赖平安，李勐伟，翟秀娟，田海燕

（1.北京出入境检验检疫局，北京 朝阳100026 ；2.西南大学动物科技学院，重庆 北碚400716；3.北京市畜牧总站，北京 朝阳100107）

随着城市宠物犬、猫饲养数量不断增加，宠物与人类关系日益密切，宠物与人类共患病的关系应高度重视。宠物饲养量逐年攀升，促进宠物跨地区、跨国交易，在这过程中增加了传染病传播风险，其中因宠物携带的人兽共患传染病容易感染宠物主人，直接造成宠物源性人兽共患病，有的甚至在人群中感染传播，严重威胁公共卫生安全。同时宠物主人罹患的某些传染病可感染宠物，再通过宠物间的直接或间接传播进一步感染人群。为初步了解北京城区家养宠物犬、猫弓形体病、利什曼病、新孢子虫病及布鲁菌病的流行情况，给进一步防控宠物源性人兽共患病奠定基础，开展了此项工作。

1 材料与方法

1.1 动物弓形虫抗体酶联免疫检测试剂盒（生产批号：464）；犬新孢子虫抗体酶联免疫检测试剂盒（生产批号：513）；利什曼抗体酶联免疫检测试剂盒（生产批号：434）；均为法国ID-VET 公司产品，购于深圳市青珊瑚科技有限公司。利什曼抗体检测试剂盒仅用于犬血清检测。其余试剂盒可用于犬、猫血清。

1.2 光滑型、犬型布鲁菌虎红平板凝集抗原及阴、阳性血清，购自中国疾病预防控制中心传染病预防控制所。

1.3 被检血清 于2013 年4-6 月，从北京市区12家大中型动物医院收集的186 份家养宠物犬以及48 份家养宠物猫的血清样品，所有犬、猫不是从交易市场购买获得，且确保其至少上两代均为家养。常规采血、分离血清，-20 ℃冰箱保存备用。

1.4 主要仪器 不同规格移液器及配套吸头，Thermo Labsystems Multiskan Ascent 全自动酶标仪、Thermo Labsystems Wellwash AC 洗板机。

1.5 方法

1.5.1 弓形虫、犬新孢子虫、利什曼ELISA 抗体检测方法 分别按照法国ID-VET 公司产品说明书进行操作并判定结果。主要试验步骤：血清经稀释后，加入酶标板孔内，反应一定时间，洗板；加入抗体-酶复合物，反应一定时间，洗板；加底物，反应一定时间；加终止液，酶标仪测OD 值；判定结果。

1.5.2 布鲁菌病检测-虎红平板凝集试验

每份血清同时进行光滑型和犬型布鲁菌抗原检测。具体方法为：在洁净的玻璃板上间隔一定距离分别滴加25 μL 光滑型、犬型布鲁菌虎红平板凝集抗原，分别加入等量血清，混匀，3 min。内观察结果。同时设阴、阳性血清对照。凡出现肉眼可见的凝集颗粒为阳性，无凝集颗粒，呈均匀粉红色者为阴性。

2 结果

对2013 年4-6 月间来自北京市12 家大中型宠物医院的186 份家养犬以及48 份家猫的血清样品进行ELISA 检测和虎红平板凝集试验。结果见表1、表2。

表1 犬血清检测结果

表2 猫血清检测结果

在186 份犬血清中，弓形体抗体阳性6 份，阳性率为3.2%（6/186），可疑样品2 份，其余为阴性；新孢子虫抗体阳性1 份，阳性率为0.5%；利什曼抗体阳性样品2 份，阳性率为1.1%，可疑样品4份，其余为阴性；布病抗体均为阴性。

