崔春婷

(郑州市第一人民医院，河南 郑州 450004)



甜地丁药理作用研究

崔春婷

(郑州市第一人民医院，河南 郑州 450004)

目的：研究甜地丁的药理作用。方法：将40只昆明种小鼠分为甜地丁高、中、低浓度组和空白对照组各10例，考察甜地丁对小鼠溶血素抗体生成、耳廓肿胀度、醋酸致扭体反应的影响。结果：甜地丁高、中、低浓度组小鼠OD值均显著高于空白对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；高、中、低浓度甜地丁水煎液组、乙酸乙酯萃取物组小鼠15s内扭体次数、耳廓肿胀度均显著低于空白对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；高、中浓度水煎液组小鼠扭体次数、耳廓肿胀度显著低于低浓度组，差异具有统计学意义(P<0.05)；水煎液组小鼠扭体次数、耳廓肿胀度显著低于乙酸乙酯萃取物组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：甜地丁水煎液和乙酸乙酯萃取物均具有良好的免疫活性、抗炎活性、镇痛作用，且乙酸乙酯萃取物活性强于水煎液。

甜地丁；免疫活性；抗菌作用；抗炎活性

甜地丁是豆科植物米口袋Gueldenstaedtiaverna(Georgi) A. Bor.的干燥全草。近年来，关于甜地丁的药效学研究报道越来越多，但对其清热解毒的药理作用研究则相对较少[1]。为此，本研究对甜地丁的免疫、抗炎、镇痛活性进行研究，明确其消肿凉血、清热解毒的物质基础，现报道如下。

1 材料与仪器

1.1 实验动物

昆明种小鼠，雌雄各半，体重20～24g，均由山东中医药大学实验动物中心提供。

1.2 试剂

鸡红细胞悬液(5%)、氯化钠注射液、1%刚果红、二甲苯、乙酸乙醇、乙醇、伊文思蓝、醋酸均为分析纯；阿司匹林片、羧甲基纤维素钠、甜地丁药材粗粉等。

1.3 仪器

电子天平、灌胃器、1mL注射器、吸量移液管、试管(10mL、5mL)、分光光度计、低速离心机、玻璃铅笔、镊子、血球吸管、旋转蒸发器、恒温真空干燥箱等。

2 方法

2.1 甜地丁免疫活性研究

2.1.1 药液制备 根据《药典》规定的甜地丁人正常用量(9～15g)，计算出小鼠的等效剂量，高剂量为等效剂量的8倍。将甜地丁药材粗粉放入10倍量清水中浸泡30min，然后进行煎煮，持续煮沸30min，过滤，在滤渣中加入8倍量清水继续煎煮30min，滤出药液，合并两次所得药液，水浴浓缩，分别制成高、中、低三种浓度的甜地丁水煎液(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)备用。

2.1.2 实验方法 将40只雄性小鼠随机分为4组，分别采用高、中、低浓度甜地丁水煎液及生理盐水灌胃，剂量均为0.02mL/g，每日1次，持续灌胃1周。于灌胃前1天腹腔注射鸡红细胞0.2mL，进行刺激免疫。灌胃结束后第1天，取小鼠眼球血，离心后取上层血清，加入NS稀释。取1mL稀释血清，加入0.5mL鸡红细胞、0.5mL补体(10%)，混合均匀后恒温水浴(30℃)，在冰水中终止反应。然后离心，取上层清液，使用分光光度计进行比色，检测OD值，以OD值评价血清溶血素水平。

2.2 甜地丁镇痛作用研究

2.2.1 药液制备 取甜地丁药材粗粉适量，放入10倍量清水中浸泡30min，煮沸后煎煮30min，滤出药液，在滤渣中加入8倍量水继续煎煮30min，合并两次滤液，浓缩、蒸干，以CMC-Na溶液(0.5%)溶解，制成高、中、低三种浓度(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)药液。

取甜地丁药材粗粉适量，放入10倍量乙醇(70%)提取3次，合并滤液，浓缩蒸干，以水分溶解浸膏，再以石油醚、乙酸乙酯萃取，浓缩蒸干，在所得干膏中加入CMC-Na溶液(0.5%)溶解，制成高、中、低三种浓度(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)药液。

2.2.2 实验方法 将80只雄性小鼠分为8组，分别采用高、中、低浓度甜地丁水煎液、乙酸乙酯萃取液、生理盐水、阿司匹林灌胃，剂量均为2mL/g，每日1次，持续灌胃5天。末次给药0.5h后，腹腔注射醋酸(0.5ml/L)，剂量为0.01mL/g。记录各组小鼠注射后20min内的扭体次数。

2.3 甜地丁抗炎活性实验研究

药液制备方法、动物分组及灌胃方法均同镇痛作用实验研究，连续灌胃7天，末次给药1h后，于小鼠右耳两面涂抹二甲苯致炎，2h后处死。使用打孔器(8mm)在小鼠两耳相同部位打孔，取耳片，计算耳片肿胀度(右耳片质量与左耳片质量的差值)。

