P＜0.01；与TBIS组比较，#P＜0.01

组别TNF-α（ng/ml）ALT（U/L）AST（U/L）C组68.4±13.529.1±6.339.1±8.3 TBIS组309.7±36.1＊194.9±13.4＊217.7±22.1 SST干预组210.4±37.8＊#138.2±12.9＊#155.1±27.2

2.2肝组织MDA、SOD及GSH活性比较TBIS组肝组织匀浆MDA活性明显高于C组（P＜0.01），SOD及GSH活性均低于C组（P＜0.01）。与TBIS组比较，与SST干预组肝组织匀浆MDA活性显著降低（P＜0.01），SOD及GSH活性均明显升高（P＜0.01）。见表2。

2.3肝组织病理形态学比较光镜下观察，对照组大鼠肝细胞结构正常，排列整齐，肝窦内无明显炎性细胞浸润。而TBIS组可见肝细胞结构紊乱，肝窦扩张，肝窦内有较多中性粒细胞浸润，部分肝细胞变性、坏死。SST干预组肝组织破坏较轻，肝小叶结构尚清晰，肝窦内中性粒细胞浸润较少。

表2　肝组织MDA、SOD及GSH活性比较

表2　肝组织MDA、SOD及GSH活性比较

注：与C组比较，＊P＜0.01；与TBIS组比较，#P＜0.01

组别MDA（nmol/mg pro）SOD（U/mg pro）GSH（mg/g pro）C组3.59±0.8732.51±8.04398.2±58.7 TBIS组7.13±1.62＊16.02±4.91＊211.7±52.9＊SST干预组4.82±1.07＊#24.55±5.14＊#296.2±64.3＊#

3　讨论

颅脑损伤伴失血性休克（TBIS）病情凶险、并发症多见，是临床上常见的危重症之一，救治难度大，预后较差。在TBIS进展过程中，肝的损伤对患者的预后起着非常重要的作用。因此，如何抑制过度炎症反应，减轻因过度炎症反应所引起的机体二次损伤，减轻肝的损伤，对改善患者预后具有重要的意义。

生长抑素（SST）是一种广泛存在于胃肠道、脑、内外分泌腺等组织的环状多肽，通过与细胞膜上的SST受体结合而发挥多种生物学效应。有研究证实，SST能够抑制免疫过度激活，减轻炎症反应［3，4］。本研究应用SST对TBIS大鼠进行干预，通过检测血清TNF-α、ALT及AST和肝组织MDA、SOD及GSH的水平变化，光镜下观察肝组织病理改变，探讨SST干预对TBIS所致肝损伤的影响。

本研究中TBIS大鼠组织病理学镜检可见肝窦扩张、瘀血明显，肝窦内有较多中性粒细胞浸润，肝小叶结构紊乱，部分肝细胞变性、坏死；血清ALT及AST活性均明显升高，说明TBIS大鼠肝脏组织形态及肝功能均出现明显的损害。而SST干预组肝组织结构尚清晰，肝窦内有散在的中性粒细胞浸润，肝组织破坏较轻，血清ALT及AST活性明显下降。说明在TBIS早期，肝脏组织结构遭受破坏，急性肝损伤表现明显，而SST干预能有效减轻肝组织的损伤。

在TBIS进展过程中生物膜脂质过氧化或氧应激损伤引起多种炎症介质的释放，是促进休克恶化，诱发“炎性瀑布”发生的重要因素之一。SOD、MDA及GSH是目前公认的能较好地反映机体内氧自由基及脂质过氧化损伤程度和机体对氧自由基清除能力的间接指标。TNF-α是多种炎症介质复合网中的中心因子，是引起多种促炎细胞因子和炎症介质失控性释放的关键因素，其除直接损失组织细胞外，还进一步活化炎性细胞，形成复杂的网络系统，产生炎症瀑布效应，引起多器官功能损伤。

本研究结果显示，TBIS组肝组织匀浆MDA活性和血清TNF-α的水平均高于对照组，SOD及GSH活性均低于对照组。说明在TBIS早期，肝组织即发生了较强的脂质过氧化，并产生大量氧自由基。而SOD水平的降低使得机体对氧自由基的清除能力下降，并可进一步造成机体的氧化与抗氧化平衡体系被打破，导致肝组织中大量脂质过氧化终产物的蓄积，引起急性肝损伤的发生。与TBIS组比较，SST干预组肝组织匀浆MDA活性和血清TNF-α的水平均降低，肝组织匀浆SOD及GSH活性均升高。说明SST干预，能明显降低TNF-α及氧自由基的产生，有效增强机体的抗氧化水平，从而减轻肝组织的脂质过氧化损伤。

总之，SST干预可有效降低TBIS大鼠的脂质过氧化水平，增强清除氧自由基的能力，减轻炎症反应，对TBIS所致肝损伤具有保护作用。

［1］许会彬，王青，王化芬，等.ω-3 PUFA对颅脑损伤伴休克大鼠继发性肝损伤的保护作用［J］.中华急诊医学杂志，2013，22 （12）：1104-1107.

［2］徐丽艳，刘瑶，韩文文，等.生长抑素对内毒素致小鼠急性肺损伤中炎症反应的影响和机制［J］.中华危重病急救医学，2014，26（05）：315-320.

［3］王文进，邵莉莉，颜加云，等.大黄联合生长抑素治疗急性重症胰腺炎的系统评价［J］.现代中西医结合杂志，2014，23（01）：31-35.

［4］瞿星光，张朝晖，周刚，等.生长抑素与前列腺素E1联合应用治疗重症急性胰腺炎初步临床研究［J］.重庆医学，2014，43 （01）：79-82. ［2015-04-27收稿，2015-05-25修回］

［本文编辑：韩仲琪］

Protective effects of somatostatin on liver injury in rats with traumatic brain injury complicated with hemorrhagic shock

WANG Li，WANG Hua-wei，LI Rui.Department of Special Examination，the 456th Hospital of Chinese PLA，Jinan，Shandong 250031，China

ObjectiveTo investigate the effects of preconditioning with somatostatin（SST）on liver injury in rats with traumatic brain injury complicated with hemorrhagic shock（TBIS）and its underlyingmechanisms. MethodsThe 36 male Wistar rats of clean grade were assigned randomly into 3 groups：sham operation group （C），TBIS model group and SST pretreatment group，each group included 12 rats.The arterial blood samples were taken for determination of serum levels of TNF-α，ALT and AST.The liver were removed for determination of levels of malondialdehyde（MDA），superoxide dismutase（SOD）and glutathione（GSH）.Pathological changes in liver tissues were observed by light microscope.ResultsCompared with group C，the serum levels of TNF-α，ALT and AST and the liver levels of MDA were significantly higher（P＜0.01），but the liver levels of SOD and GSH in group TBIS（P＜0.01）.The serum levels of TNF-α，ALT and AST and the liver levels of MDA were significantly lower（P＜0.01），but the levels of SOD and GSH in liver tissues were significantly higher（P＜0.01）in group SST than those in group TBIS.Histological examination revealed the injury of liver in TBIS group，and the rats in SST treated group showed alleviated severity of liver injury.ConclusionThe supplementation of SST can ameliorate liver injury in rats with TBIS which may contribute to the inhibition of peroxide injury and oxygen free radicals.

Traumatic brain injury；Shock；Liver injury；Somatostatin

R683.5

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