张丹

肺癌作为威胁人类身体健康的主要恶性肿瘤疾病之一，也称为支气管肺癌，发病率和死亡率较高，其中非小细胞以80%的比例成为了全部肺癌患者的主要人群。表皮生长因子（EGF）及其受体（EGFR）会在不同的细胞类型的肺癌当中表达出不同的特性作用。鉴于EGF疫苗治疗方案与利用EGF传导通路作为靶点的肿瘤靶向治疗已取得良好成果，并在临床与研究的基础上，可以预测存在于肺癌中表皮生长因子受体（EGFR）突变以及对EGFR酪氨酸激酶抑制性药物（EGFR-TKI），会发生相应的治疗反应，具有一定治疗作用，因此将其引入肺癌化疗的临床治疗当中很有必要[1-2]。本研究通过选取本院2013年8月-2014年8月期间在同一医疗组IA-IIIA期（早期肿瘤较小的侧肺或肺门转移）进行根治术后的肺癌患者80例作为临床研究资料，利用ARMS检测方法，进行EGRF基因检测，获取肺癌患者的EGRF基因总突变率和不同临床特征基因突变率，对IB-IIIA期（早期肿瘤较大的侧肺或肺门转移）全部根治术后肺癌患者进行标准含铂两药的化疗，分成EGRF基因突变阳性组和基因突变阴性组，随访16个月，随访内容包括患者化疗后的毒性反应、无病生存期等，分析与研究两组患者的化疗后的毒性反应和疗效作用，进而做好临床观察与总结，具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2013年8月-2014年8月期间在同一医疗组IA-IIIA期进行根治术后的肺癌患者80例作为临床研究资料，其中男48例，女32例，年龄33~79岁，平均（57±12）岁；37例鳞癌患者，43例腺癌患者；吸烟肺癌患者38例，不吸烟患者42例。对新鲜肿瘤组织行EGRF基因检测，IB-IIIA期间化疗患者年龄19~80岁，对其肝肾功能与血液指标检查均合格，PS评分≤2分，在术后化疗之前确认全部患者未曾做任何抗肿瘤化疗的治疗。IB-IIIA期的患者共有48例，将接受化疗的肺癌患者随机划分为EGFR基因突变阳性组20例和基因突变阴性组28例两组，并对两组患者实施随访16个月，患者生存时间低于16个月则随访工作随患者死亡而结束。

1.2 方法

1.2.1 突变检测 首先，加入1 mL无水乙醇，在室温12000 rpm下震荡摇匀10 s，并离心3 min，以便去除上清，为了让乙醇挥发，在室温开盖放置l0 min左右，将180 μL Buffer DTL和20 μL Proteinase K Solution混合振荡在56℃下消化4 h，随后再加入l0 μL BufferDES，放入温度90 ℃恒温加热器中，待液体降至室温，即可用掌式离心机离心5~10 s。其次，放入20 μL Buffer DTB及200 μL无水乙醇，操作同上，在DNA吸附柱中注入转移液体，离心1 min倒掉，最后将吸附柱移到离心管中，并往DNA吸附膜滴入50 μL BufferDTE，然后放置10 min，离心1 min，收集DNA进行-20℃冷冻保存[3-4]。

1.2.2 临床治疗 按照术后非小细胞肺癌患者的EGFR基因检测结果、病理分期，并结合实际情况进行随访，在IA期定期观察，可每两月进行胸部增强CT与胸部正侧位片复査，半年全身检查，IB-IIIA期全部根治术后肺癌患者进行标准含铂两药的化疗，根据体表面积控制化疗计量，化疗周期为每3~4周1次，共进行4次化疗，在每次化疗前做常规心电图、胸部增强CT或胸部正侧位片以及三大常规化验，最后1次化疗前进行全身检查，以此观察患者的病情变化，整个化疗过程结束后，开始定期观察，并每2~3个月进行1次胸部增强CT或胸部正侧位片的复查，每半年做1次全身检查[5-6]。

