李春凤

（黑龙江省穆棱市畜牧中心,黑龙江穆棱 157500）

生育期与品种对紫花苜蓿营养价值的影响

李春凤

（黑龙江省穆棱市畜牧中心,黑龙江穆棱 157500）

1 研究目的与意义

近年来，随着我国经济发展，人们生活质量的提高，对乳制品的需求量也在增高，特别对产品质量的重视程度远远超过了过去几十年，人们追求更高的产品质量，选择更优的产品，这就需要更多优质饲料满足动物生产需要。苜蓿由于分布广，品质高，成为了奶牛养殖中的首选优质粗饲料。而我国苜蓿品种多，各地的苜蓿质量差异大，产量低等因素对国产苜蓿在奶牛生产中造成了众多不便。因而，很多大型牧场选择进口苜蓿，虽然成本高，但饲料回报高，乳品质好。黑龙江省是我国的奶牛养殖大省，对优质粗饲料的需求量存在着很大的缺口，本文在前人研究的基础上，选择了三种黑龙江省种植面积最大的本地紫花苜蓿品种，通过对其不同生育期营养价值评定，为我国科学的制定苜蓿干草营养价值的评定体系和我省苜蓿种植与适时收割提供理论依据。

2 材料与方法

2.1 试验材料

试验材料采用三种生育期（即现蕾期，初花期，盛花期）的三个品种（肇东苜蓿，龙牧801，龙牧803）紫花苜蓿，于2012年刈割自哈尔滨市香坊农场苜蓿地。自然风干，取少部分粉碎至20目用于实验室分析。

2.2 测定指标

依据CNCPS体系就碳水化合物（CHO）和蛋白质（Protein）组分的划分，本试验需要测定的指标有：干物质（DM）；粗蛋白（CP）；粗脂肪（EE）；粗灰分（Ash）；中性洗涤纤维（NDF）；酸性洗涤纤维（ADF）。

2.3 试验方法

根据《饲料分析及饲料质量检测技术》（杨胜，1993）中的分析方法测定各指标中干物质、粗脂肪、粗灰分。

2.3.1 粗蛋白质测定方法

（1）仪器设备：FOSS全自动凯氏定氮分析仪，分析天平

（2）溶液的制备：浓硫酸：化学纯。1%硼酸吸收液：将l0g硼酸溶于1000ml蒸馏水；400 g/L氢氧化钠溶液：400g氢氧化钠溶解于1000ml蒸馏水中；混合指示剂：0.lg溴甲酚绿，0.lg甲基红分别溶于100 ml 95 %乙醇，然后将10ml溴甲酚绿溶液与7 ml甲基红溶液加入到1000ml的1 %硼酸溶液中。

（3）测定步骤：

①消化：准确称取0.2g试样，无损失地转移到消解管的底部，加入1勺催化剂（0.4g硫酸铜、6g硫酸钠或硫酸钾），再加入10ml浓硫酸摇匀，将消解管放在通风橱的消煮炉上以290℃炭化15min，然后将温度调至420 ℃进行消解180 min，将消煮完的试验样品从消煮炉上取下，并冷却至室温，待测。

②蒸馏：在定氮仪的控制面板上输入所称饲料样品的质量数据，放下安全门，定氮仪对消煮液便开始蒸馏并进行自动滴定，滴定完毕后，定氮仪直接输出CP含量，记录数据。

2.3.2 中性洗涤纤维测定方法

（1）仪器设备：ANKOM纤维分析仪，滤袋，封口机，干燥器，分析天平，电热鼓风干燥箱

（2）测定步骤：

① 中性洗涤剂的制备：准确称取18.68g乙二胺四乙酸二钠和6.8g硼酸钠，一同放入1000ml的烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠和l0ml乙二醇乙醚；称取4.56g无水磷酸氢二钠置于另一烧杯中，加少量蒸馏水，微微加热，溶解后倾入第一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml。

② 滤袋恒重（W1），称取0.5g（±0.001g）饲料样品（W2）直接装入滤袋中，同时称取二个空白袋，用以测定空白袋的校正系数（C1）。

③ 在距袋口0.5cm处用封口机封口，设法使样品在袋中均匀分布。

④ 将样品袋平放在样品盘上，除了最顶层的样品盘不放样品，其余8层样品盘每层放3个滤袋。各滤袋间成120°角摆放。

⑤ 将样品盘放入洗涤容器中，然后注入1900～2000ml中性洗涤剂，拧紧容器盖。按下振荡和加热的按钮，计时90min。

⑥ 当90分钟以后（定时器发出嘟嘟声），关闭加热和振荡开关，先打开废液阀，将废液排尽，关闭排液阀，打开容器盖，加入大约1900～2000ml热的蒸馏水（90～100℃），盖好盖，按下振荡按钮，持续振荡滤袋3～5min。重复冲洗3次。

⑦ 将样品架从容器中取出，用吸水纸吸收滤袋中的水分。再将样品置于250ml烧杯中，加入丙酮没过样品，浸泡3min，取出，吸去丙酮，在通风橱晾干。将风干后的样品于105℃的烘箱中烘至少3h，取出后放入干燥器中，30min后称重（W3）。

