陆骁骏，邹 江，黄建金，杨 琰

(华润赛科药业有限责任公司，北京 100021)

乙拉西坦(Ⅰ)有R和S两种对映异构体，S-异构体即左乙拉西坦［(S)-Ⅰ］具有生物活性。(S)-Ⅰ作为抗癫痫药具有广谱、起效迅速的抗癫痫活性，药代动力学特性较理想、耐受性和安全性好［1］，特别适用于成人和儿童的难治性部分性发作的辅助治疗(加用于其他抗癫痫药)。

(R)-Ⅰ对于抑制癫痫发作只有轻微或不明显的药效作用［2］。对于(R)-Ⅰ，(S)-N-(1-氨基-1-氧代丁基)-4-氯丁酰胺(USP定为左乙拉西坦杂质 A)和(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸(USP定为左乙拉西坦酸，B)等无生物活性成分的研究，在Ⅰ的质量研究中具有重要意义。

目前，(R)-Ⅰ的制备主要通过高效液相色谱法手性拆分(S)-Ⅰ原料药中的右旋异构体［3－4］，该方法不适合较大量定性研究。而A和B的合成至今未见文献报道。

基于此，本文开发了Ⅰ的质量研究中所需杂质的化学合成法。分别以D-氨基丁酸(D-1)和DL-氨基丁酸(DL-1)为起始原料，经4步反应合成了(R)-Ⅰ和A(纯度97.0%);(S)-Ⅰ经水解反应合成了B(纯度99.9%)(Scheme 1)，其结构经1H NMR和MS确证。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Scheme 1

AM-2600 MHz型核磁共振仪(DMSO-d6为溶剂，TMS为内标);Agilent 6120型质谱仪;Shimadzu 2010型液相色谱仪。

D-1和DL-1，宜兴市康源化工有限公司;其余所用试剂均为化学纯或分析纯。

1.2 合成

(1)D-2·HCl和 DL-2·HCl的合成

在反应瓶中依次加入D-1 20 g(0.194 mol)和无水甲醇140 mL，搅拌使其呈混悬液;于－5℃滴加氯化亚砜16.9 mL，滴毕，于室温反应6 h。旋蒸脱溶，残余物用混合溶剂［A=V(乙酸乙酯)∶V(石油醚)=1∶1］200 mL溶解，析出白色固体，过滤，滤饼真空干燥得 R-2-氨基丁酸甲酯盐酸盐(D-2·HCl)29.6 g，收率 99.3%。

用类似方法合成DL-氨基丁酸甲酯盐酸盐(DL-2·HCl)，收率99.0%。

(2)D-3的合成

在反应瓶中依次加入 D-2·HCl 10 g(65 mmol)和甲醇25 mL，搅拌使其溶解;加人三乙胺9.02 mL(65 mmol)，于室温反应1 h。加乙酸乙酯100 mL，过滤除去三乙胺盐酸盐，滤液蒸干后加乙醚50 mL，过滤，滤饼干燥得白色固体D-3 7.18 g，收率 94.3%。

(3)L-3的合成

在反应瓶中依次加入DL-2·HCl 20 g(0.13 mol)和甲醇50 mL，搅拌使其溶解;加人三乙胺18 mL(0.13 mol)，于室温反应1 h;加乙酸乙酯200 mL，过滤，滤液蒸干得白色固体14.3 g，用95%乙醇80 mL溶解，加入L-酒石酸9.15 g(61 mmol)，于35℃反应2 h。冷却至室温，过滤，滤饼悬浮于100 mL无水甲醇中，冷却至0℃，加入氨水20 mL，反应20 h。过滤，滤液蒸干后，于45℃真空干燥12 h得白色固体L-3 6 g。

(4)D-4·HCl和L-4·HCl的合成

在反应瓶中依次加入D-3 7.18 g(61.3 mmol)和甲醇45 mL，搅拌使其溶解;常压通入氨气至饱和，于室温反应2 d。于0℃滴加浓盐酸至pH 7，过滤，滤液旋蒸脱溶，加入乙醇50 mL，泡洗1 h后干燥得白色固体D-4·HCl 6.75 g，收率79.4%。

