任文清，夏文明，张再刚，王凤龙，孙惠青*

(1.四川省凉山州烟草公司会东分公司，四川会东 615200；2.中国农业科学院烟草研究所，山东青岛 266101)



四川烟草炭疽病的鉴定及防治技术研究

任文清1，夏文明1，张再刚1，王凤龙2，孙惠青2*

(1.四川省凉山州烟草公司会东分公司，四川会东 615200；2.中国农业科学院烟草研究所，山东青岛 266101)

[目的]鉴定四川烟草上的一种叶斑病害，并探讨其防治技术。[方法]采用“柯赫氏法则”，对2012年在四川会东育苗温室红花大金元上发现的一种叶斑病害进行了鉴定，并研究了几种药剂对该病菌的防治效果。[结果]依据病害症状和病原形态特征确认为烟草炭疽病菌(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)；75%百菌清600倍稀释液、80%代森锌800倍稀释液、80%代森锰锌800倍稀释液、50%退菌特800倍稀释液、50%福美双500倍稀释液对炭疽病有较好的防治效果。[结论]为烟草炭疽病的防治提供了参考。

烟草炭疽病；鉴定；防治

烟草炭疽病由半知菌六包盘孢(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)引起[1]。烟草整个生育期均可发生，苗期发生普遍严重，发病初期叶片上发生水渍状暗绿色小点，俗称“雨斑”，严重时幼苗叶片病斑密布，成片烂掉，且大田期仍可继续为害，严重影响烟草种植的经济效益。除烟草外，炭疽病菌还侵染白菜、番茄、辣椒、茄子、瓜类、豆类等。烟草炭疽病菌在25～30 ℃的最适温度下，潜育期仅48 h，水滴是病菌分生孢子传播再侵染的重要条件，因此苗床低湿或大水漫灌、苗期多雨时病害发生重[2]。

烟草炭疽病在我国各烟区普遍发生，其中云南、湖南、江西等省发生较重，炭疽病菌的形态特征及防治的研究已有报道，但目前尚未见四川省关于炭疽病菌的研究报道[3-5]。2012年，在四川省会东县育苗温室中发现疑似烟草炭疽病的症状，叶片上病斑密度大，发病轻的苗床烟苗长势衰弱，影响移栽。为确定引起该病害的病原菌，笔者从病害样本中分离得到纯培养物，采用“柯赫氏法则”测定其致病性，根据其形态学特征鉴定其病原，并对防治药剂进行了筛选，以期为有效控制该病害提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料5种供试药剂为50%退菌特(天津市兴果农药厂)、80%代森锌(利民化工股份有限公司)、80%代森锰锌(河北双吉化工有限公司)、50%福美双(河北万特生物化学有限公司)、75%百菌清(海利尔药业集团)。

1.2 方法

1.2.1病害调查及症状观察。 2012年3～4月，在四川会东县育苗温室中烤烟红花大金元上发生炭疽病，采集具典型特征的烟草叶片，观察并记录病害症状。

1.2.2病原菌的分离培养。发病叶片采自会东县育苗温室中烤烟红花大金元，采用组织分离培养法。用手术刀切取病健交界处组织，用75%乙醇消毒10～15 s，无菌水洗涤3次，接到燕麦培养基上，25 ℃黑暗培养，定期观察培养特征，并转接在PDA培养基上，观察培养特征。

1.2.3病原菌致病性检测。待菌丝长满PDA平皿且观察到子实体时，用无菌水将其菌丝洗下，制备孢子悬液。接种前先用无菌注射器给叶片(烤烟红花大金元)制造伤口，再将菌液涂抹在叶片上，26 ℃保湿培养，以不接菌为对照。记录病症病情，对接种发病的叶片再分离和鉴定。

1.2.4病原菌的形态鉴定。选取温室自然发病和接种发病的具小黑点的病斑，挑取子实体制水玻片；将自然发病和经致病性测定后分离获得菌株接种到PDA培养基上培养，观察菌落形态，挑取菌丝制水玻片。显微镜下观察菌丝形态、子实体形态及分生孢子形态特征。

1.2.5药剂防治试验。试验设5个药剂处理，即50%退菌特稀释800倍、80%代森锌稀释800倍、80%代森锰锌稀释800倍、50%福美双稀释500倍和75%百菌清稀释600倍。选取发病苗床，每药剂处理设4次重复，每重复小区面积15 m2，以喷施等量清水为空白对照，小区随机排列。将药剂充分溶解于适量水中，进行叶面均匀喷雾，间隔7 d，喷施2次，期间浇水避免叶面喷洒，采用苗床润湿法。末次药后7 d调查病情指数，每小区采用5点取样法，每点固定调查5～10株，记录调查总叶数及各级病叶数，严重度分级应符合GB/T23222的规定。应用DPS软件计算各药剂处理防治效果，采用邓肯新复极差法检验差异显著性。

防治效果(%)(施药前无基数)=(空白对照区病指-处理区病指)/空白对照区病指×100

2 结果与分析

2.1 病原菌的致病性在温室中，用孢子悬液接种于健康红花大金元叶片上，接种3 d开始观察到直径约1 mm暗绿色水渍状小点，5 d后扩展为直径2～5 mm的圆斑。中央灰白色，稍凹陷，边缘明显，呈赤褐色，稍隆起。10 d左右观察到小黑点，即病菌的分生孢子盘，表现与温室自然病株相同的症状，发病率100%(图1)。对接种发病叶片进行再分离培养，获得与接种病原菌形态一致的菌株。