2.4 统计学方法

3 结果

3.1 免疫活性实验结果

高、中、低浓度甜地丁水煎液组小鼠OD值均显著高于空白对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；高、中、低浓度甜地丁水煎液三组小鼠OD值比较差异无统计学意义(P>0.05)。 4组小鼠OD值比较见表1。

表1 4组小鼠OD值比较

注：表示与空白对照组比较，*P<0.05。下表同。

3.2 镇痛作用实验结果

高、中、低浓度甜地丁水煎液组、乙酸乙酯萃取物组小鼠15秒内扭体次数均显著低于空白对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；高、中、低浓度乙酸乙酯萃取物组小鼠扭体次数比较差异无统计意义(P>0.05)；高、中浓度甜地丁水煎液组小鼠扭体次数显著低于低浓度组，差异具有统计学意义(P<0.05)；水煎液组小鼠扭体次数显著低于乙酸乙酯萃取物组，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 各组小鼠扭体次数比较

3.3 抗炎活性实验结果

甜地丁水煎液各组、乙酸乙酯萃取物各组、阿司匹林组小鼠耳肿胀度均显著低于空白对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；乙酸乙酯萃取物各组小鼠耳肿胀度比较差异无统计学意义(P>0.05)；甜地丁水煎液中、高浓度组小鼠耳肿胀度显著低于低浓度组，差异具有统计学意义(P<0.05)；甜地丁水煎液各组小鼠耳肿胀度均显著低于乙酸乙酯萃取物各组，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表3。

4 讨论

甜地丁为米口袋属豆科植物，其化学成分以黄酮、挥发油、有机酸类、甾醇、萜为主[2]。现代药理学研究显示[3]，米口袋属植物具有抗炎、抗菌、抗氧化等作用，主要用于治疗腹泻、肠炎、化脓性炎症、阑尾炎、痢疾等，其不仅是民间常用药，更是多种中成药的重要原料。

表3 各组小鼠的耳肿胀度比较

甜地丁含有皂苷、多糖、氨基酸、黄酮等活性物质，具有补益功效[4]。一般来说，中药的治疗效果是整体有效成分群共同作用的结果，甜地丁多以水煎液形式入药，故在免疫活性实验研究中选用了水煎剂。血清溶血素水平是反映机体非特异性免疫功能的重要指标，通过测定溶血值，可了解B细胞增殖分化情况以及体液在补体结合后的溶血素分泌能力，监测给药与未给药小鼠的溶血素值，可反映甜地丁对机体免疫功能的影响[5]。研究结果显示，高、中、低浓度甜地丁水煎剂组小鼠OD值均显著高于空白对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)，但组间比较无统计学差异(P>0.05)。提示甜地丁水煎液能有效刺激B细胞分化增殖，使之转变为浆细胞，从而增强机体免疫功能。

甜地丁具有消痈散疖、清热解毒的功效，是治疗痈疽疔疫、丹毒、黄疸、目赤肿痛等证的常用药[6]。小鼠醋酸致扭体实验结果显示，不同浓度甜地丁水煎剂、乙酸乙酯提取物均能有效减少扭体次数，对化学致痛具有良好的止痛效果，且以甜地丁水煎剂的镇痛效果更优。

甜地丁作为民间常用中草药，被广泛用于腹泻、阑尾炎、肠炎、痢疾等多种炎症的临床治疗，其抗炎作用广泛。炎症是机体的一种防御性反应，在人类疾病中十分常见，组织增生、血管反应、局部组织损伤等均属于炎症范畴。小鼠耳廓肿胀实验结果显示，甜地丁乙酸乙酯提取物、水煎液均能有效抑制小鼠耳廓肿胀，表明甜地丁可有效抑制局部组织损伤引起的炎症反应，具有良好的抗炎活性。

综上所述，甜地丁水煎液和乙酸乙酯萃取物均具有良好的免疫活性、抗炎活性、镇痛作用，且乙酸乙酯萃取物活性强于水煎液。

[1] 刘英姿,安娜,周铁忠,等.中药主要免疫活性成分的药理学研究进展[J].中国畜牧兽医,2009,36(12):128-132.

[2] 刘永琦,吴晓晶,范萍,等.中药特征与神经免疫效应的关系分析及其Logistic回归模型[J].时珍国医国药,2010,21(6):1508-1510.

[3] 刘红燕,张永清.甜地丁脂溶性成分的GC-MS分析[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(2):121-123.

[4] 李佳,刘红燕,刘谦,等.甜地丁总黄酮提取工艺及体外抗氧化活性研究[J].山东科学,2013,26(6):24-27.

[5] 汪倪萍,魏伟.中药活性成分的抗炎免疫和镇痛作用[J].中国药理学通报,2003,19(4):366-370.

[6] 王爱萍,徐今宁.中药免疫调节作用研究进展[J].中国药业,2011,20(3):75-77.

(责任编辑：尹晨茹)

2014-12-21

崔春婷(1986-)，河南省郑州市第一人民医院中药师，研究方向为天然药物化学。

R285

A

1673-2197(2015)08-0014-02

10.11954/ytctyy.201508007