张军艳(湖北省十堰市中医医院检验科 442012)



抗-HCV联合丙型肝炎病毒核酸检测在丙型肝炎患者中的临床价值

张军艳(湖北省十堰市中医医院检验科 442012)

目的 探讨抗-HCV阳性和抗-HCV阴性与丙型肝炎核酸(HCV-RNA)载量关系及其在丙型肝炎检测中的应用价值。方法 回顾性分析2010年9月至2013年10月该院236例丙型肝炎患者，抽取所有患者血清标本，采用化学发光微粒子免疫法检测抗-HCV，实时荧光定量聚合酶链反应法检测HCV-RNA，并对检测结果进行比较。结果 抗-HCV总检出率为83.4%(197/236)，HCV-RNA总检出率为87.1%(207/236)，两者比较差异有统计学意义(P=0.00)，抗-HCV和HCV-RNA联合检测的准确率为98.7%(233/236)。HCR-RNA阳性和阴性患者ALT阳性率比较，差异有统计学意义(P=0.00)。HCR-RNA和ALT相关系数为r=0.86(P=0.00)。结论 联合检测抗-HCV和HCV-RNA，可早期确诊HCV感染患者。

抗-HCV； HCV核酸； 丙氨酸氨基转移酶； 联合检测

丙型肝炎病毒(HCV)以输血和血制品的使用作为主要传播途径，HCV感染后临床表现并不明显，如不及时采取有效治疗，患者极易发展成肝硬化，甚至肝癌[1-2]。因此，如何准确快速诊断HCV患者，对HCV患者治愈率和生活质量有很大影响[3]。选取本院236例丙型肝炎患者，以分析早期发现HCV患者的方法，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析本院2010年9月至2013年10月236例丙型肝炎患者，其中男122例，女114例，年龄15～83岁，平均年龄(45.25±3.48)岁。其中24例患者表现为感冒发烧、体虚、恶心、呕吐、肌肉痛、头昏、头痛、腹痛，而且常有黄疸。按照中华医学会肝病学分会和中华医学会传染病与寄生虫病学分会发布的《丙型肝炎防治指南》诊断标准，明确临床诊断。

1.2 试剂与仪器

1.2.1 仪器 贝克曼DXC800全自动生化分析仪，最大测试速度为每小时1 440测试。测定原理：离子选择性电极(ISE)法、比色法、速率法、糖氧化电极法、免疫透射比浊法、电导电极法、酶免疫法、终点法等。

1.2.2 试剂 丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒，北京利德曼公司生产，产品性能结构及组成试剂组成：*试剂1：L-丙氨酸(600 mmol/L)；乳酸脱氢酶(≥1.2 kU/L)；叠氮钠(0.09%)*试剂2：a-酮戊二酸(90 mmol/L)；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)为1.08 mmol/L；叠氮钠(0.09%)，缩写：ALT，检测方法：IFCC速率法。

1.3 检测方法

1.3.1 抗-HCV的检测方法 贝克曼DXC800全自动生化分析仪检测血清中的抗-HCV，检测试剂为Abbott 公司生产，HCV抗体测定免疫试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法)，产品批号：08013LI01，严格按照说明书上操作规范进行，判断标准为：S/CO 值大于或等于1.000。

1.3.2 HCV核酸的检测方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测(厦门新创科技有限公司制作)。严格按试剂盒中说明书进行操作。标本在进行PCR扩增前要进行反转录。对数据相关性进行分析，采用求对数法同时定量计算HCV-RNA的平均拷贝数。所用试剂检测下限为小于80 Copies/mL。

1.3.3 ALT的检测方法 采用生化方法，用贝克曼DX800全自动生化分析仪结合ALT测定试剂盒进行检测。

1.4 统计学处理 使用SPSS17.0对数据进行统计学处理，计数资料用百分率表示，使用χ2检验。检验水准设定为0.05，P<0.05说明差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 抗-HCV和HCV-RNA检出结果比较 抗-HCV(+)患者197例，检出HCV-RNA171例，检出率为89.5%；抗-HCV(-)患者39例，检出HCV-RNA 36例，检出率为92.3%。抗-HCV总检出率为83.4%(197/236)，HCV-RNA总检出率为87.1%(207/236)，两者比较差异有统计学意义(P=0.00)。抗-HCV和HCV-RNA联合检测的准确率为98.7%(233/236)。

2.2 HCV-RNA和ALT关系 在HCV-RNA阳性标本中，ALT阳性203例(98.0%)，ALT阴性4例(2.0%)。29例HCV-RNA阴性患者中，ALT阳性0例，阴性率为100.0%；HCR-RNA阳性和阴性患者ALT阳性率比较，差异有统计学意义(P=0.00)。HCR-RNA和ALT相关系数为r=0.86 (P=0.00)。

