从全基因表达谱角度探讨理冲汤抑制人子宫肌瘤细胞的作用机制

2015-04-21韩虹娟李冬华钱睿亚许昕黄玉华倪婧张武芳耿建国赵文景

环球中医药 2015年3期

韩虹娟李冬华钱睿亚许昕黄玉华倪婧张武芳耿建国赵文景

子宫肌瘤(uterine leiomyoma)是女性生殖系统最常见的良性肿瘤，育龄期妇女发生较多，发病年龄多为30 ～50 岁，根据部位的不同，其症状以阴道出血、腹部包块、白带增多、疼痛及不孕不育等为主，严重影响妇女的生活质量。迄今为止，子宫肌瘤的发病原因、病理机制尚不十分明确。西医一般认为，其发生发展与雌、孕激素及其受体、生长因子、细胞凋亡、癌基因与抑癌基因、细胞免疫等有关［1］。中医多认为子宫肌瘤的发生与正气不足、瘀血内停有关，治疗多选用扶正祛瘀法，且效果显著。本研究旨在通过观察扶正祛瘀法的代表方——“理冲汤”对体外培养人子宫肌瘤细胞基因表达谱变化的调控为切入点，探讨理冲汤抑制肌瘤生长的分子机制，为临床治疗提供理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 组织来源

取自北京妇幼保健院行子宫肌瘤剔除术的患者，将切除的肌瘤组织部分送病理检查，选择肌瘤组织中间部分做子宫肌瘤原代细胞培养。该患者在手术前3 个月未接受过激素和其他药物治疗，术后病理诊断为肌壁间肌瘤。

1.2 主要试剂和仪器设备

DMEM 培养基(Gibco 公司，批号:NXCO586);胎牛血清(Hyclone 公司，批号:608759);0.25%胰酶(Hyclone 公司，批号:T1300-100);I 型胶原酶(Gibco 公司);PBS 液(Hyclone 公司，批号:NYE0891);TRIZOL 试剂(Invitrogen life technologies，USA，批号:66314);GeneChip(r)PrimeViewTMHuman Gene Expression Array(Affymetrix，USA);GeneChip®3'IVT Express Kit(Affymetrix，USA);Gene-Chip ® Hybridization，Wash，and Stain Kit (Affymetrix，USA);RNA 提取试剂盒(QIAGEN);基因芯片洗脱工作站(GeneChip Fluidics Station 450);基因芯片杂交炉(GeneChip Hybridization Oven 645);基因芯片扫描仪(GeneChip Scanner 3000 7G);PCR 仪(ABI geneAMP® PCR system 7500)。