李名慧，王永生

(南华大学 公共卫生学院，湖南 衡阳 421001)

铀是一种无处不在的放射性元素。在工业废弃物中，铀主要呈阳离子复合物如氟化铀酰、碳酸铀酰、磷酸铀酰或硫酸铀酰等形式存在;在水溶液中，六价铀最为稳定［1］。随着经济社会发展，铀在军事和核能方面的应用日益增加，人们有更多的机会暴露于这种有害金属。因此，建立一种经济、快捷测铀的新方法也就势在必行。本文基于富G 寡核苷酸形成的G-四聚体能与NMM 作用导致荧光显著增强［2-4］，而UO2+2与NMM 在酸性环境下作用导致荧光猝灭，并抑制NMM 与G-四聚体的作用，且荧光强度变化值与UO2+2浓度在一定范围内线性相关的原理，建立了富G 寡核苷酸-N-甲基卟啉二丙酸荧光法测定铀的新方法。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

醋酸双氧铀、NMM、HEPES、MES、Tris-HCl 等均为分析纯;DNA 制品:5’-AGGAAGATGGGAGGGAGGGAGGGTACTAT-3’;实验用水均为灭菌超纯水(电阻为18.26 MΩ);NMM 按照文献［4-5］配制。

UV-2550 紫外-可见分光光度计;F-4500 荧光分光光度计;AB204-S 电子分析天平;PB-21 型精密酸度计。

1.2 实验方法

取35 μL 2.16 ×10－6mol/L NMM 溶液，不同体积1.0 ×10－5mol/L UO2+2 标准溶液，40 μL pH 5.5的HEPES 缓冲溶液，40 μL 1. 0 mol/L KCl 溶液，40 μL 1.0 mol/L NaCl 溶液，依次加入2 mL EP 管中，用蒸馏水定容至450 μL，摇匀，常温下反应20 min，加入50 μL 1.0 ×10－6mol/L DNA，室温反应20 min，在荧光分光光度计进行560 ～700 nm 波长范围内扫描，设置λex= 399 nm，在λmax= 609 nm处记录空白组F0和实验组F，得ΔF=F0－F。

2 结果与讨论

2.1 荧光光谱特征

荧光光谱分析见图1。

图1 NMM--G-四聚体体系荧光光谱图Fig.1 Fluorescence spectra of the NMM--Gquadruplex system

NMM 本身具有微弱的荧光。NMM 能够特异性地识别G-四聚体［5］，导致体系的荧光强度显著增强(图1，曲线1)。在酸性环境中，可与之发生反应猝灭荧光。应用不同浓度的在酸性环境下与一定量的NMM 作用后，再加入适量的G 四聚体，此时溶液中剩余的NMM 可与G 四聚体结合，使荧光增强。……