PEI与脂质体介导基因转染的比较研究
2015-03-21曹慧玲滕凤猛汪小蓉顾万建张春兵
国际检验医学杂志 2015年3期
曹慧玲,滕凤猛,汪小蓉,顾万建,张春兵
(江苏省中医院/南京中医药大学附属医院检验科,江苏 南京 210029)
PEI与脂质体介导基因转染的比较研究
曹慧玲,滕凤猛,汪小蓉,顾万建,张春兵
(江苏省中医院/南京中医药大学附属医院检验科,江苏 南京 210029)
目的比较新型转染试剂阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)与脂质体2000介导的血管内皮细胞生长因子VEGF165基因转染人胚肾细胞293T的转染效率,为基因转染提供新的方法。方法分别采用脂质体和不同N/P比值的PEI将合成的含有绿色荧光蛋白(GFP)和VEGF165的质粒转入293T细胞。转染24h后,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性;转染48h后在荧光显微镜下观察比较两种转染方法的转染效率,并通过ELISA方法检测细胞上清液中VEGF165浓度,比较两种方法的转染效果。结果当N/P=9时,PEI转染的细胞活性与脂质体转染相近,对细胞的毒性较小;此时,PEI转染效率与脂质体也相似,均可达到约70%;同样,转染后细胞上清中VEGF165浓度较未转染组提高(P<0.05),但两种方法转染组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PEI作为一种新型的转染试剂,与脂质体相比,在一定比例范围内,具有转染效率高,对细胞毒性小且价格低廉的优势,有望成为基因转染的有效载体。
聚乙烯亚胺; 脂质体; 基因转染; 转染效率
基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送至细胞内。目前,应用最广泛的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物,它们容易通过细胞膜,在通过细胞屏障方面跟病毒有很相似的特征。阳离子脂质体在体外基因转染中有很高的效率,应用也最为广泛。……
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