阮 征 ，刘开武，吴建英，华 娟，夏 瑜，王莲芳，胡小明，刘 杰，，黄海军

（1.武汉市农科院畜牧兽医科学研究所，湖北 武汉430208 ；2.武汉市重大动物疫病防控中心，湖北 武汉 430023；3.华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，湖北 武汉 430070）

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是猪群中流行的重要传染病之一，可引起母猪的繁殖障碍(包括流产、早产、死胎、木乃伊胎等)、仔猪存活率急剧下降和育成猪呼吸道疾病。病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），该病毒为单股正链RNA病毒，属于动脉炎病毒属。PRRSV有严格的宿主和细胞嗜性，猪肺泡巨噬细胞（Porcine alveolar macrophage，PAM）、Marc145 细胞和MA-104 细胞是其重要的靶细胞，PRRSV感染细胞需要首先与细胞受体结合，通过内吞作用进人细胞内，在胞内完成病毒的脱壳与基因组释放[1-3]。

目前发现的PRRSV感染相关受体有硫酸乙酰肝素（Heparin Sulphate，HS）、唾液酸粘附素（Sialoadhesin，Sn）、波形蛋白（Vimentin）、CD163（Cluster of Differentiation 163）分子、CD151（Cluster of Differentiation 151）分子和NMMHCIIA（非肌肉肌球蛋白重链ⅡA）分子[4]。有关研究结果表明，CD151 能与PRRSV3′端非转录区（3′URT）发生结合，进而导致PRRSV与细胞发生相互作用进入细胞内产生感染。通过转染使PRRSV非敏感细胞BHK-21 表达CD151会使该细胞允许PRRSV的感染，增殖程度高达100倍[5]。CD163 为一种SRCR 超家族的Hapten Hemoglobin 清道夫受体，是130 000 的细胞表面糖蛋白，在PRRSV感染巨噬细胞过程中介导病毒在细胞质中的脱衣壳和病毒基因组的释放[6-8]。

在实际生产中，PRRSV的体外增殖主要在Marc145细胞中进行。本研究采用脂质体介导方法，通过G418 筛选稳定转染Marc145 细胞，并利用单个细胞克隆技术，获得了稳定超表达CD151蛋白和（或）CD163 蛋白的Marc145 细胞株，并进一步探讨其在疫苗生产中的应用，为最终获得PRRSV高效增殖的新途径提供依据。……