不同剂量川芎天麻汤对小鼠中枢神经系统的影响*

2015-06-02王田田付彦君

天津中医药大学学报 2015年5期

刘晴，王田田，梁源，付彦君

（1.辽宁中医药大学第一临床学院，沈阳 110847；2.辽宁中医药大学，沈阳 110847）

早在《神农本草经》中就有对川芎和天麻的记载，川芎“味辛温，主中风入脑，头痛,寒痹”；天麻“赤箭，味辛温。久服益气力，长阴，肥健，轻身，增年”[1]。宋朝的《圣济总录》亦载有川芎、天麻配伍应用，“芎䓖（即川芎）一斤大者，天麻四两（比例为4∶1）。同捣罗为末，蜜炼为丸，治头风旋运，目昏眩急，偏正头痛，解身体拘倦，清爽神志，通利关窍”[2]。在现代中医临床中川芎、天麻配伍常被用来治疗头痛、高血压等病症[3-4]。有研究显示，川芎嗪对中枢神经有镇静作用[5]，天麻对中枢神经系统也有一定的保护作用[6-7]。但川芎、天麻按传统的配伍比例对中枢神经系统的影响尚未见文献报道。本研究应用旷场实验的方法，观察天麻、川芎对中枢神经系统的影响。

1 实验材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物清洁雄性昆明小鼠，体质量18~22 g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供。

1.1.2 实验药品川芎、天麻均购于辽宁中医药大学附属医院药局。

1.1.3 实验仪器采用成都泰盟软件有限公司OFT-100型号旷场实验视频分析系统。旷场实验箱是长×宽×高为50 cm×50 cm×40 cm的黑箱，底部画有25个小方格，周边16个格为外周区，中间9格为中央区。

1.2 实验方法

1.2.1 药品制备按1∶4配比川芎、天麻，加8倍清水，浸泡1 h，煮沸后再煎煮40 min，滤出煎煮液。再加6倍水，煮沸后再煮40 min，滤出煎煮液。将两次煎煮液混合，浓缩至3.6 g/mL。再将药液留取一部分待用之后，剩余药液分别用蒸馏水配制成2.4、1.2、0.3 g/mL，4℃冰箱保存备用（各剂量组留取药量大约为每组30 mL）。无菌生理盐水100 mL。4℃冰箱保存备用。

1.2.2 实验方法雄性小鼠40只，按随机数字表法随机分为5组，分别为生理盐水对照组、川芎天麻汤3 g/kg组（临床等效剂量组）、12 g/kg组（4倍临床等效剂量）、24 g/kg组（8倍临床等效剂量）和36 g/kg组（12倍临床等效剂量）。连续灌胃给药11 d，末次给药2 h后进行旷场实验，记录小鼠在旷场环境内的运动时间、运动路程、在中央区及外周区停留的时间。

1.3 统计学分析使用SPSS 18.0统计软件，计量资料均以均值±标准差（s）表示，对旷场实验两组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较若方差齐采用LSD法，若方法不齐采用Dunnett’s法进行统计处理，以P<0.05为有统计学意义。

2 实验结果

2.1 川芎天麻汤对小鼠运动时间和运动路程的影响不同剂量的川芎天麻汤对小鼠在旷场实验中的运动时间和路程均有抑制作用，且随剂量增加，抑制作用增强，见表1。

表1 川芎天麻汤对小鼠运动路程的影响（s）

注：与生理盐水组相比，*P<0.05；与 12 g/kg 组相比，#P<0.05；与3 g/kg组相比，△P<0.05。

组别运动路程（cm）生理盐水组 16 897.12±799.01川芎天麻汤3 g/kg组 16 442.11±764.61川芎天麻汤12 g/kg组 15 854.61±494.64*川芎天麻汤24 g/kg组 15 834.47±257.88*川芎天麻汤 36 g/kg 组 15 221.26±595.10*#△n 8 8 8 8 8运动时间（s）125.59±7.83 119.72±13.10 115.37±7.02*111.80±3.50*103.21± 6.59*#△

从表1可以看出，川芎天麻汤的实验组小鼠的运动时间及运动路程较生理盐水组有所减少，且随着川芎天麻汤浓度的增加，小鼠的运动时间及运动路程逐渐减少。川芎天麻汤的12、24、36 g/kg组小鼠的运动时间减少、运动路程减少，与生理盐水组比较差异有统计学意义（P<0.05）。36 g/kg组小鼠的运动时间、运动路程与3 g/kg组、12 g/kg组的比较差异有统计学意义（P<0.05）。3 g/kg组的运动时间、运动路程与生理盐水组比较差异无统计学意义（P>0.05）。36 g/kg组小鼠的运动时间、运动路程与24 g/kg组的比较差异无统计学意义（P>0.05）。

