小鼠骨髓间充质干细胞SCA-1+/CD45+/CD31+亚群自身抗凋亡基因研究
2015-03-21贺继刚李洪荣桂龙升李永武
贺继刚,李洪荣,桂龙升,李永武,严 丹,王 平
小鼠骨髓间充质干细胞SCA-1+/CD45+/CD31+亚群自身抗凋亡基因研究
贺继刚,李洪荣,桂龙升,李永武,严 丹,王 平
目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)亚群SCA-1+/CD45+/CD31+抗凋亡的分子基础。方法以小鼠心脏干细胞表面分化抗原检测BMSCs后以CD45、CD31为标准分选得到4个亚群。体外将4个亚群采用无血清低氧(5%)培养,流式细胞术检测各组的凋亡率。分别将细胞注入心梗48 h小鼠体内于注射后48 h完成心功能测定。可见SCA-1+/CD45+/CD31+组抗凋亡能力最强,心脏彩超提示心功能恢复亦优于其他各组。采用基因芯片完成Agilent小鼠全基因4×44K芯片从分子水平对SCA-1+/CD45+/CD31+亚群抗凋亡能力进行探讨。结果将SCA-1+/CD45+/CD31+与其他组有关于凋亡基因进行聚类分析及Network结果共同比较可见两者无交集,以上述差异基因4倍表达为标准,因而以Network结果为主。可见NFkB1、RB1、E2F1为感兴趣基因。结论小鼠BMSCs为一多克隆的细胞群体。SCA-1+/CD45+/CD31+抗凋亡及改善心功能方面优于其他亚群;其分子机制在于NFkB1、RB1、E2F1基因表达较其他亚组多见。
小鼠骨髓间充质干细胞;亚群;基因
心脏干/祖细胞(cardiac stem/progenitor cells,CSCs/CPCs)在心肌中含量很少,约占1%,有多个亚群,目前报道为6个亚群[1],包括侧群细胞、干细胞抗原-1(stem cell antigen-1,SCA-1)阳性祖细胞、胰岛素样受体-1(islet 1,ISL-1)阳性祖细胞、特异表面抗原-1(stage-specific embryonic antigen-1,SSEA-1)阳性祖细胞、c-KIT阳性祖细胞和心肌球来源的祖细胞。本实验拟通过采用CSCs 6个亚群分化抗原为标志,对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)进行分选。结果以CD45及CD31为标准可以筛选得到4组小鼠BMSCs亚群SCA-1+/45+/31-、SCA-1+/45-/31+、SCA-1+/45-/31-、SCA-1+/45+/31+。将各亚群采用无血清、低氧(5%)培养,流式细胞术检测各组凋亡率。……
