李星军，王哲敏，郭友成，许正敏(.上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院，上海 050；.湖北省襄阳职业技术学院附属医院，湖北襄阳 440)



·论 著·

血清VEGF、IL-6、Cys-C水平与2型糖尿病肾病的关系研究

李星军1，王哲敏1，郭友成2，许正敏2
(1.上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院，上海 202150；2.湖北省襄阳职业技术学院附属医院，湖北襄阳 441021)

目的 研究血清血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-6(IL-6)、胱抑素C(Cys-C)水平与2型糖尿病肾病的关系。方法 选择2型糖尿病患者100例，分为单纯糖尿病(DM)组33例和糖尿病肾病67例。其中糖尿病肾病又分为早期糖尿病肾病(EDN)组35例，临床糖尿病肾病(DN)组32例。另外选择体检健康者30例作为健康对照(NC)组。分别测定各组研究对象血清VEGF、IL-6和Cys-C水平，并进行相互比较。结果 单纯糖尿病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组血清VEGF、IL-6和Cys-C水平依次上升(P<0.05)，VEGF与尿微量清蛋白(mALB)、IL-6和Cys-C呈明显正相关(P<0.05)，血清IL-6水平与VEGF水平呈明显正相关(P<0.05)。mALB与Cys-C水平呈明显正相关(P<0.01)。结论 糖尿病肾病患者血清促炎因子IL-6、VEGF水平升高，与血清Cys-C水平、尿蛋白排泄率呈明显正相关。血清VEGF、IL-6、Cys-C的测定可作为判断2型糖尿病肾损害程度及预后的指标。

糖尿病； 糖尿病肾病； 血管内皮生长因子； 白细胞介素-6； 胱抑素C

糖尿病肾病(DN)是糖尿病最常见、最严重的慢性并发症，随着糖尿病发病率的逐年提高，DN已成为导致慢性肾衰竭的主要病因之一。糖尿病肾病(DN)是在糖尿病病程中出现的以蛋白尿、血尿、高血压、水肿、肾功能不全等肾脏病变为特征的总称[1-2]。其主要病理变化表现为肾小球、肾小管肥大，肾小球、肾小管基膜增厚、肾小球系膜区细胞外基质堆积以及肾小球硬化。本研究检测了糖尿病及糖尿病肾病患者尿微量清蛋白(mALB)、血清胱抑素C(Cys-C)、全血糖化血红蛋白(HbA1c)及血清中促炎因子血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素6(IL-6)的水平，旨在探讨促炎因子与糖尿病肾病之间的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014年1～6月湖北省襄阳职业技术学院附属医院体检中心筛选的健康人30例，其中男16例，女14例，为健康对照组(NC组)。选择同期该院肾内科确诊的糖尿病患者100例，糖尿病的诊断符合1999年WHO糖尿病诊断和分类专家委员会制定的标准，糖尿病肾病的诊断参照Mogenson DN标准。根据24 h mALB水平将糖尿病患者分为3个组：单纯糖尿病组(DM组，mALB<30 mg/24 h)33例,男16例、女17例，年龄(54.62±6.78)岁,病程3～18年、平均(13.3±2.4)年；早期糖尿病肾病组(EDN组，mALB 30～300 mg/24 h)35例，男19例、女16例，年龄(50.12±9.21)岁，病程4～22年、平均(14.2±3.2)年；临床糖尿病肾病组(DN组，mALB>300 mg/24h)32例，男15例、女17例，年龄(57.61±11.23)岁,病程3～24年、平均(15.1±2.9)年。排除妊娠、肿瘤、外伤、急慢性感染、心肝及免疫性疾病。以上各组研究对象的年龄、性别比例、病程等差异无统计学意义(P>0.05)，存在可比性，所有患者均符合临床诊断标准。

1.2 检测方法 所有对象均空腹12 h后清晨肘静脉采血4 mL，分离血清分装冻存管密闭，贮存于-30 ℃冰箱中保存待测。于采血前1 d收集24 h尿液混匀后,记录尿总量并取5 mL尿液检查mALB。Cys-C由全自动生化分析仪检测；HbA1c采用高效液相色谱法检测；IL-6、VEGF采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量测定，试剂盒为德国IBL公司产品。

