李明梅,裘兰兰,王梅娟(.盐城卫生职业技术学院，江苏盐城 4005；.江苏省盐城市药品检验所 400)



·论 著·

近红外光谱法快速检测肾上腺色腙片品质的应用研究*

李明梅1,裘兰兰1,王梅娟2
(1.盐城卫生职业技术学院，江苏盐城 224005；2.江苏省盐城市药品检验所 224002)

目的 建立肾上腺色腙片近红外光谱技术的品牌判别模型，以打击假冒伪劣品。方法 在Opus Setup Conformity Test模块中，建模参数：波段：9 000～7 500、6 900～5 600、5 000～4 250/cm，一致性指数(CI)值为7，平滑点为13，预处理方法为二阶导数+矢量归一 。通过以上参数，数据前处理后建立近红外一致性模型。结果 江苏亚邦爱普森药业有限公司的调入12张验证肾上腺色腙片光谱均在CI值为7的限度范围内,而2批假冒的药品光谱均不在模型设定的 CI值范围内。结论 该方法建立的品牌模型，能快速鉴别该品牌药品的真伪，并可应用于日常监督中的药品初筛，以提高抽样命中率。

近红外光谱法； 定性模型； 肾上腺色腙片

肾上腺色腙片是一种良好的止血药物，该药能够有效提高毛细血管对病理损伤的免疫抵抗能力，适合应用于毛细血管损伤所引起的出血、血小板减少性紫癜等疾病。肾上腺色腙可作用于因为血管通透性增加、毛细血管受损所引起的出血症状，具有良好的疗效，以其在出血方面的治疗好且毒性低而得以广泛应用。因此对其质量控制显得尤为重要。在《卫生部药品标准》中指出化学药品、制剂的检验标准，通过分光光度法对肾上腺色腙的浓度进行检测，因为肾上腺色腙片的片型比较小，去糖衣的操作较为繁琐，容易造成不可避免的损失，而且浪费时间。传统的检测方法操作周期长，过程复杂，不能作为快速检测的方法。近红外光谱指的是波长长度介于可见区与中红外区之间的一种电磁波，波长范围为780～2 525 nm。近红外光谱获得的信息通常是分子内部具有按集团震动的合频、倍频吸收，具有非常丰富的化学信息量。因为绝大部分有机物本身含有该类基团，所以近红外光谱分析技术具有更加广泛的应用前景。相比以往传统的方法，近红外光谱分析法具有快速、样品预处理简单、可多组分同时测定、环保、易于实现在线检测等优点[1-3]，已经被广泛应用于食品、农业、医药等多个领域中[4-8]。 本法能快速有效地控制肾上腺色腙片的质量。

1 材料与方法

1.1 仪器 仪器型号：Matrix-F型傅立叶变换近红外光谱仪，仪器号分别为BRUKER Matrix-SFDA 10059563(盐城)、BRUKER Matrix-SFDA 10059561(南通)、BRUKER Matrix-SFDA 10029302(泰州)。INGAAS检测器、手拿光纤探头(德国BRUKER 公司)。Agilent 高效液相色谱仪 (Opus 5.0光谱工作站,美国Agilent公司)。

1.2 样品 江苏亚邦爱普森药业有限公司肾上腺色腙片一共12批，编号为1～12，批号分别为130101、130201、130215、130318、130319、130317、130311、130412、130413、130515、131213、131216。假冒的产品共有2个批次，编号13及14，批号为130321、120917。

1.3 方法

1.3.1 样品的准备与制作工作 取本品6片(每批取6片)，用细砂纸打磨去糖衣至表面平滑，即得。

1.3.2 近红外光谱的采集与处理 取上述1.3.1样品制备的研究样品进行光谱测定，测试条件：分辨率：8/cm；样品累积扫描次数：32 Scans；背景累积扫描次数：32 Scans；光谱范围：12 000～4 000/cm。光谱测定：每批次测定6张光谱，分别在3台仪器上测定，共18张原始光谱。测试方式为：直接接触测，环境条件为：温度25 ℃，湿度45%。三波段(9 000～7 500、6 900～5 600、5 000～4 250/cm)一阶导数化点平滑[3]。

1.3.3 样品的鉴别 以11、13、14三个批号编号的样品，根据国际标准的肾上腺色腙片鉴别项的方法[9]。(1)取本品5 mg，加醋酸2 mL溶解后，溶液应显橙红色，加锌粉少许，颜色即消失。(2)取本品约1 mg，加水10 mL与三氯化铁试剂数滴，溶液显血红色。(3)取本品约10 mg，加苯胺1 mL，小心加热，煮沸时发生的气体能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色。按上述3种鉴别方法检查，其中编号为11的样品鉴别呈正反，编号为13、14的样品的鉴别均不呈正反。

1.3.4 建立一致性检验模型进行筛查 取江苏亚邦爱普森药业有限公司的12批肾上腺色腙片(编号1～12)的近红外光谱图作参考图谱[3]，在Opus的一致性检验模型设置模块，Opus Setup Conformity Test模块中，建模参数为波段：9 000～7 500、6 900～5 600、5 000～4 250/cm，一致性指数(CI)值为7，平滑点为13，预处理方法为二阶导数+矢量归一 ，构建近红外一致性检验的模型。同时，取江苏亚邦爱谱森药业有限公司的样品正品，11、12两种编号，假冒的编号13、14样品，对模型进行验证。