用类似方法合成L-4·HCl，收率85.0%。

(5)(R)-Ⅰ和A的合成

在反应瓶中依次加入D-4·HCl 4.08 g(29.4 mmol)和CH2Cl250 mL，搅拌使其溶解;加人无水Na2SO46.80 g，粉末 KOH 6.70 g(120 mmol)和四丁基溴化铵(TBAB)490 mg，于0℃缓慢滴加4-氯丁酰氯6.8 g(48.2 mmol)的 CH2Cl2(5 mL)溶液，滴毕，于室温反应5 h。加入粉末KOH 1.68 g，反应2 h。过滤，滤液用少量CH2Cl2洗涤，旋蒸脱溶，残余物用乙酸乙酯溶解，搅拌1 h(析出大量沉淀);过滤，滤饼经鼓风干燥得白色固体(R)-Ⅰ4.00 g。

用类似方法合成白色固体A。

(R)-Ⅰ:收率 80%，纯度 99.8%［HPLC，色谱条件:CHIRALCEL OD-H色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm，DAICEL)，流动相:正己烷/异丙醇(V/V=80/20)，检测波长:210 nm，流速:1.0 mL· min－1，进 样 量:20 μL，柱 温:25 ℃］;1H NMR δ:6.51(s，1H，CONH2)，5.88(s，1H，CONH2)，4.45(m，1H，CH)，3.40(m，2H，NCH2)，2.40(m，2H，COCH2)，2.04(m，2H，CH2CH2CH2)，1.95(m，1H，CH2CH3)，1.66(m，1H，CH2CH3)，0.87(t，J=7.6 Hz，3H，CH3);MS m/z:171.1{［M+H］+}。

A:收率80%，纯度97%［HPLC，色谱条件:C18 柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，流动相:0.2%磷酸氢二钾溶液/乙腈(V/V=95/5，用稀磷酸调pH 至 6.0)，流速:1 mL·min－1，检测波长:210 nm］;1H NMR δ:6.54(s，2H，CONH2)，5.84(s，1H，NH)，4.45(m，1H，CH)，2.41(m，2H，COCH2)，2.40(m，2H，CH2Cl)，2.10(m，2H，CH2CH2Cl)，1.89(m，1H，CH2CH3)，1.68(m，1H，CH2CH3)，0.96(t，J=7.6 Hz，3H，CH3);MS m/z:207.1{［M+H］+}。

(6)B的合成

在反应瓶中依次加入水60 mL，(S)-Ⅰ20 g(117.5 mmol)及 NaOH 7.1 g(117.5 mmol)，搅拌下回流反应6 h。冷却至25℃，缓慢滴加浓盐酸至pH 1(析出大量固体);过滤，滤饼干燥得白色固体 B 15 g，收率 75.0%，纯度99.9%［HPLC，色谱条件同A］;1H NMR(CDCl3)δ:12.34(s，1H，CO2H)，4.51(dd，J=8.4 Hz，6.8 Hz，1H，CH)，3.52(t，J=5.6 Hz，2H，NCH2)，2.53(m，2H，COCH2)，2.05(m，2H，CH2CH2CH2)，2.01(m，1H，CH2CH3)，1.81(m，1H，CH2CH3)，0.91(t，J=7.6 Hz，3H，CH3);MS m/z:172.1{［M+H］+}。

2 结果与讨论

在(R)-Ⅰ和A的合成中，第一步采用石油醚和乙酸乙酯混合溶剂析晶，收率近100%，纯度99.4%;第四步直接于0℃在D-4·HCl或L-4·HCl的甲醇溶液中加入浓盐酸。该方法操作简便，避免了文献［5］方法中使用毒性较大的溶剂苯，经济环保。

成功合成了右乙拉西坦、左乙拉西坦杂质A及(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸(左乙拉西坦酸)，验证了杂质的产生机理，对左乙拉西坦片的质量研究起着重要作用;左乙拉西坦酸的合成为左乙拉西坦API贮存方法提供了理论依据，避免降解。

［1］Klitgaard H，Matagne A，Gobert J，et al.Evidence for a unique profile of levetiracetam in rodentmodels of seizures and epilepsy［J］.Eur J Pharmacol，1998，353(2－3):191－196.

［2］Alma JG，Michel N.UCB L059，a novel anti-convulsant drug:Pharmacological profile in animals［J］.Eur J pharmacol，1992，222:193.

［3］李丹，李晓宁，李春红.手性拆分左乙拉西坦原料药中的异构体［J］.安徽医药，2008，12(12):1134－1136.

［4］孙启泉，施介华，等.左乙拉西坦右旋对映异构体的HPLC测定［J］.中国医药工业杂志，2008，(8):613－614.

［5］周先波，徐广宇，周伊，等.抗癫痈治疗药物左乙拉西坦的合成研究［J］.精细化工中间体，2005，35(2):27－28.