2 结 果

2.1 各组生化指标、IL-6、VEGF的比较 各组生化指标、IL-6、VEGF水平比较见表1。各组糖尿病患者HbA1c、IL-6、VEGF水平与健康对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各组糖尿病患者间HbA1c水平差异无统计学意义(P>0.05)。早期糖尿病肾病组mALB、Cys-C水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)，但糖尿病各组间mALB、Cys-C、IL-6、VEGF水平差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 各组HbA1c、mALB、Cys-C、IL-6、VEGF水平的比较±s)

注:与健康对照组比较，aP<0.05；与单纯糖尿病组比较，bP<0.05；与早期糖尿病肾病组比较，cP<0.05。

2.2 糖尿病各组Cys-C、IL-6、VEGF与生化指标HbA1c、mALB的相关分析 尿mALB水平与血清Cys-C、IL-6、VEGF水平呈显著正相关；Cys-C水平与IL-6、VEGF水平显著正相关；IL-6为自变量，以VEGF为因变量，Pearson相关分析表明，血清IL-6水平与VEGF水平显著正相关(r=0.934,P<0.01)，见表2。

表2 糖尿病各组Cys-C、IL-6、VEGF与生化指标HbA1c、mALB相关性分析

注：*在α=0.01水平(双侧)上显著相关，差异有统计学意义。

3 讨 论

糖尿病肾病是糖尿病常见的微血管病变并发症，其发病机制尚不清楚。IL-6作为一种多功能的细胞因子，可通过旁分泌或自分泌形式与肾小球系膜细胞上的IL-6受体结合，刺激肾小球系膜的增殖和细胞外基质的产生[3]；还可以作用于血管内皮细胞，诱导其表达黏附因子黏附炎症细胞和促凝血因子促进血管内血栓的形成，增加毛细血管的通透性，从而促进糖尿病肾病的发生、发展[4]。国外Cahoon等[5]体外试验也表明，肿瘤坏死因子(TNF)-α与糖化蛋白终末产物(AGEs)能协同刺激血管内皮细胞分泌IL-6，而葡萄糖对内皮细胞无刺激作用。本研究的相关性分析显示，各组IL-6的水平与mALB、Cys-C、VEGF水平呈明显正相关(P<0.01)。糖尿病肾病患者肾组织表达高水平的IL-6可能参与了糖尿病肾病发生、发展的病理生理过程，IL-6水平可作为临床观察糖尿病肾病病情的一项参考指标[6]。

Cys-C是肾小球滤过率的内源性标志物之一。Cys-C不受炎性反应、性别、肌肉以及年龄变化的影响，其浓度主要由肾小球滤过率决定，所以Cys-C是一个非常稳定的反映肾小球滤过率的指标，且具有较高的敏感性和特异性，是近年来发现的能够理想反映肾小球滤过率的内源性标志物。当肾小球有轻微受损时，Cys-C的浓度会迅速升高，并且随着病情加重而逐渐增高[7]。本研究中发现，Cys-C与mALB呈很好的相关性(r=0.912,P<0.01)，尿mALB的测定需要留取24 h尿量，标本留取较麻烦且需要防腐和记录总尿量，检验前标本留取质量很难控制好，而Cys-C的检测具有敏感性、特异性和稳定性好的特点，是一种能较好地反映肾小球滤过率的标志物，不失为一个替代尿mALB检测的指标。