1.3 相关标准 化疗骨髓抑制度分级标准：通过按照骨髓抑制的不同级别来进行诊治，依据WHO来判断骨髓的抑制程度情况，可以划分0~Ⅳ级，其中0级为：白细胞≥4.0×109/L，血红蛋白≥110 g/L，血小板≥100×109/L；Ⅰ级为：白细胞（3.0~3.9）×109/L，血红蛋白95~100 g/L，血小板（75~99）×109/L；Ⅱ级为：白细胞（2.0~2.9）×109/L，血红蛋白80~94 g/L，血小板（50~74）×109/L，Ⅲ级为：白细胞（1.0~1.9）×109/L，血红蛋白65~79 g/L，血小板（25~49）×109/L，Ⅳ级为：白细胞（0~1.0）×109/L，血红蛋白<65 g/L，血小板<25×109/L[7-9]。无病生存时间即指患者的疾病进展时间，从术后化疗开始第1天至产生病情变化为止的天数，同时按照世界卫生组织（WHO）抗癌药物毒性反应分度进行药物毒性反应的分析和判断。

1.4 统计学处理 使用SPSS 13.0统计学软件进行处理，计量资料（±s）表示，比较采用t检验，对无序资料数据用字2检验，对单项有序计数资料采用秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基因突变与临床特征比较 80例肺癌研究患者中检测出存在EGFR基因突变31例突变率为38.75%；37例鳞癌患者，EGFR基因突变2例，突变率为5.41%；43例腺癌患者，EGFR基因突变29例，突变率为67.44%，突变率比较差异有统计学意义（P<0.05）。男48例，EGFR基因突19例，突变率39.6%；女32例，EGFR基因突变12例，突变率37.5%，男女突变率比较差异无统计学意义（P>0.05）。吸烟肺癌患者38例，不吸烟患者42例，前者EGRF基因突变20例，突变率52.6%，后者EGRF基因突变11例，突变率26.2%，突变率比较差异有统计学意义（P<0.05）。

2.2 患者临床结果分析 本次临床研究的80例患者资料均无失访，随访率达到100%。IB-IIIA期的患者共有48例，EGFR基因突变阳性患者20例，其中包含腺癌14例，鳞癌6例，阴性患者28例，通过比较得出非小细胞肺癌患者的EGFR基因突变和患者病理种类密切相关，且腺癌突变率高于鳞癌。见表1。

表1 两组患者临床特征比较 例（%）

2.3 术后标准含铂两药化疗比较 全部48例患者术后进行标准含铂两药化疗，20例EGFR基因突变阳性患者胃肠道反应：0度10例（50.0%），Ⅰ度6例（30.0%），Ⅱ度4例（20.0%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGFR基因突变阴性患者胃肠道反应：0度15例（53.6%），Ⅰ度8例（28.6%），Ⅱ度5例（17.9%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例。两组患者胃肠道副作用反应比较差异无统计学意义（P>0.05）。20例EGFR基因突变阳性患者化疗骨髓抑制体现：0度13例（65.0%），Ⅰ度7例（35.0%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGFR基因突变阴性患者化疗骨髓抑制体现：0度17例（60.7%），Ⅰ度11例（39.3%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例，两者化疗骨髓抑制表现比较差异无统计学意义（P>0.05）。对于其他诸如过敏、心血管功能、肝肾功能损伤等不良副作用反应都没有出现，能够完成较为完整的当次化疗过程。其中，20例EGFR基因突变阳性患者DFS 6个月为71.2%，12个月为48.5%，18个月为34.2%；28例EGFR基因突变阴性患者DFS 6个月为68.7%，12个月为36.7%，18个月为21.3%，基因突变阳性患者的DFS优于阴性患者，两组患者12~18个月的DFS比较具差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

肺癌是威胁人类健康最难治愈的疾病之一，该疾病的治疗一直困扰着众多医学专家，成为了难以攻克的医学难题，随着医学技术水平的不断进步，人们对肺癌病症也有了更多的了解，为找出治疗肺癌的医学方案提供了保证。对肺癌的治疗方法也有了极大的改善和进步，可分为外科治疗、放射治疗、化学疗法和免疫疗法，其中非小细胞肺癌的治疗难度较大，化疗作用并不明显，因此针对其进行深入研究与探讨具有很大价值[10-12]。为减少非小细胞肺癌患者术后复发的几率，实行辅助性化疗，并依据表皮生长因子（EGF）及其受体（EGFR）在不同的细胞类型的肺癌当中表达的不同特性作用，利用肺癌中表皮生长因子受体（EGFR）突变以及对EGFR酪氨酸激酶抑制性药物（EGFR-TKI），使其发生相应的治疗反应，具有一定治疗作用，引入肺癌化疗的临床治疗当中将非常有益[13-14]。

