陈爱娟 蒋斌 朱慧 王玳珠

半夏厚朴汤的机器煎煮工艺研究

陈爱娟 蒋斌 朱慧 王玳珠

目的 通过正交实验设计，对YJD十功能自动煎药机煎煮半夏厚朴汤的机器加压煎煮工艺进行优化，以期为建立一般方剂的机器煎煮工艺的标准操作规程提供参考。方法 以和厚朴酚的含量及浸出物的含量为指标，通过单因素考察进行浸泡时间、煎煮时间、煎煮温度三个因素水平的初选，再采用正交试验优选半夏厚朴汤的机器加压煎煮的最佳工艺。结果 最终确定半夏厚朴汤的机器煎煮最佳工艺为浸泡30min、煎煮温度115℃、煎煮时间20min。结论 优化的机器煎煮工艺结果可靠，评价指标可控，对于规范机器煎煮工艺具有一定的意义。

煎药机；半夏厚朴汤；煎煮工艺研究

中药汤剂(又称汤液)是中医临床治疗疾病所用的主要剂型之一。传统汤剂存在一些不足之处，如煎煮麻烦，服用、携带不便，易霉变、不能久贮等，因此在一定程度上制约了中药汤剂的应用。中药煎药机的研制成功和推广应用，给中药汤剂专业煎煮的研究提供了一种新的思路。但中药汤剂煎煮领域的国家标准缺失，评价中药汤剂煎煮质量水平主要依据其口味、气味、颜色等结合个人经验进行评判，导致汤剂煎煮工艺不规范，煎煮质量的评价标准无法制定与实施[1-3]。半夏厚朴汤[4-6]出自张仲景《金匮要略》，由半夏、厚朴、茯苓、生姜、苏叶组方，该方剂煎煮时不需要特殊处理，煎法简单，实验选择厚朴中的有效成份和厚朴酚（新木脂素类）作为主要指标，再结合干浸膏的含量进行考察，筛选出半夏厚朴汤的机器煎煮的最佳工艺[7]，以期为中药的机器煎煮工艺研究提供实验基础。

表1 饮片来源及批次

1 实验器材

1．1 主要仪器设备 YJD-20GL型十功能自动煎药机（北京东华原），Shimadzu LC-20AB高效液相色谱系统(日本岛津公司，BS2242S电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司），RE-52旋转蒸发仪（瑞士BUCHI公司），砂锅，煤气灶等。

1．2 药材与试剂 和厚朴酚（730-8803，中国药品生物制品检定所），乙醇(南京化学试剂有限公司），磷酸(汕头市西陇化工厂有限公司），甲醇(分析级，南京化学试剂有限公司），甲醇（色谱级，美国天地公司）。

处方所用的中药饮片，均由苏州天灵中药饮片有限公司提供，饮片符合2010年版《中国药典》各药项下标准。饮片来源及批次见表1。

2 方法与结果[8-10]

2．1 半夏厚朴汤中和厚朴酚含量及浸出物测定方法的建立

2．1．1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：YMC-Pack c4 (250mm×4．6mm，5μm)(YMC Co．Ltd，Japan)；流动相：甲醇-0．1%磷酸水溶液(70∶30)；流速：1mL/min；检测波长：254nm；柱温：35℃；进样量：10μL。

2．1．2 对照品溶液的制备 精密称量干燥至恒定质量的和厚朴酚对照品0．6304mg，加甲醇适量溶解，分别定容至10mL容量瓶中，配置成浓度为0．06304mg/mL和厚朴酚对照品溶液，4℃存放备用。

2．1．3 机器煎煮样品溶液的制备 称量半夏180g，厚朴135g，茯苓180g，苏叶90g，生姜135g，加水3500mL，于高压煎煮机器中，按实验所需的各浸泡时间、煎煮时间、煎煮温度进行煎煮，趁热滤出药液，待药液冷却后加水定容至2000mL容量瓶中，摇匀，即得汤剂溶液。精密移取汤剂溶液100mL，加入乙醇60mL，混合均匀，于4℃冰箱静置24h，滤过，滤液用旋转蒸发仪蒸干，残渣用甲醇超声溶解，定容至100mL容量瓶中，作为供试品溶液，4℃存放备用。

2．1．4 方法学考察

(1)标准曲线的绘制。精密量取浓度为0．06304mg/mL和厚朴酚对照品溶液1．6mL、0．4mL、0．2mL、0．1mL、0．05mL分别置于25mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得。每次进样10μL，按上述色谱条件进行测定。以和厚朴酚的含量(X)为横坐标，其峰面积吸收度积分值(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程，结果见图1，和厚朴酚标准品的色谱图见图2。

(2)样品含量测定。将样品分别按供试品制备方法制备供试液，依法测定，每批样品各进三针，每次进样10μL，并随行大黄素对照品进样10μL，计算各样品中和厚朴酚的含量。样品的HPLC色谱图见图3。

