牛蒡子苷纯化工艺优选研究*
2015-06-07付元元刘贵娟
毛 郴 ,付元元 ,刘贵娟 ,赵 语
(1.重庆医科大学附属第一医院药学部,重庆 400016;2.重庆医科大学附属大学城医院药学部,重庆 401331)
牛蒡子 Fructus arctii为菊科牛蒡属植物牛蒡 Arctium lappa L.的干燥成熟果实。现代药理学研究证明,牛蒡子提取物有抗肿瘤、降血糖、抗炎、抗菌、抗流感、抗人类免疫缺陷病毒(HIV)和抑制血小板聚集等作用[1-4]。牛蒡子苷是牛蒡子的主要有效成分,对于糖尿病及其微血管病变的临床应用前景值得期待[5]。本研究中采用正交试验设计,以牛蒡子苷含量为指标,优选出牛蒡子乙醇回流法的提取条件,再经大孔吸附树脂、硅胶H层析柱纯化精制,得到高纯度的牛蒡子苷。现报道如下。
1 仪器与试药
高效液相色谱(HPLC)仪(美国Agilent 1100型);RE-5203A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);JY2002型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)。牛蒡子苷对照品(中国食品药品检定研究院);牛蒡子药材(重庆桐君阁股份有限公司);AB-8型大孔吸附树脂(净化级),D101型大孔吸附树脂(净化级),均为南开大学化工厂产品;HPLC用甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 粗提
通过文献调研[6-8],确定乙醇回流提取法为适宜的牛蒡子苷提取方法。牛蒡子药材干燥,粉碎,过4号筛,索氏回流提取法,经6倍量石油醚脱脂3次,挥干石油醚,称重,得脱脂粉末;脱脂粉末经8倍量70%乙醇回流提取3次,每次1 h,合并提取液,旋转蒸发得乙醇提取液的浓缩浸膏。
2.2 含量测定
色谱条件:色谱柱为 Diamonsil TMODS-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇 -水(1 ∶1.1);测定波长 280 nm;流速为0.6 mL/min;进样量为10 μL;柱温:室温。理论塔板数按牛蒡子苷峰计算应不低于1 500。……
