商丽丽，孙秋，白杨

白城市食品药品检验所，吉林白城 137000

桑寄生为桑寄生科植物桑寄生Taxi11us chinensis(DC.)Danse的干燥带叶茎枝。冬季至次春采割，除去粗茎，切段，干燥，或蒸后干燥[1]。桑寄生入药始载于《神农本草经》，名“桑上寄生”，列入上品。《名医别录》云：“一名茑，生弘农川谷桑树上，三月三日采茎叶，阴干。”《新修本草》载：“此多生槲、榉、柳、水杨、枫等树上，子黄，大如小枣子。惟虢州有桑上者，子汁甚粘，核大似小豆；叶无阴阳，如细柳叶而厚；晚茎粗短。江南人相承用为续断，殊不相关。且寄生实九月始熟而黄。”《蜀本草》云：“按诸树多有寄生，茎叶并相似。”又云：“叶如橘而厚软，茎如槐而肥脆，今处处有。方家惟须桑上者，然非自采即难以别，可断茎而视之，以色深黄者为验。《图经本草》叶似龙胆而厚阔，茎短似鸡脚，作树形。三月、四月花，黄赤色，六月、七月结子黄绿色，如小豆，以汁稠粘者良也。”综上所述，古代所用的桑寄生，系来源于桑寄生科不同属的数种植物，除现作桑寄生入药的钝果寄生属、梨果寄生属外，尚包括槲寄生属植物。

历史上，槲寄生和桑寄生用名较为混乱，且由于二者功效相似及用药习惯的沿袭，临床上二者一直是混用的。从《名医别录》到《本草纲目》的一些本草著作，关于桑上寄生一项大都指槲寄生，直至近代。《植物学大辞典》1918年将Lorantheceae译为槲寄生，于是“槲寄生”一词在药学界广为应用了。到1977年版《中华人民共和国药典》已将槲寄生与桑寄生分别列为两种中药，它们分属桑寄生科的桑寄生属和槲寄生属[2]。现质量标准[1]中不含含量测定项槲皮素，为了控制桑寄生的质量，更好的区别桑寄生与槲寄生，特研究设立了高效液相色谱法(HPLC)测定桑寄生中槲皮素的含量[3]，此方法操作很简单，数据比较稳定，结果很准确。

1 材料与仪器

1.1 材料

图1 HPLC色谱图

中药材桑寄生批号：20151012、20151013、20151014、20151032、21051033、20151034、20151035、20151036、20151047、20151048；槲寄生阴性对照药材（中国药品生物制品检定所）批号：121038-201014；桑寄生阳性对照药材（中国药品生物制品检定所）批号：121075-200402对照品：槲皮素（中国药品生物制品检定所）批号：100081-200406；含量测定所用的甲醇为青岛试剂厂生产的色谱纯，其他试剂均为分析纯。

1.2 使用的仪器

Agi1ent高效液相色谱仪；检测器为ΜV-2450型紫外-可见分光；工作站为Sepμ 3000色谱。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agi1ent SB-C18 色谱柱（4.6×250 mm,5μm）；柱温30℃。流速：1.0 mL/min、流动相：甲醇：0.5%磷酸溶液(47:53)；检测波长：360 nm。理论板数按槲皮素峰计算不得低于2500[4]。

2.2 对照品溶液的配置

精密称取对照品槲皮素10 mg，置100 mL量瓶中，适量加80%甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取10 mL，至50 mL量瓶中，加80%甲醇稀释至刻度，制成每1 mL含20 μg的槲皮素对照品溶液。

2.3 供试品溶液的配置

取10批桑寄生样品粉末（过4号筛）各约2 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（23-2）50 mL，称定重量，加热回流2 h，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液即得[6]。

2.4 检测波长的确定

紫外-可见分光光度法，采用的仪器为北京普析TI-1901，以槲皮素对照品溶液的溶剂甲醇为空白对照，扫描200～400的紫外光区，测的槲皮素的最大吸收为260 nm，即为检测波长。

2.5 阴性对照溶液制备

取槲寄生对照药材粉末约1 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（23-2）50 mL，称定重量，加热回流2 h，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液即得阴性对照溶液。

2.6 阳性对照溶液的制备

取桑寄生对照药材粉末约1 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（23-2）50 mL，称定重量，加热回流2 h，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液即得阳性对照溶液。

2.7 测定法

分别精密吸取对照品溶液10μL、阴性对照溶液10 μL、阳性对照溶液10 μL和10批供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。见图1。