(3)精密度试验。精密吸取和厚朴酚标准品溶液10μL，重复进样5次，计算样品中和厚朴酚含量的RSD为0．21%，表明仪器精密度良好。

图1 和厚朴酚标准曲线图

图2 和厚朴酚标准品溶液的HPLC色谱图

图3 样品中和厚朴酚的HPLC色谱图

(4)稳定性试验。精密吸取和厚朴酚标准品溶液10μL，分别于0、3、6、9、16、24h进样测定，计算样品中和厚朴酚含量的RSD为0．97%，结果表明，样品溶液在24h内稳定。

(5)重复性试验。取同一批号样品5份，精密称定5g，照供试品溶液的制备方法制备5份供试液，分别进样10μL，测定并计算重复性。计算样品中和厚朴酚含量的RSD为1．22%。

(6)加样回收率试验。称取和厚朴酚处方量一半的组方饮片煎煮，分别加入相当于半夏厚朴汤处方一半的和厚朴酚对照品溶液，按照样品制备方法制备和厚朴酚汤样品溶液6份，精密吸取各样品溶液10μL进样测定，计算和厚朴酚的平均回收率为96．31%，RSD为1．62%。

2．1．7 浸出物含量测定的方法 按照《中华人民共和国药典》（2010年版）一部附录Χ项下浸出物测定法，精密量取煎液25mL至蒸发皿中，并将其置于水浴锅上浓缩成稠浸膏，然后放入烘箱中于105℃干燥3h，取出后放入干燥器干燥10min，称量，用减量法计算干浸膏得率。

2．2 机器煎煮工艺的单因素考察

2．2．1 对和厚朴酚及浸出物的影响 为考察优选半夏厚朴汤最佳机器煎煮工艺，在查阅中药煎煮相关文献的基础上，进行单因素考察，以水煎液中和厚朴酚含量为主要指标；同时测定水煎液的浸出物含量。

2．2．2 浸泡时间的单因素考察 取半夏180g，厚朴135g，茯苓180g，苏叶90g，生姜135g，加水3500mL，分别浸泡0、10、20、30、40min，温度110℃，煎煮15min。测量各合煎液中和厚朴酚及干浸膏得率。结果见图4、图5。

图4 不同浸泡时间对半夏厚朴汤水煎液中和厚朴酚含量的影响

图5 不同浸泡时间对半夏厚朴汤水煎液浸出物含量的影响

从图4、图5不同浸泡时间对半夏厚朴汤水煎液指标成分的影响来看，随着浸泡时间的增加，指标性成份及浸出物均呈先下降后上升再下降的趋势，且在30min是达到最大，因此本试验选取浸泡20 min、30 min、40 min这三个水平进行正交试验考察。

2．3．3 煎煮时间的单因素考察 在其他煎煮条件固定的情况下，分别考察煎煮10、15、20、25、30 min时水煎液中和厚朴酚及浸出物含量，结果如图6、图7所示。

图6 不同煎煮时间对半夏厚朴汤水煎液中和厚朴酚含量的影响

图7 不同煎煮时间对半夏厚朴汤水煎液浸出物含量的影响

图6、图7表明随着煎煮时间的增加，水煎液中指标成分含量与浸出物含量基本呈先上升后降低再上升的趋势，且在煎煮15min时含量达到最高。因此本试验选取煎煮10min、15min、20min这三个水平进行正交试验考察。

2．3．4 煎煮温度的单因素考察 在其他煎煮条件固定的情况下，分别考察煎煮温度为105、110、115、120℃时水煎液中和厚朴酚及浸出物含量，结果如图8、图9所示。

图8 不同煎煮温度对半夏厚朴汤水煎液中和厚朴酚含量的影响

图9 不同煎煮温度对半夏厚朴汤水煎液浸出物含量的影响

图8 、图9表明随着煎煮温度的增加，水煎液中指标成分含量与浸出物含量先上升后下降的趋势，且110℃时含量最高。因此选取煎煮温度为105℃、110℃、115℃这三个水平进行正交试验考察。

2．4 机器煎煮工艺正交试验

2．4．1 正交试验设计 根据浸泡时间、煎煮时间、煎煮温度的单因素考察结果，以水煎液中和厚朴酚和浸出物的含量为指标，进行三因素三水平正交试验，因素与水平安排见表2。

表2 因素与水平

2．4．2 正交试验及其结果 根据2．1．3项下的样品制备方法，分别按表3中的9组条件进行正交试验，制备9组样品，并在2．1．1项色谱条件下分别进样分析，测定供试品溶液中和厚朴酚的含量；同时测定浸出物含量。正交试验结果见表3。

