覃太敏，冉瑞智

（1.湖北恩施州卫生学校，湖北 恩施 445000；2.湖北省恩施州中心医院肿瘤科，湖北 恩施 445000）

肺癌是当今对人类健康与生命危害最大的恶性肿瘤。黄芩素（baicalein）是从唇形科植物黄芩干燥根中提取的黄酮类化合物，具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗变态反应、抗氧化、抗凝、抗血栓形成等多种药理活性［1-2］。研究显示，黄芩素对皮肤鳞癌细胞A431、食管癌细胞EC109等均具有抑制作用，也能降低人类骨肉瘤MG63细胞的侵袭转移能力［3-4］。本试验中研究了黄芩素对人肺癌细胞A549的增殖抑制作用及细胞周期的影响，并探讨了其作用机制，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料与仪器

人肺癌细胞A549由恩施州中心医院肿瘤研究室提供。黄芩素（中国药品生物制品检定所，批号为201002，纯度不低于98.0% ），用二甲基亚砜（DMSO）配制成母液，于-20℃保存；RPMI 1640培养基（美国Gibco公司）；四甲基偶氮唑盐（MTT，美国Sigma公司）；Survivin及Caspase-3兔抗人多克隆抗体、免疫组织化学二抗试剂盒、胎牛血清、胰蛋白酶和DMSO（北京中杉金桥生物技术有限公司）；EphA2兔抗人多克隆抗体（Santa Cruz公司）；流式细胞术二抗（Jackson Immunoresearch Laboratiries Inc公司）。NAPCO CO2培养箱（美国 Nuair公司）；Elx酶标仪（Bio-TEK公司）；EPICS XL流式细胞仪（美国Coulter公司）。

1.2 方法

细胞培养：将人肺癌细胞A549常规培养于含10%胎牛血清、100 U／mL青霉素和0.1 g／L链霉素的RPMI 1640培养液中，置37℃及5%CO2、饱和湿度培养箱中培养24 h，传代后取对数生长期细胞用于试验。

黄芩素对细胞的生长抑制作用（MTT法）：将对数生长期人肺癌细胞A549用0.25%的胰蛋白酶消化后用RPMI 1640培养液制成1×104个／mL的细胞悬液，然后接种于96孔板，每孔100 μL，置37℃及5%CO2、饱和湿度培养箱中培养24 h，吸出培养液，加入新鲜培养液 180 μL及黄芩素20 μL。……