2.2 川芎天麻汤对小鼠在中央区停留时间的影响川芎天麻汤的实验组小鼠在中央区停留时间均少于生理盐水组小鼠，且随药物浓度的增加，小鼠在中央区停留时间也随之增加；反之，实验组小鼠在外周区停留时间与生理盐水组小鼠相比更长，且随药物浓度增加，小鼠在外周区停留时间随之减少。见表2。

表2 川芎天麻汤对小鼠在中央区停留时间的影响（s）s

注：与生理盐水组相比，*P<0.05；与 12 g/kg组相比，#P<0.05；与3 g/kg组相比，△P<0.05。

组别生理盐水组川芎天麻汤3 g/kg组川芎天麻汤12 g/kg组川芎天麻汤24 g/kg组川芎天麻汤36 g/kg组n 8 8 8 8 8中心区停留时间外周区停留时间64.33±4.90 835.67±4.90 66.72±7.57 833.28±7.57 74.03±4.04* 825.97±4.04*84.96±5.90*#△ 815.04±5.90*#△85.61±7.65*#△ 814.39±7.65*#△

从表2可以看出，川芎天麻汤的12、24、36 g/kg组小鼠在中心区停留时间增加，与生理盐水组比较差异有统计学意义（P<0.05)。24 g/kg组、36 g/kg组小鼠在中心区停留时间分别与3 g/kg组、12 g/kg组比较差异有统计学意义（P<0.05）。3 g/kg组小鼠在中心区停留时间与生理盐水组比较差异无统计学意义（P>0.05)。36 g/kg组小鼠小鼠在中心区停留时间与24 g/kg组的比较差异无统计学意义（P>0.05)。

3 讨论

现代研究表明，川芎主要成分为川芎嗪，能通过血脑屏障改善微循环[7-8]，抗血栓改善血液流变学，保护冠状动脉[9-10]，保护心肌细胞及心肌缺血再灌注损伤，清除氧自由基，还有镇痛、抗癫痫、改善学习记忆能力、抗组织纤维化、抗肿瘤的作用，此外，对呼吸、消化、泌尿系统均有作用[11]。川芎水煎剂对动物神经系统有镇静作用，并有明显而持久的降压作用[12]。天麻有效成分天麻苷元可作用于脑部发挥药效[13]，具体机制尚不明确。天麻水、醇提取物及不同制剂，均能使小鼠自发活动减少延长睡眠时间，可抑制或缩短实验性癫痫的发作时间，天麻还可以降低外周血管、脑血管和冠状血管阻力[14]，有降压减慢心率及镇痛抗炎的作用[15]。

在旷场实验中各组小鼠均表现出在外周停留时间明显多于在中央区停留时间，这与小鼠趋避未知环境的生活习性有关。根据实验数据可知，所有实验组与生理盐水对照组相比小鼠的总运动时间、总运动路程均有减少，说明川芎天麻药对对小鼠中枢神经有镇静作用，对小鼠自主活动有抑制作用，这与已有的研究结论一致[16-17]。川芎中的川芎嗪和阿魏酸均对小鼠的中枢神经兴奋性有明显的抑制作用[18]，且川芎嗪的镇静作用明显于阿魏酸。天麻中的天麻素、天麻苷元、香荚兰醇等成分也能够显著地抑制小鼠的中枢神经兴奋性。天麻注射液能够通过抑制小鼠中枢神经对去甲肾上腺素的重提取和储存，从而可使小鼠脑内去甲肾上腺素含量减少，这可能是天麻抑制小鼠中枢神经的机制作用。实验中，随着药物浓度增加，各组小鼠在中心区活动时间有明显增高趋势，说明小鼠的运动能力下降，对未知环境的恐惧感减少，中枢兴奋性降低。陈振华等[19]人的研究中提到，旷场实验中小鼠在中央格停留时间的延长、警觉性的降低以及紧张状态的减弱等均表示小鼠的兴奋性下降，这对本课题组的实验具有明确的支持意义。随实验药物剂量逐渐增加，小鼠总的运动路程和运动时间均随之减少，说明川芎天麻汤对小鼠镇静、自主活动抑制作用有一定剂量依赖性。对于传统比例配伍的天麻、川芎的药对组合对中枢神经系统的影响与两药的单独应用对中枢神经系统的影响的差别，有待进一步的实验研究。

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