2.2 病原菌的形态病原菌在燕麦培养基及PDA培养基上25 ℃黑暗培养7 d，菌落直径为35 mm，边缘白色，中间灰白色，有黑色小点，即分生孢子盘，其上着生刚毛黑色，直或稍弯曲，基部稍膨大，向顶端渐尖，大小55～400 μm，具1～3个隔膜。菌丝灰白色，无分隔。分生孢子长圆筒形，两端钝圆，单胞，无色，含有2个油球，大小10～80 μm。(图2)。根据病害症状并结合病原菌形态特征分析结果，可以明确该病害的病原菌为烟草炭疽病(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)。

2.3 不同药剂对烟草炭疽病的防治效果由表1可知，末次药后7 d，清水对照的病情指数为45.25，与清水对照相比，4种试验药剂的病情指数显著降低，对烟草炭疽病的防效分别为63.73%、71.95%、68.58%、66.76%和64.05%，能有效控制苗床炭疽病的发展。

3 讨论

烟草炭疽病于1922年由巴西首次报道，世界各国均有发生。该病菌主要随病残体在土壤及粪肥中越冬，亦能以分生孢子沾附于种子表面或以菌丝在种子内部越冬，成为苗床期的主要初侵染源。以分生孢子随雨水冲溅传播，水滴是再次侵染的重要条件，分生孢子在叶面具水膜的情况下萌发侵染[6]。大田排水不良，亦可导致成株发病，影响烟叶产量和质量。

表1 不同药剂处理对烟草炭疽病的防治效果

注：同列数据后不同大、小写字母分别表示处理间在0.01、0.05水平差异显著。

烟草炭疽病在温室中易于辨认，大田期易与气候性斑点病混淆，均在叶片上产生褐色小斑点。炭疽病斑圆形或近圆形；初期暗绿色水渍状，后期潮湿可产生黑色小粒点(分生孢子盘)，以此区分于气候斑。

苗床期是烟草炭疽病的易发期，低湿、隐蔽及大水漫灌利于病害扩展，且病苗在移栽后遇雨水也易造成持续为害。因此，该病的防治关键期是苗床期。合理定苗，及时通风控制苗床湿度，以减少病原菌侵染机会。发病初期及时喷药保护，可选用75%百菌清600倍稀释液、80%代森锌800倍稀释液、80%代森锰锌800倍稀释液、50%退菌特800倍稀释液、50%福美双500倍稀释液和58%甲霜灵锰锌500倍稀释液交替使用。每隔7～10 d喷洒一次，连续2～3次[7]，能有效控制病害发生，减轻为害。

[1] 朱贤朝，王彦亭，王智发.中国烟草病害[M].北京：中国农业出版社，2001:5-9.

[2] 欧高才.烟草苗期炭疽病发生规律及防治研究[J].湖南农业科学，1997(4):41-42.

[3] 张黎明.烟草炭疽病的发生及其防治研究进展[J].江西农业学报，2011,23(8):90-92.

[4] 李东升，张一扬.烟草炭疽病的形态特征和致病性研究[J].湖南农业科学，2009(5):98,100.

[5] 杨泮川.云南烟草炭疽病形态生理研究[J].云南农业大学学报，1992,7(4):199-205.

[6] SHEN S H，GOODWIN P，HSIANG T.Hemibiotrophic infection and identity of the fungus，Colletorichumdestructivum，causing anthracnose of tobacco[J].Mycol Res，2001,105(11):1340-1347.

[7] 朱友勇，王云月，窦友萍，等.甲霜灵锰锌对烟草炭疽病的毒力及防治研究[J].烟草科技，1993(1):44-45.

Identification and Control of Tobacco Anthracnose in Sichuan

REN Wen-qing1，XIA Wen-ming1, ZHANG Zai-gang1，SUN Hui-qing2*et al

(1. Huidong Branch Company of Liangshan Tobacco Company, Huidong, Sichuan 615200; 2. Tobacco Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Qingdao, Shandong 266101)

[Objective] The aim was to identify a leaf spot disease occurred in seedbed on ‘Honghuadajinyuan’ in Sichuan Province in 2012 and explore its control technology. [Method] A leaf spot disease occurred in seedbed on ‘Honghuadajinyuan’ in Sichuan Province in 2012 was identified by Koch’s Rule, and control effects of several regents on it were studied. [Result] The pathogen was identified asColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca according to symptom on tobacco leaf and pathogen shape. The fungicides trial in greenhouse showed that the five fungicides like 75%Chlorothalonil 600 times, 80% Zineb 800 times, 80% Mancozeb 800 times, 50% Tuzet 800 times and 50% Thiram 500 times could control this disease. [Conclusion] The results provide reference for control of tobacco anthracnose.

Tobacco anthracnose; Identification; Control

国家烟草专卖局项目(110200902065)。

任文清(1966-)，男，四川阆中人，助理农艺师，从事烟草栽培研究。*通讯作者，副研究员，硕士，从事烟草植保研究。

2014-12-15

S 435.72

A

0517-6611(2015)04-128-03