陈会玲， 闫 斌， 覃 祝， 吴和珍，2，3， 杨艳芳，2，3*

（1.湖北中医药大学药学院，湖北武汉430065；2.湖北省中药资源与中药化学重点实验室，湖北武汉430061；3.老年病中药新产品湖北省协同创新中心，湖北武汉430065）

地蜂子化学成分的研究

陈会玲1， 闫 斌1， 覃 祝1， 吴和珍1，2，3， 杨艳芳1，2，3*

（1.湖北中医药大学药学院，湖北武汉430065；2.湖北省中药资源与中药化学重点实验室，湖北武汉430061；3.老年病中药新产品湖北省协同创新中心，湖北武汉430065）

目的 研究地蜂子Potentilla freyniana Bornm的化学成分。方法 采用硅胶和Toyopearl柱层析法对地蜂子乙酸乙酯提取部位进行分离纯化，再通过理化性质和波谱数据对所得化合物进行结构鉴定。结果 从中分离得到8个化合物，分别鉴定为phloridzosid（1）、4′-0-乙基-儿茶素（2）、3-甲基鞣花酸-4-0-β-D-木榶苷（3）、clethric acid-28-0-β-D-glucopyranosyl ester（4）、niga-ichigoside F2（5）、儿茶素（6）、β-胡萝卜苷（7）、β-谷甾醇（8）。结论 化合物1和2为首次从委陵菜属植物中分离得到，化合物3、4、6为首次从该植物中分离得到。

地蜂子；化学成分；分离鉴定

地蜂子为蔷薇科委陵菜属植物三叶委陵菜Potentilla freyniana Bornm.及其变种中华三叶委陵菜Potentilla freyniana Bornm.var.sinica Migo的干燥根茎，因外形酷似蜜蜂，故有此名［1］。该植物在全国大部分地区均有分布，主产于湖北、安徽、江西、江苏等地，资源较为丰富，民间主要用于治疗痢疾、肠炎、胃痛等疾病，疗效确切。现代药理研究表明，地蜂子具有抗炎镇痛［2］、抗病毒［3］、抗氧化［4］等功效，但其物质基础尚不明确，人们前期从中得到少量三萜、黄酮及甾体类化合物［5-8］。为了更全面地考察地蜂子的物质基础，本实验对其进行了深入研究，结果从该植物乙酸乙酯部位中分离得到8个化合物1～8，包括二氢查尔酮 （1）、二氢黄酮醇 （2、6）、鞣花酸 （3）、三萜 （4、5）以及甾体 （7、8）。

1 仪器与材料

KQ3200E超声波清洗仪 （昆山市超声仪器有限公司）；RE2000旋转蒸发仪 （上海亚荣生化仪

器厂）。柱层析、薄层层析硅胶 （青岛海洋化工有限公司）；Toyopearl HW-40F（日本东曹株式会社）；D101大孔吸附树脂 （天津欧瑞生物科技有限公司）；Agilent1200 HPLC色谱仪（美国Agilent公司）；核磁共振仪 （美国Varian公司）。所用试剂均为分析纯或化学纯。

地蜂子药材采自湖北省恩施市，经湖北中医药大学药学院生药学教研室吴和珍教授鉴定为蔷薇科委陵菜属植物地蜂子Potentilla freyniana的干燥根茎，样本保存于湖北中医药大学湖北省中药资源与中药化学重点实验室。

2 提取分离

取地蜂子5 kg，粉碎后用10倍量80%乙醇渗漉提取，提取液减压浓缩至无醇味，依次以乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液减压回收溶剂，得到相应部分浸膏。其中，乙酸乙酯部分浸膏 （1 600 g）用60～70℃蒸馏水溶解，抽滤，得滤液部分 （A部分）和未滤过部分 （B部分）。A部分上D101大孔吸附树脂柱，依次以蒸馏水、20%、40%、60%、95%乙醇洗脱，TLC检识合并相似流份，浓缩，得到A1～A5五个部分。A3部分经硅胶、MCI、Diaion HP-20柱色谱反复分离纯化，得到化合物1（11 mg）、2（12 mg）、6（16 mg）；A4部分经反复硅胶、Toyopearl凝胶柱色谱分离纯化，得到化合物3（30 mg）、4（15 mg）；A5部分经反复硅胶柱色谱分离提纯，得到化合物7（20 mg）、8（1 g）。B部分经反复硅胶、Toyopearl凝胶柱色谱分离纯化后，再采用HPLC法制备，得到化合物5（6.2 mg）。

