沈天行，宋建新

（1.云县人们医院检验科，云南 临沧 675800；2.云南省第一人民医院检验科，云南 昆明 650032）

标本放置温度和时间对T淋巴细胞活化标志检测结果的影响

沈天行1，宋建新2△

（1.云县人们医院检验科，云南 临沧 675800；2.云南省第一人民医院检验科，云南 昆明 650032）

目的探讨标本放置温度和时间对流式细胞术检测T淋巴细胞活化标志结果的影响。方法采集健康体检者血液，EDTA－K2－抗凝，室温及4℃保存，在不同时间进行CD3＋T淋巴细胞CD69、CD25、HLA－DR检测。结果EDTA－K2－抗凝血室温保存标本与新鲜标本相比，CD3＋CD69＋、CD3＋CD25＋细胞百分率在12h开始减低，CD3＋CD69＋到16h明显减低（P＜0.05），CD3＋CD25放置到20h时明显减低（P＜0.05），CD3＋HLA－DR＋细胞表达逐渐增高，到20h时明显增高（P＜0.05）；4℃放置的标本CD3＋CD69＋、CD3＋CD25＋到24h时明显减低（P＜0.05），CD3＋HLA－DR＋细胞表达到24h变化差异无统计学意义（P＞0.05）。结论作为T淋巴细胞的活化标志，室温放置标本检测CD3＋CD69＋应在12h内完成，CD3＋CD25＋应在16h内检测，CD3＋HLA－DR＋可在20h内检测，最好放置4℃保存标本。

T淋巴细胞； 活化标志； 温度； 时间

CD3＋CD69＋、CD3＋CD25＋、CD3＋HLA－DA＋T淋巴细胞是一类已活化的免疫细胞，在免疫应答中起着重要的作用［1］。目前应用流式细胞仪检测T淋巴细胞活化水平已广泛应用于许多疾病特别是自身免疫性疾病发病机制的研究及疗效观察［2－3］，其准确性直接影响临床诊断及疗效观察。目前对外周血本放置时间对T细胞亚群检测结果的影响已有报道［4］，而对其活化标志的影响研究鲜见报道。本文对这一影响因素进行分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年4月本院健康体检者10例的标本，其中男5例，女5例，平均年龄34岁。

1.2 仪器于试剂 Beckman Coulter公司FC500型流式细胞仪，荧光标准微球Flow－Check、CD45－FITC、CD3－PE－Cy5、CD69－PE、CD25－PE、HLA－DR－PE及同型对照均购自Immunotech公司。……