李志超，丁向阳，魏森林，郗慧

（1.河南超杰园林设计工程有限公司，河南 郑州 450000；2.河南省林业科学研究院，河南 郑州 450008；3.方城县林业技术指导站，河南 方城 473200；4.河南科技大学，河南 洛阳 471003）

柿（Diospyros kaki Thunb.）为柿科（Ebenaceae）柿属（Diospyros L.）植物，作为重要的木本粮食树种，在人民生活中占有重要地位，在我国已有两千多年的栽培历史。近年来，柿被广泛用于医疗保健、特色食（饮）品等，如在韩国颇受欢迎的化妆品中多含有柿成分，其加工产品包括柿酒、柿醋、柿饼、柿霜糖等[1]，不同的应用方面都产生了巨大的经济效益和社会效益。

但是近年来，中国柿主产区炭疽病发生严重，尤其是 2009年，陕西富平县柿炭疽病引起柿果大量脱落，柿树死亡，极大地挫伤了柿农的积极性；福建省永泰县柿炭疽病发病果园近520 hm2，占全县种植面积的 65%左右，病叶率为 15.6%；病果率平均6.3%，病情指数3.05[2,3]；柿炭疽病严重发生的情况在其他主产区也有类似报道，经 2013－2014年调查，河南省南阳地区的西峡县、南召县和洛阳地区的栾川县均有柿炭疽病的发生[4]。为了掌握柿炭疽病菌的发生发展规律，有必要人为地进行炭疽病菌的接种试验。本试验使用从柿树炭疽病样本分离出的病菌配制成浓度为1×106/mL孢子悬浮液，采用有伤接种和无伤接种两种方法，对选自河南省、陕西省的9个柿品种进行接种试验，通过对比分析不同接种方法的接种效果及不同柿品种的感病情况，以及不同柿栽培品种对炭疽病的抗性，为研究柿炭疽病的发病规律提供依据，对柿生产及炭疽病的综合防治具有科学指导意义。

1 试验材料与方法

1.1 材料

1.1.1 盆栽柿苗

（1）接种试验所用柿苗选自陕西富平、河南渑池、平顶山鲁山等地的9个品种，90株盆栽柿苗进行接种试验，所有盆栽苗均为2 a生嫁接苗，砧木为君迁子或本砧。（2）苗木假植：将苗木假植在土中。假植穴的规格为1 m2左右，深40 cm左右；（3）盆土配制：先将草炭与泥炭、松针土及园土（土层距地面20 cm以上部分的土）按照1︰1︰1︰1的比例搅拌混匀，敲碎碾细，并加入少量煤炉渣和有机肥，将混合后的土壤充分混匀，喷洒多菌灵 100倍液后，堆成山包状，表面覆盖一层薄膜，在阳光下暴晒堆沤24 h以上，备用；（4）柿苗定植：对假植苗根系进行修剪。先在花盆盆底部放置1 cm～2 cm厚的炉渣、碎石子或砂子，以利排水通气，然后加入少量盆土。柿苗根部浸泡在1 000 mg/L生根粉溶剂（40%萘乙酸）溶液中5～10 s后取出。将柿苗放在盆中央，加入盆土，将土轻轻压实，使土与根密接，浇透水，标记盆号及品种。（5）定干：盆栽苗成活后，在嫁接处上方20～30 cm处定干，保留饱满芽3～5个。

1.1.2 接种菌株（1）接种菌株：菌株为分离自恭城水柿发病枝条、叶片的炭疽菌 GXGCLMLL-1；（2）制备分生孢子悬浮液：将菌株配置成浓度为 1×106/mL（用孢子计数器显微镜下观察计算得出）的孢子悬浮液作为接种体备用。

1.2 试验方法

1.2.1 有伤接种：用消毒的大头针在接种植物表面扎孔，标记后用移液器吸取孢子悬浮液5滴，滴加到孔上，套袋保湿，以无菌水为对照。每株接种 1枝新梢以及3片叶柄。

1.2.2 无伤接种：用记号笔标记接种中心，吸取孢子悬浮液滴在中心处5滴，套袋保湿，以无菌水做对照。每株接种1枝新梢及3片叶柄，隔离保存[5,6]。接种试验设计见表1。

表1 接种试验设计

1.2.3 统计观察：接种后，每隔12 h观察1次，测量病斑大小。比较同种接种方法不同品种间接种病情差异，比较相同品种不同接种方法的接种效果区别，计算病斑生长速率。