2.3 抗-HCV和ALT关系 在抗-HCV(+)标本中，ALT阳性率为81.7%(161/197)，ALT阴性36例(18.2%)。抗-HCV(-)标本中，ALT阳性26例(26/39，66.6%)。抗-HCV阳性组和阴性组ALT阳性率比较，差异无统计学意义(P=0.07)。

3 讨 论

人群中HCV感染检出率为0.8%～5.2%，如不及时治疗，约40%慢性HCV患者将发展为肝硬化，甚至肝癌[4-5]。为了提高患者治愈率和生活质量，对早期HCV患者应及早诊断与治疗。但早期HCV患者在临床症状及外在表现上并不明显。因此，如何早期诊断HCV患者成为必先解决的问题[6-7]。

抗-HCV是HCV感染或既往感染的指标，不能作为HCV感染期的指标，无法知晓体内HCV病毒活动及复制情况。在HCV感染早期即可检测出血清中存在HCV-RNA，其灵敏度好，可作为HCV感染的可靠指标[8-9]。抗-HCV阳性而HCV-RNA阴性是既往感染的征象，但抗-HCV阴性而HCV-RNA阳性，可能有以下几点原因：(1)HCV感染窗口期。HCV感染早期，病毒复制量大，RNA阳性，但抗体仍未产生[10]；(2)HCV基因异源性高，抗-HCV检测试剂盒不含有检测基因的抗原，或试剂盒本身灵敏度造成[11]；(3)人类免疫缺陷病毒可攻击感染者自身的免疫细胞，导致机体HCV抗体产生延迟或缺乏，出现抗-HCV假阴性[12]。导致HCV-RNA假阴性的原因主要是由于HCV为单链RNA病毒，自然界中广泛存在的RNA酶能降解RNA[13-14]。

本研究结果表明，抗-HCV检出HCV患者阳性率为83.4%，HCV-RNA为87.1%。说明采用单一检测抗-HCV或HCV-RNA进行丙型肝炎诊断时，无法完全确诊患者。而联合抗-HCV和HCV-RNA检测方法，准确率可达98.7%。Pereira等[9]和Calvaruso和Crani[10]的研究结果显示，抗-HCV与HCV-RNA检出HCV患者阳性率分别为90.2%和91.5%，而当结合两种检测方法后检出率可达到99.8%，这与本结论基本相符。说明联合检测可提高丙型肝炎的诊断率，同时也可以了解肝脏损伤的情况，具有十分重要的临床治疗和指导意义[15]。在207例HCV-RNA阳性患者中，ALT阳性患者为203例，占了98.0%，其相关系数为0.86(P<0.01)，说明ALT与HCV 核酸之间有很大相关性[8]。

综上所述，ALT与HCV-RNA间有极高的相关性，采用抗-HCV和HCV-RNA联合检测，能够有效确诊丙型肝炎患者，对早期诊治和提高生活质量有重要意义。

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The clinical value of combined test of anti-HCV and HCV-RNA in patients with hepatitis C

ZHANGJun-yan

(DepartmentofClinicalLaboratory,TraditionalMedicineHospitalofShiyanCity,Shiyan,Hubei442012,China)

Objective To explore the relationship between the positive result of Hepatitis C virus antibody (anti-HCV),negative result of anti-HCV and HCV-RNA loads and its application in detecting patients with HCV.Methods A retrospective analysis was performed 236 patients with HCV from September 2010 to October 2013.The anti-HCV was detected by the method of Chemiluminescence Immunoassay.HCV-RNA was tested by real-time fluorescencequantitative polymerase chain reaction.Results The detection rate of anti-HCV was 83.4%(197/236)，and that of HCV-RNA was 87.1% (207/236),the difference in the two groups was statistical different(P=0.00).The accuracy rate of combined detection of Anti-HCV and HCV-RNA in diagnosis of HCV was 98.7%(233/236).The difference of alanine aminotransferase(ALT) level between the patients with positive result of HCV-RNA and patients with negative result of HCV-RNA was statistical significant (P=0.00)，HCR-RNA and ALT were positively correlated (r=0.86，P<0.05).Conclusion The combined detection of anti-HCV and HCV-RNA is value for early diagnosis for HCV.

hepatitis C virus antibody； hepatitis C virus RNA； alanine aminotransferase; combined detection

张军艳，女，硕士，主管检验师，主要从事医学检验方法学与临床研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.10.024

A

1672-9455(2015)10-1395-02

2014-10-01

2015-01-22)