姜黄素通过血红素加氧酶-1信号通路促进脂肪源干细胞增殖和旁分泌研究
2015-03-06刘剑锋朱平马守原陈海旭王曙霞李珊
刘剑锋 朱平 马守原 陈海旭 王曙霞 李珊
·基础研究·
姜黄素通过血红素加氧酶-1信号通路促进脂肪源干细胞增殖和旁分泌研究
刘剑锋 朱平 马守原 陈海旭 王曙霞 李珊
目的 探讨姜黄素对脂肪源干细胞(ADSCs)增殖和旁分泌的作用及其机制。方法酶法分离、扩增SD大鼠腹股沟的ADSCs,流式细胞仪检测细胞表型;MTT法检测不同浓度姜黄素对细胞生长曲线的影响,筛选最佳姜黄素处理浓度;姜黄素预处理ADSCs 24 h,加用血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂SnPP阻断HO-1活性;qPCR和Western blot检测HO-1信号在姜黄素处理ADSCs过程中的变化;MTT法检测HO-1活性对姜黄素促进细胞增殖的影响;PCR和Elisa法分别检测姜黄素对ADSCs分泌VEGF和HGF的影响。结果 第3代ADSCs的CD29、CD90阳性,CD31、CD34、CD45阴性。姜黄素促进ADSCs增殖的作用呈时间依赖性,最佳处理浓度为10 μmol/L。加用SnPP后,促增殖作用显著降低(P=0.001)。姜黄素能显著促进ADSCs分泌VEGF和HGF(分别为P=0.001和P=0.007),SnPP能明显抑制姜黄素的促分泌作用[Cur-ADSCs比Cur-ADSCs+SnPP:VEGF为(712.2±43.1)ng/L比(442.3±33.2)ng/L,P=0.001;HGF为(58.3±3.7)ng/L比(33.7±3.1)ng/L,P=0.001]。在此过程中,HO-1表达的变化方向和姜黄素促进ADSCs增殖和旁分泌的方向一致。结论HO-1介导了姜黄素促进ADSCs增殖和旁分泌的作用。姜黄素是一种有前景的增强干细胞治疗疗效的候选药物。
姜黄素; 血红素加氧酶-1; 脂肪干细胞; 细胞增殖; 旁分泌
干细胞是心脏再生研究的热点之一。脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)具有来源丰富、取材方便、易培养扩增、潜在的向心肌自发分化等优点,并且与骨髓间充质干细胞具有相似的性质,日益受到青睐,广泛应用于基础与临床研究。然而,ADSCs的数量及旁分泌功能严重影响其功能发挥。……