病斑生长速率（cm/d）=（最大病斑 cm/最大病斑出现时间h）×24 h。

2 结果与分析

2.1 接种后病情发展观察

无伤接种接种部位未出现发病症状，但在非接种部位会出现轻微病斑。

通过统计有伤接种发病时间及病斑生长，试验结果见表2。

表2 接种后不同品种的感病情况

从表2可以看出，不同柿树品种对炭疽病的抗性不同，最大病斑的大小及出现时间也存在差异，其中尖柿发病最早，在接种后 24 h就开始出现病症，枝条部位病斑最大为2.4 cm，叶片上病斑最大为2.3 cm，而牛心柿与盖柿发病最晚，在接种后60 h才开始出现病症，其余品种则主要在接种36～48 h后开始发病。病情发展最快的尖柿病斑在48 h后出现显著增长，最慢的为渑池牛心柿96 h后才开始出现显著增长，试验发现多数品种在接种144 h后均出现了落叶现象。

进一步比较发现，不同器官对病菌的敏感性不同，所有柿树品种叶片都较枝条先发病，而且叶片上最大病斑均大于枝条上病斑。叶片病斑扩展速率普遍在0.34～0.5 cm/d之间，其中贡柿、次郎扩展最快，达到0.5 cm/d，其次为禅寺丸、西村早生、西村早生、尖柿病斑扩展率也都在0.40～0.44 cm/d之间，而牛心柿、盖柿、斤柿病斑扩展速率较慢，其中牛心柿病斑扩展速率最低，为0.34 cm/d。

2.2 接种后症状观察

观察发现，叶片有伤侵染过程中接种24 h后，在接种部位会出现黑褐色小斑点，随后斑点会沿叶柄逐渐伸长，呈不规则椭圆形或长条形，不同品种最大病斑长度在1.7～2.2 cm之间，宽度约为0.2 cm。发病部位中心处为深黑色，周边为黑褐色。被侵染枝条于48 h后在接种部位出现轻微黑褐色斑点，斑点逐渐扩大，沿植株生长方向蔓延；接种96 h后，开始在接种部位周围出现大量密集不规则的分布黑点；于接种144 h后会出现连片状病斑；个别品种在发病部位断裂。

3 小结与讨论

由实验结果可以看出，牛心柿、盖柿接种炭疽病病菌后，病斑扩展速率较慢，病斑较小，感病时间较晚，推测这些品种可能对炭疽病抗病性较高。而尖柿、贡柿、次郎病斑扩展速率快，病斑较大，感病时间早，发病快，表明这些品种可能对炭疽病抗性较低，由此可见，柿树不同品种间对炭疽病菌的抗性存在差异[7]。有伤接种后，病情表现更为明显和稳定，说明有伤接种较无伤接种更为有效。

研究发现炭疽病在柿树种间具有严格的寄主专化性，寄主植物为了抵御病原菌，相应地形成了物理的、化学的防卫机制，阻止附着胞发育、侵染钉穿透和侵染菌丝的定殖[8]，由此推测牛心柿、盖柿等品种具有更强的防御生理功能。

[1]姚允聪，张玉萍，孔云，等.优质柿子无公害生产关键技术问答[M].北京：中国林业出版社，2009：43-46.

[2]高文胜.我国甜柿生产现状及发展前景[J].北京农业，2006（8）：33-36.

[3]卢义华.太秋甜柿在福建永定县的引种表现及栽培技术[J].中国南方果树，2013，（03）：39-42.

[4]李晓梦，丁向阳.多效唑对黑柿生长的影响[J].林业科技开发，2008（5）：61.

[5]牛晓庆，余凤玉， 符海泉，等.椰子茎泻血病菌人工接种方法的研究及抗病品种的筛选[J].中国南方果树，2015（1）：44-46.

[6]袁庆华，张文淑，李敏.苜蓿褐斑病的离体叶接种研究[J].草地学报，2001（1）：21-24.

[7]张敬泽，徐同，何黎平.浙江无核柿炭疽病菌鉴定及附着胞形成过程中的核相变化[J].菌物系统，2005，24（3）：446-456.

[8]张敬泽，胡东维，徐同.柿树炭疽菌侵染柿树叶柄的超微结构观察[J].植物病理学报，2005，35（5）：434-441.