本试验以和厚朴酚含量为指标，结合浸出物测定结果考察，故选择综合加权评分法对实验结果进行方差分析。设定满分为100分，其中和厚朴酚和浸出物含量的权重系数各为50，在此基础上进行总加权评分，将总分结果带入正交实验结果中，即得如表3所示结果。由直观分析结果可见，在所选因素水平范围内，影响半夏厚朴汤机器煎煮工艺的因素依次为C＞B＞A，即煎煮温度＞煎煮时间＞浸泡时间。且各因素各水平影响大小顺序为A2＞A3＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1。

根据以上结果用SPSS 15．0统计软件进行方差分析，结果见表4。表4方差分析表明，煎煮时间因素F值为23．76，P值为0．0404；煎煮温度因素F值为28．93，P值为0．0334，即差异有统计学意义（P＜0．05），因此煎煮时间及煎煮温度均为半夏厚朴汤机器煎煮过程中的显著性影响因素，而浸泡时间因素差异无统计学意义。

表3 半夏厚朴汤机器煎煮工艺正交试验表及结果

表4 半夏厚朴汤机器煎煮工艺试验方差分析表

根据正交试验结果，综合极差分析和方差分析，并考虑临床煎药的可行性，确定半夏厚朴汤的最佳机器煎煮工艺为A2B3C3，即将半夏厚朴汤饮片浸泡30min后，在机器煎煮温度为115℃的条件下煎煮20min。

3 讨论

半夏厚朴汤中君药半夏为有毒药材，虽然经炮制后毒性大大降低，但是毒性的影响仍在，而煎煮条件对有毒成分的影响又不可忽视，因此对此方的煎煮，既要注意有毒成分的影响，又要保证有效成分的煎出，在最大程度上发挥该方剂的药效。

由于该方的君药半夏的主成分研究比较复杂且不稳定，研究尚未透彻，因此本实验选择臣药厚朴中的有效成份和厚朴酚（新木脂素类）作为主要指标，再结合干浸膏的含量进行考察。

本实验最终确定半夏厚朴汤机器煎煮的最佳工艺为：浸泡30min后，在机器煎煮温度为115℃的条件下煎煮20min。结果可靠，评价指标可控。该实验结果不仅可以对本院的代煎药的煎煮工艺及质量有一定的实验基础，而且对于规范以半夏厚朴汤以及这一类的方剂的机器煎煮工艺具有一定的指导意义。

[1] 李毅民,许丽雯,章崇仪,等．机器与传统方法煎药效果的比较[J]．中国医院药学杂志,1999,19(11)：697－698．

[2] 邹红．如何正确的煎煮汤剂[J]．临床合理用药,2011,4(10A)：157．

[3] 冷淑萍．浅谈中药汤剂的煎煮和服用[J]．临床合理用药,2012, 5(9C)：63．

[4] 张金良,刘亚平．半夏厚朴汤方源探析[J]．陕西中医学院学报,2015, 38(1)：79-81．

[5] 李媛．半夏厚朴方组方浅析[J]．四川中医,2015,33(2)：46-47．

[6] 徐群,欧阳臻,常钰,等．半夏厚朴汤君臣佐使配伍对和厚朴酚与厚朴酚含量的影响[J]．中国实验方剂学杂志,2008,14(10)：1-3．

[7] 蒋斌，张星海，唐樑，等．正交试验优选黄连解毒汤的机器煎煮工艺[J]．中国实验方剂学杂志,2013,19(23)：32-35．

[8] 束雅春,秦昆明,蔡皓,等．正交试验优选银翘散最佳传统煎煮工艺[J]．中华中医药杂志,2012,27(10)：2651-2655．

[9] 李祥,陈长勋,郑冰．正交试验法优选加减玉女煎的提取工艺[J]．中成药,2011,33(1)：176-178．

[10] 缪红,王一鸣．正交试验优选养心方煎剂煎煮工艺[J]．中国药房,2010, 21(19)：1757-1758．

Objective To optimize YJD machine decoction process of Huanglian Jiedu decoction by orthogonal test, and make some references for the machine decoction process standard． Methods With composite score of honokiol as index，effects of soak time，decoction time and decoction temperature on machine decoction process were optimized by single factor tests and orthogonal test． Results Optimal machine decoction process was as following: Soaked 30 minutes，decoction time 20 minutes，decoction temperature 115℃． Conclusion Optimized machine decoction process was reasonable and feasible with controllable evaluation index，it could provide experimental basis for developing of machine decoction process of Chinese medicine decoctions．

Dug-decocting machine; Banxianhoupu decoction; Optimization of decoction process

10．3969/j．issn．1009-4393．2015．32．002

江苏 215003 苏州中医医院 （陈爱娟 蒋斌 朱慧 王玳珠）

王玳珠 E-mail：wangdz60@sina.com