伍彬宁，蔡壬辛，曾建明，鄂顺梅，李有强，叶大柠，鲁 洋，陈 茶

（广州中医药大学第二临床医学院检验医学部，广东广州 510006）

大肠埃希菌sdi A基因缺失株的建立*

伍彬宁，蔡壬辛#，曾建明，鄂顺梅，李有强，叶大柠，鲁 洋，陈 茶△

（广州中医药大学第二临床医学院检验医学部，广东广州 510006）

目的为研究HSL信号分子对大肠埃希氏菌的影响而建立大肠埃希菌sdi A基因缺失株。方法通过Red重组系统敲除大肠杆菌BW25113和SM10λpir的sdiA基因，PCR测序鉴定；不同时间点检测A600值，绘制细菌生长曲线；荧光定量PCR检测csg D、csg B基因水平。结果PCR测序结果经DNAman软件比对分析，与预想结果一致；与野生株相比，sdiA基因突变对细菌生长曲线无明显影响。结论成功建立BW25113、SM10λpir的sdi A基因缺失株，为后续研究铜绿假单胞菌信号分子HSL对大肠埃希菌的影响奠定了基础。

大肠埃希菌； 基因敲除； Red重组系统； sdi A基因； HSL信号分子； 接合反应

铜绿假单胞菌（PA）是临床常见的条件致病菌，近年来，PA耐药问题日益严重。目前认为基因水平转移是介导细菌耐药的重要途径，其方式有：转化、转导和接合。接合介导的耐药基因水平转移是PA多重耐药的重要原因，但PA接合的调控机制尚不清楚。有研究证明Ti质粒在根癌土壤杆菌结合转移过程中受到一种由细菌释放，称为接合因子的信号分子的调控。接合因子实质上是一种酰基高丝氨酸内酯（HSL）分子，能提高Ti质粒转移的频率［1-2］。目前，有研究证实PA等革兰阴性菌广泛存在“群体感应”系统。在“群体感应”系统中，HSL分子作为自诱导剂来监测群体密度［3］。……