近年来，为了治疗各种癌症疾病，抗癌药物的研制得到快速发展，由于EGFR是一种蛋白酷氣酸激酶受体，且存在于组织细胞中，自身含有胞外配体结合结构域、一个跨膜结构域、具有酪氨酸激酶活性的一种胞裝结构域，可以与表皮生长因子有效结合，经过化学反应致使其酪氨酸激酶的通路连续被活化，进而使得细胞发生增殖转化，有效阻止细胞过度异常生长、让肿瘤细胞的发生迁移，得到抑制，促使肿瘤细胞调亡，实现抗癌的目的，所以可推测肺癌化疗效果与EGFR突变可能存在密切联系[15-17]。

从本次2013年8月-2014年8月在同一医疗组IA-IIIA期进行根治术后的肺癌患者80例临床研究资料研究结果得出，检测出存在EGFR基因突变31例突变率为38.75%，37例鳞癌患者，EGFR基因突变2例，突变率为5.04%；43例腺癌患者，EGFR基因突变29例，突变率为67.44%，突变率比较差异有统计学意义（P<0.05）。男48例，EGRF基因突19例，突变率39.6%，女32例，EGRF基因突变12例，突变率37.5%，男女患者突变率比较差异无统计学意义（P>0.05）。吸烟肺癌患者38例，不吸烟患者42例，前者EGRF基因突变20例，突变率52.6%，后者EGFR基因突变11例，突变率26.2%，突变率比较差异有统计学意义（P<0.05）。在IB-IIIA期的患者共有48例，EGRF基因突变阳性患者20例，包含腺癌14例，鳞癌6例；基因突变阴性患者28例，得出两组患者临床特征比较差异无统计学意义（P<0.05）。随后对全部48例患者术后进行标准含铂两药的化疗，20例EGFR基因突变阳性患者胃肠道反应：0度10例（50.0%），Ⅰ度6例（30.0%），Ⅱ度4例（20.0%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGRF基因突变阴性患者胃肠道反应：0度15例（53.6%），Ⅰ度8例（28.6%），Ⅱ度5例（17.9%），Ⅲ度0例，Ⅳ度0例，两组患者胃肠道副作用反应比较差异无统计学意义（P>0.05）。20例EGFR基因突变阳性患者化疗骨髓抑制体现：0度13例（65.0%），Ⅰ度7例（35.0%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例；28例EGRF基因突变阴性患者化疗骨髓抑制体现：0度17例（60.7%），Ⅰ度11例（39.3%），Ⅱ度0例，Ⅲ度0例，Ⅳ度0例，两者化疗骨髓抑制表现比较差异无统计学意义（P>0.05）。对于其他诸如过敏、心血管功能、肝肾功能损伤等不良副作用反应都没有出现，能够完成较为完整的当次化疗过程。其中，20例EGRF基因突变患者DFS 6个月为71.2%，12个月为48.5%，18个月为34.2%，两组患者12~18个月比较DFS差异有统计学意义（P<0.05）。非小细胞肺癌患者的EGRF基因突变和患者病理种类密切相关，对比突变率，腺癌突变率高于鳞癌，吸烟突变率较高于不吸烟，从术后肺癌患者EGRF基因突变阳性组与阴性组的比较得出，前者在12~18个月的辅助化疗DFS高于后者，其毒副作用反应不存在统计学差异。

综上所述，通过研究发现，非小细胞肺癌患者的EGFR基因突变和患者病理的种类密切相关，EGFR基因突变阳性组的DFS要优于基因突变阴性组，患者的EGFR突变状态可以使酪氨酸激酶抑制剂十分有益于预测治疗。因此，针对患者的EGFR基因的检测显得尤为重要，对肺癌的化疗疗效有很大帮助。

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