2.8 线性关系考察

实验对浓度为20 μg/mL的槲皮素对照品溶液进行线性考察。 精密吸取对照品溶液 2 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL 注入高效液相色谱仪（HPLC）中，按照上述条件测定吸收峰面积，计算进样量，以峰面积积分值横坐标，进样量为纵坐标（μg），根据面积归一化法绘制出标准曲线，得到槲皮素回归方程Y=3147.214x+268.159,r=0.9996，实验采用的对照品浓度呈现良好的线性关系。

随机抽取中药材桑寄生供试品溶液（批号：20151036），精密程定 0.5 g、1.0 g、1.5 g、2.0 g、2.5 g、2.6 g 依据供试品制备方法制备溶液，精密吸取对照品溶液及上述供试品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪（HPLC）中，按照上述条件测定吸收峰面积，计算进样量，以峰面积积分值横坐标，进样量为纵坐标（μg），根据面积归一化法绘制出标准曲线，得到槲皮素回归方程Y=3514.214x+204.197，r=0.9991，实验采用的供试品浓度同样呈现良好的线性关系。

2.9 药物稳定性的试验

精密吸取同一份供试液，依次在0 h，3 h，6 h，12 h和24 h进行测定，共考察24 h。统计峰面积平均为3245.41，RSD为1.0%,说明槲皮素至少在24 h内相对稳定。

2.10 精密度试验

精密吸取同一份供试品溶液10μL，连续重复进样9次，测定吸收峰面积，结果吸收峰面积的平均值为3 262.04，RSD 为 1.0%（n=9）。

2.11 系统重复性试验

取对同一批量的样品按以上叙述含量测定方法连续进行9次平行试验测定，计算其含量，结果供试品中槲皮素的平均含量为1.61mg/g,相对标准偏差为为0.7%(n=9)。

2.12 方法回收率试验

随机抽取已经知道含量的中药材桑寄生供试品（批号：20151014），精密称取 8份，每份为 2 g，分别精密注入含槲皮素0.1012 mg/mL的对照品溶液1.0 mL,按上述试验方法进行测定，计算其回收率，结果见表1。

表1 桑寄生中槲皮素的加样回收试验结果

2.13 样品测定结果

按照前述方法配置供试品溶液与对照品溶液，分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪，测定计算其含量，样品测定的结果见表2。

3 讨论

①为加强对中药材在流通领域中的监督管理,我省对易混淆中药材品种进行了重点监督抽验,从监督抽验情况看,中药材在部分经营单位和医疗使用单位仍有混用现象,其中以桑寄生与槲寄生的混用现象为多。桑寄生和槲寄生历史上就有混用的情况。桑寄生是华南、江南、西南地区药材流通的主流产品。槲寄生是东北、华北、西北地区的主流品种。虽然桑寄生和槲寄生的药理作用相近，但有效成作用机制分均不同。曾有人提议，将桑寄生、槲寄生合并用，这是没有充足理论依据的[8-10]。

②该实验针对桑寄生和槲寄生成分的不同，对桑寄生的含量进行测定，是对桑寄生的质量标准进一步提高，原标准无含量测定，现选择增加槲皮素的含量测定，可以在质量标准对桑寄生的来源质量进行控制，从而达到对产品的质量进行更好的监控，减少经营单位和医疗使用单位的混用现象。

[1]桑寄生[S].中华人民共和国药典一部，2015:299.

[2]桑寄生[S].中华人民共和国药典，1997.

[3]张协君，朱开晰，赵明惠，等.不同寄主来源的桑寄生药材槲皮苷与槲皮素含量分析 [J].时珍国医国药，2011（7）：1604.

[4]地锦草 [S].中华人民共和国药典一部，2015：127.

[5]周风雨.桑寄生和槲寄生不宜混用 [J].中国中医药信息杂志，2009，3(3)：109.

[6]苏本伟，张协君，朱开晰，等.桑寄生中槲皮素的提取工艺[J].中国医院药学杂志，2014，34(19):1638-1641.

[7]紫外-可见分光光度法[S].中华人民共和国药典四部，2015：38.

[8]傅茂东，刘群，韩莹.谈中药材桑寄生与槲寄生的混用现象与建议[J].山东医药工业,2003,22(2)：42.

[9]肖玉燕，翁金月，樊建霜.槲寄生古今论 [J].海峡药学，2008，20(2)：45-47.

[10]吴云燕.桑寄生与槲寄生的鉴别[J].实用中医药杂志，2007,12(23)：806

[11]李永华，陈栋，朱开昕，等.对桑寄生使用混乱的分析[J].广西中医学院学报,2007，10(2):60-71.

[12]孙艳秋.槲寄生的研究进展[J].中草药,2000(6):471-474.

[13]董政起，朱静，金光株.HPLC指纹图谱鉴别桑寄生和槲寄生[J].吉林中医药，2007，27（2）：56-57.