（3）结果计算：先在300℃下炭化20min左右,然后温度升至550±20℃下灼烧3h,取出,在空气中冷却约1min,移入干燥器冷却30min,称重。再同样灼烧1h,冷却,称重,直至两次称重之差小于0.001g为恒重。

⑷结果计算:

式中：W1—滤袋质量，g

W2一样品质量，g

W3—提取过程后滤袋和样品的质量，g

C1一空白滤袋校正系数（提取后烘干的空白袋质量/空白袋质量）

每份样品测定三个平行样作为重复，用三者的算术平均值为结果。

2.3.3 酸性洗涤纤维的测定方法

（1）仪器设备：同上NDF。

（2）测定步骤：

① 酸性洗涤剂的配制：称取20克CTAB溶于1000ml 1.0M的硫酸中，搅拌溶解，必要时过滤。慢慢加到己装有500m1蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000m1容量瓶中定容，标定。

② 其余操作步骤同NDF。（3）结果计算：

每个试样至少取两个平行样测定，以其算术平均值为结果。粗灰分含量≥5%时，允许相对偏差为1%；粗灰分含量〈5%时，允许相对偏差为5%。

2.3.5 粗脂肪测定方法

（1）仪器设备：

实验室用样品粉碎机或研钵，分样筛，分析天平，电热式恒温水浴锅，恒温烘箱

（2）溶液的制备：乙醚（GB 12591-90），分析纯

（3）测定步骤：

① 称样（W）：称取2g左右试样，准确至0.0001g，用滤纸包好，并以脱脂棉线系牢，再用铅笔于滤纸包上标记待放入的铝盒号，然后将滤纸包放入相应铝盒中。

② 试样+滤纸包+铝盒烘干至恒重（W1）：将以上铝盒开盖置于105±2℃烘箱中烘6h，取出，盖好铝盒盖，在干燥器中冷却30min，称重。再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.001g为恒重。

③ 乙醚浸提：将恒重的滤纸包放入索氏提取器的提脂腔中（注意滤纸包不能超过虹吸管上端），加入乙醚，乙醚加量以全部浸泡滤纸包为宜，装好装置，在60℃～75℃的水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为约10次/h，共回流约50～70次。

④ 浸提后，试样+滤纸包+铝盒再烘干至恒重（W2）：取出滤纸包，放回相应铝盒中，在室温通风处使乙醚挥发掉，然后开盖置于105±2℃烘箱中烘6h，取出，盖好铝盒盖，在干燥器中冷却30min，称重。再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.001g为恒重。

（5）结果计算：

每个试样至少取两个平行样测定，以其算术平均值为结果。粗脂肪含量≥10%时，允许相对偏差为3%；粗脂肪含量〈10%时，允许相对偏差为5%。

式中：W1—滤袋质量，g

W2一样品质量，g

W3—提取过程后滤袋和样品的质量，g

C1一空白滤袋校正系数（提取后烘干的空白滤袋质量/空白滤袋质量）

重复性同NDF。

2.3.4 粗灰分的测定方法

（1）仪器设备：实验室用样品粉碎机或研钵分样筛，分析天平，感量0.0001g，高温电炉，可控温度在550±20℃，瓷坩埚，干燥器，用变色硅胶或氯化钙作干燥剂

（2）测定步骤：

①空坩埚灼烧至恒重（W0）：将干净坩埚放入高温电炉，取出，在空气中冷却约1min，然后移入干燥器冷却30min，称重。再同样灼烧，冷却，称重，直至两次称重之差小于0.0005g为恒重。

② 称样（W）：在已恒重的空坩埚中称入2g左右试样，准确至0.0001g。

③ 坩埚+试样灼烧至恒重（W1）：将称好试样的坩埚放入高温电炉中，先在300℃下炭化20min左右，然后温度升至550±20℃下灼烧3h，取出，在空气中冷却约1min，移入干燥器冷却30min，

3 结果与分析

现蕾期CP含量最高（21.81%），盛花期最低（16.80%），初花期居中。现蕾期及初花期三种紫花苜蓿中Ash含量分别比盛花期增高0.56%和0.57%（P〈0.01）。NDF和ADF的含量均随着生育期的延长而显著升高（P〈0.05）。

在所有的紫花苜蓿样本中，肇东、龙牧803的CP含量显著高于龙牧801（P〈0.01）。肇东Ash含量极显著高于其他两种紫花苜蓿（P〈0.01）。龙牧803的ADF含量显著高于肇东，龙牧801的ADF含量居中。

生育期与品种对紫花苜蓿中CP的含量有显著影响，并且存在明显的互作效应。且Ash含量受生育期、品种及互作的影响也极显著（P〈0.01）。

综上，随着生育期的延长，CP 的含量极显著降低（P〈0.01），NDF，ADF的含量显著升高（P〈0.05）。生育期及品种的互作效应对CP、Ash的含量有极显著影响（P〈0.01）。

4 结论

生育期与品种对紫花苜蓿中CP、Ash和ADF影响显著，并存在明显的互作效应。随着生育期的延长，紫花苜蓿CP含量极显著降低，NDF和ADF的含量极显著升高。龙牧803的CP和ADF含量较高。

李春凤（1973—），女，高级畜牧师，本科学历，研究方向为畜牧技术推广。