1.3.5 模型耐用性验证 取在不同型号的3台近红外仪器上，在条件不同的情况下，验证光谱为泰州近红外光谱。在不同温度、不同湿度、不同操作人员等条件下，对光谱进行测定，在CI限值之下进行计算。

2 结 果

2.1 正品、假冒品的近红外光扫描谱图的区别 样品1～12的近红外光谱波数范围12 000～4 000/cm，运用OPUS软件，对正品及假冒品进行对比分析，两者间的曲线区别非常大，假冒品在8 010～6 050/cm。正品波数范围在9 000～4 200/cm。把两者的近红外原始图谱进行一阶求导+矢量归一。

2.2 一致性检验模型的筛查结果 从图1上可看出，正品标样的值在CI值为7的限值内，假冒样品则不在CI值的限值范围内。

图1 一致性检验模型的检验结果

2.3 模型耐用性验证 模型耐用性验证结果，说明所建的近红外一致性模型的耐用性很好，人为因素对于模型不会产生过大的影响。见图2。

图2 耐用性试验CI示意图

3 讨 论

近红外光谱技术是现代科技的一种高效、快速的分析技术，是综合运用了化学计量学、光谱技术及计算机技术等多种学科的一项最新研究成果。由20世纪80年代开始，随着化学计量学、计算机技术的不断进步，近红外光谱已经在不同领域中广泛应用。同时，该项技术已经逐渐获得了社会的普遍肯定、官方的认可。近红外光谱分析技术最近几年在药品的快速鉴别上得以广泛应用，例如石油化工、高分子、食品工业、制药工业等领域，其具有操作方便、不需要预处理、无污染、分析成本较低、非破坏性、分析效率较高及分析速度快等多种优点，具体内容如下：(1)分析速度快，光谱的测量过程通常可在1～2 min内完成，利用建立的定标模型能够快速检测获得样品的化学成分、性质。(2)分辨率较高，利用1张光谱的测量与已经建立的多个不同定标模型，能够对样品的各种成分、性质进行具体测定。(3)非破坏性分析技术，近红外光谱检测期间不会对样品造成损伤，从外观至内部均不会对样品造成任何影响，鉴于这一特点此项技术在活体分析与药物临床应用领域均得到了广泛的应用。(4)在样品分析期间，不会对样品本身产生消耗，不需要应用任何化学试剂，明显减少了分析的成本费用，同时对环境不会产生任何污染，是一种非常绿色环保的分析技术。(5)样品通常不需要预处理，操作非常简便，因为近红外光具有很强的穿透能力、散射效应，结合样品的物态、透光能力的强弱，可适当选择漫反射及透射测谱方式，利用相应的载样器件能够直接检测胶状类、半固体、固体及液体等不同物态的样品。(6)测试重现性良好，因为近红外光谱检测的稳定性较好，检测结果几乎不会受到人为因素的影响，相比参考或标准的方法，近红外光谱通常可以体现更好的重现性。(7)有利于在线分析的实现，因为近红外光谱在光纤中具有非常良好的传输特性，利用光纤能够让仪器远离采样现场，更适合应用于生产过程、危险、恶劣环境条件下的样品分析，实现远程监控、在线分析[9]。本研究结果证明，此药品构建的近红外一致性模型可靠、具有专一性， 本研究建立的定性模型只适合江苏亚邦爱普森药业有限公司生产的肾上腺色腙片。此法易收集样品的正品，可快速构建一致性近红外模型，可对市场上出现的假冒药品进行监控。同时对生产企业的处方工艺具有监督作用。假若让此模型覆盖其他厂家的产品，需要定期、定量收集各地厂家的样品进行规模式的建模。

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Study on application of rapid detection for quality of Carbazochrome Tablets by near infrared spectroscopy*

LIMing-mei1,QIULan-lan1,WANGMei-juan2
(1.YanchengHealthVocationalandTechnicalCollege,Yancheng,Jiangsu224005,China;2.YanchengMunicipalInstituteforDrugControl,Yancheng,Jiangsu224002,China)

Objective To establish the brand discrimination model of near infrared technology for Carbazochrome Tablets in order to attack the counterfeit products.Methods In the module of Opus Setup Conformity Test,the model-building parameters: the waveband was at the 9 000-7 500,6 900-5 600 and 5 000-4 250/cm,the CI value was 7,the smooth point was 13,the pre-processing method was second derivative plus vector normalization.The near infrared consistency model was established after the data pretreatment through the above parameters.Results 12 pieces of spectrum for verifying Carbazochrome Tablets from Jiangsu Yabang Apusen Pharmaceutical Co.,Ltd.were all within the limitation range of CI value 7,while the spectrum of 2 batches of counterfeit product exceeded the CI limit.Conclusion The brand model established by this method can rapidly identify the authenticity of this brand of drug,and can be used for the preliminary screening of drugs in the daily surveillance work in order to increase the sampling hit rate.

near infrared spectroscopy; qualitative model; Carbazochrome Tablets

江苏省盐城市医学科技发展计划项目(YK2014059)。

李明梅，女，副教授，本科，主要从事化学分析和药物分析的教学及研究工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.21.014

A

1672-9455(2015)21-3167-02

2015-01-25

2015-05-15)