在48 份猫血清中，弓形虫抗体阳性2 份，阳性率为4.2%（2/48）；新孢子虫抗体全部为阴性；布病抗体全部为阴性。

3 讨论

弓形体是存在于宠物中的重要人兽共患病病原之一，呈世界性流行，对人类，尤其是孕妇及儿童危害极大，可造成孕妇早产、流产、胎儿发育畸形等[1]。犬、猫多为隐性感染。本次调查针对北京市12 家大中型宠物医院收集的城区饲养犬、猫血清共234 份，犬、猫血清弓形体抗体阳性率分别是3.2%和4.2%。本次样品全部取自长期家养宠物，其上两代均为家养而非从交易市场购买，弓形体感染率较低。一些家庭既养犬又养猫，一旦感染，不同动物间相互感染传播，危害人体健康。本次流行病学调研过程中，在犬、猫共同饲养的家庭出现下述几种情况：犬感染弓形体，而猫未感染；猫感染弓形体而犬未感染；犬、猫同时感染。这可能与犬、猫宠物混养接触的时间长短有关，依据弓形体病流行病学特征，犬、猫共同饲养的家庭，一旦出现感染个体将会互相传染，进而危害人体健康。因此饲养犬、猫或混养的家庭，应定期用适当、可靠的方法进行检测，并根据结果采取针对性预防控制措施。

新孢子虫病（Neosporasis）是由犬新孢子虫（Neospora canium）寄生于犬、牛、马、羊等多种宿主动物细胞内而引起的一种原虫病，犬即可作为该虫的终末宿主,也可以作为中间宿主，但犬科动物是惟一的终末宿主。该虫主要引起孕畜流产、死胎以及新生胎儿运动障碍和神经系统疾病[2]。新孢子虫病是世界性奶牛流产的主要病因, 奶牛感染犬新孢子虫病与奶牛场饲养看护犬有密切的关系。本次试验调查结果，186 只犬中只有1 只犬新孢子虫抗体阳性，阳性率为0.5%，应引起足够重视。由于本次调查样品数量较少，为更好了解北京城区家养犬的新孢子虫感染状况，需进一步扩大样本量，开展更深入细致的研究工作。

家犬是利什曼原虫主要的保虫宿主，且犬在人类感染利什曼病的过程中具有非常重要的作用。本次试验从186 只犬中检测出2 只阳性，其中1 只犬利什曼抗体和弓形虫抗体均为阳性。据报道利什曼病原与恰加斯、疟疾、血吸虫、弓形虫病原具有相似成分，抗体检测时存在假阳性，可用其他技术手段进行鉴别。利什曼病是由杜氏利什曼原虫寄生于内脏而引起的人畜共患慢性寄生虫病，自然感染是通过白蛉传播此病，由病犬间接传染而使人致病。多数犬感染后处于无明显症状的带虫状态，少数犬出现被毛粗糙无光泽，甚至脱落，皮肤病变多见于头部，尤其是耳、鼻及眼周围。在我国北部，保虫宿主为犬和犬属动物，20 世纪40 年代，北京地区存在散发病例，但随后的较长时间未见进一步研究报道。随着宠物犬饲养数量日益增多，犬与人类关系日益密切，目前都市人的感染大多来自病犬，因此在重大国际活动中对入境犬实行检疫措施，有利于保护人群健康。如2000 年悉尼奥运会和2008 年北京奥运会，对出入境导盲犬和宠物犬均实施利什曼病检疫措施，禁止疫区犬入境，是防止人类感染的重要举措。

多年来，我国以羊种菌感染人畜为主，由于羊种布鲁菌病得到一定控制，牛种菌和猪种菌感染呈相对上升趋势。通过数年监测结果确认，除牛、羊、猪为人间布鲁菌病传染源外，犬和鹿也是不可忽视的传染源。犬布鲁菌病大多表现为隐性感染，以不发热，体表淋巴结肿大为特征，一旦病犬出现临床症状，多表现为多发性关节炎、腱鞘炎、并导致跛行，偶尔发生角膜炎、眼前房出血。虎红平板凝集反应（RBPT）是检测人畜布鲁菌病的经典方法之一，具有操作简单、判定结果快速简便的特点，本试验通过虎红平板凝集试验检测犬、猫可能感染的其他动物布鲁菌和犬特有的犬种布鲁菌，结果为阴性。表明此次抽检的犬、猫未感染布鲁菌病。

[1] Jeffrey D，Daniel G.Toxoplasmosis in pregnancy[J].The American Journal of Medicine，2005，118（3），212-216.

[2] Perez E，Eonzalezo，Dolz G，et al.Firsz report of bovine neosporosisindairy cattle in costa Rica[J].Veterinary Reeord，1998，142（19）：520-521.

[3] 项夫，吴清民，王真，等.北京地区犬布鲁氏菌病血清学调查及分析[J].检验检疫学刊，2009，19（6）：34-38.