VEGF是血管内皮细胞特异的促有丝分裂素，VEGF是当前最强有力的血管生成的强烈刺激因子。栾健等[8]的动物模型研究表明糖尿病肾病肾小球VEGF表达增强，与糖尿病肾脏新生血管生成有关。正常肾组织中主要由肾小球脏层足细胞产生VEGF，因此，VEGF在微血管病变中的作用备受关注。VEGF又称血管调理素，是作用于内皮细胞的特异性因子，具有增强血管通透性，增加微血管特别是毛细血管后静脉和小静脉的渗透度，诱导内皮细胞增殖，促进新生血管形成，增加黏附分子和细胞外基质产生的作用。本研究中亦发现单纯糖尿病组VEGF水平高于健康对照组,VEGF在糖尿病继发肾病的患者血清中的表达明显升高(P<0.01)，并且糖尿病微血管病变组间比较显示，VEGF水平在单纯糖尿病组、早期糖尿病组、临床糖尿病肾病组随着肾病的进展逐渐升高，证明VEGF与糖尿病肾病相关，与文献[9]报道一致,提示VEGF的高表达与尿清蛋白排泄率呈正相关。表明VEGF水平能影响糖尿病患者肾脏功能，参与糖尿病肾病的发生、发展，血清VEGF是糖尿病肾病的重要相关因子。相关分析显示：VEGF与IL-6、mALB、Cys-C呈明显正相关，提示VEGF在糖尿病肾病患者血清中的表达及相互影响参与疾病的进程。

总之，糖尿病肾病的进展是各种机制相互作用而形成的,本研究中血清IL-6和VEGF水平在糖尿病肾病患者中明显升高且有明显的相关性。Cys-C、IL-6和VEGF三者在微血管损害中可能存在协同作用，这与高浓度的VEGF可促进肾小球毛细血管内皮细胞分裂，同时促进内皮细胞释放炎性反应因子有关，说明炎性反应因子间的相互作用在糖尿病肾病的发生、发展过程中起重要作用。临床上可参考血清IL-6和VEGF来判断糖尿病肾脏的损伤程度。血清Cys-C与mALB有明显的相关性，Cys-C的检测具有敏感性、特异性和稳定性好的特点，是一种较好的反映肾小球滤过率的标志物。

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[6]黄敬泽,王健,黄培,等.Ⅱ型糖尿病患者血尿白介素-6变化的意义[J].中国免疫学杂志,2002,18(10)：729-731.

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[8]栾健，王艳.血管内皮生长因子及其受体对糖尿病肾病大鼠微血管病变的作用[J].中国中西医结合肾病杂志,2010,11(12)：1062-1065.

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Relationship between serum levels of VEGF,IL-6 and Cys-C with type 2 diabetic nephropathy

LIXing-jun1,WANGZhe-min1,GUOYou-cheng2,XUZheng-min2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,ChongmingBranchHospital,AffiliatedXinhuaHospital,SchoolofMedicine,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai202150,China;2.AffiliatedHospitalofXiangyangVocationalandTechnicalCollege,XiangyangHubei441021,China)

Objective To investigate the relationship between serum inflammatory factors VEGF,IL-6,Cys-C levels with type 2 diabetic nephropathy (T2DN).Methods Total 100 patients with type 2 diabetes mellitus(T2DM) were selected and divided into the early stage of diabetic nephropathy(EDN) group(35 cases) and the clinical diabetic nephropathy (DN) group(32 cases).30 healthy individuals of physical examination were selected as the normal control 30 group (NC).The serum levels of VEGF,IL-6 and Cys-C were detected and the results were compared.Results The serum levels of VEGF,IL-6 and Cys-C in the simple diabetic group,EDN group and DN group were increased in turn(P<0.05).VEGF with urinary albumin,IL-6 and Cys-C showed a obviously positive correlation (P<0.05).The serum IL-6 level was positively correlated with the serum VEGF level (P<0.05).mALB was positively correlated with Cys-C level(P<0.01).Conclusion In the patients with diabetic nephropathy,serum pro-inflammatory cytokines levels of IL-6 and VEGF are increased,serum serum Cys-C level has a significantly positive correlation with urinary protein excretion rate.Serum VEGF,IL-6 and Cys-C can serve as the indicators for judging the renal injury degree and prognosis in the patients with T2D.

diabetes mellitus; diabetic nephropathy; vascular endothelial growth factor(VEGF)； interleukin-6； cystatin C

李星军，男，硕士，副主任技师，主要从事临床实验诊断学研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.21.029

A

1672-9455(2015)21-3207-02

2015-03-17

2015-08-17)