三峡库区丹参中砷暴露对小鼠的肝肾毒性损伤研究*
2015-05-03黄海兵
刘 佳 ,黄海兵 ,余 蕾
(1.重庆三峡中心医院,重庆 404120; 2.重庆三峡医药高等专科学校,重庆 404120)
丹参 Salvia miltiorriza Bunge.为常用的活血化瘀药,药用其根及根茎,性味苦、微寒,归心、肝经,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效[1]。但由于受生长环境及地域等影响,易致丹参药材中重金属有害元素,如砷(As)、镉(Cd)、铅(Pb)、汞(Hg)等含量超标[2-3]。前期研究发现,三峡库区丹参中砷含量超标。砷是全球重要的环境污染物之一,可致机体多器官损伤甚至癌症[4-5]。杨瑞瑛等[6]用亚砷酸钠诱导出大鼠亚急性砷中毒模型,显示中毒组大鼠各脏器组织中砷的含量均极显著高于正常对照组(P<0.01)。本试验中选用三峡库区产丹参,用丹参提取物给小鼠灌胃给药,观察砷的代谢靶器官肝、肾病理学变化,并测定砷敏感毒性基因的表达,为丹参中砷元素的质量控制和毒理学研究提供参考,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 动物、试药与仪器
动物:昆明种小鼠,清洁级,雄性,体重18~22 g,合格证号0002438,购自第三军医大学大坪医院实验动物中心。饲养环境SPF级,室温20~25℃,相对湿度40% ~70%,每日光照12 h,每笼5只,自由摄食、饮水。
试药:丹参采集于重庆万州区后山镇,经重庆三峡医药高等专科学校药学系李晶博士鉴定为正品。雄黄(北京同仁堂有限公司,国药准字Z11020959);RNA提取纯化试剂盒(南京建成生物研究所,货号为E058);逆转试剂盒、Trizol(宝生物工程<大连>有限公司,货号分别为 DRR014A,9109);SYBR Green PCR Master Mix(英国 ABI公司,货号为 4367659);金属硫蛋白 -1(MT-1)引物(上海吉凯基因化学技术有限公司合成,上游序列AATGTGCCCAGGGCTGTGT,下游序列 GCTGGGTTGGTCCGATACTATT);其他试剂均为分析纯。……