3 结构鉴定

化合物 1：黄色粉末 （甲醇）。1H-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.12（1H，d，J=8.8 Hz，H-2），6.60（1H，d，J=8.8 Hz，H-3），6.58（1H，d，J=8.8 Hz，H-5），7.12（1H，d，J=8.8 Hz，H-6），2.76（2H，t，J=7.2 Hz，H-β），6.24（1H，d，J=2.3 Hz，H-3′），5.87（1H，d，J=2.3 Hz，H-5′），5.12（1H，d，J= 6.8 Hz，H-1″），3.92（1H，dd，J=12.0，1.6 Hz，Ha-6″）。13C-NMR（CD3OD，100 MHz）δ：133.6（C-1），130.4（C-2），116.1（C-3），156.4（C-4），116.1（C-5），130.4（C-6），47.0（C-α），30.9（C-β），206.6（C=O），106.5（C-1′），167.0（C-2′），94.8（C-3′），166.3（C-4′），99.3（C-5′），161.7（C-6′），102.0（C-1″），74.7（C-2″），78.4（C-3″），71.1（C-4″），78.5（C-5″），62.4（C-6″）。上述波谱数据与文献［9-10］报道基本一致，因此鉴定此化合物为phloridzosid。

化合物2：红褐色粉末 （甲醇），1H-NMR（CD3OD，584 MHz）δ：6.76（1H，s，H-2′），6.83（1H，d，J=1.8 Hz，H-5′），1.27（3H，t，J=4.1 Hz，H-2″），2.51（1H，dd，J=8.2，15.7 Hz，H-4），2.84（1H，dd，J=5.8，16.4 Hz，H-4），3.97（1H，m，H-3），4.12（2H，q，J=9.2 Hz，H-1′），4.61（1H，d，J=7.0 Hz，H-2），5.79（1H，d，J=2.2 Hz，H-6），5.88（1H，d，J=1.6 Hz，H-8）。13C-NMR（CD3OD，146 MHz）δ：82.7（C-2），68.8（C-3），28.4（C-4），156.8（C-5），96.3（C-6），95.5（C-8），100.8（C-4α），157.5（C-8α），131.8（C-1′），114.8（C-2′），145.6（C-3′），145.6（C-4′），115.7（C-5′），121.8（C-6′），65.0（C-1″），15.3（C-2″）。以上碳谱数据文献 ［11］报道基本一致，但该化合物多出两个碳原子，同时分析氢谱中4.05（2H，q，J=9.3 Hz，H-1′），1.27（3H，t，J=4.1 Hz，H-2″），可知该基团为乙基，通过综合分析得知该化合物为4′-0-乙基-儿茶素。

化合物3：淡黄色粉末（甲醇），FeCl3、Molish反应均呈阳性。1H-NMR（CD3OD，584 MHz）δ：7.58（1H，s，H-5），7.64（1 H，s，H-5），4.06（1H，s，H-3），4.99（1H，d，J=7.2 Hz，H of Sugar-C1）。13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：114.2（C-1），143.1（C-2），141.3（C-3），154.0（C-4），112.3（C-5），112.0（C-6），159.4（C-7），114.2（C-1′），141.9（C-2′），137.2（C-3′），146.8（C-4′），108.3（C-5′），112.4（C-6′），159.4（C-7′），61.5（C-3-OMe），103.1（C-1″），72.8（C-2″），75.4（C-3″），70.5（C-4″），65.4（C-5″）。上述波谱数据与文献 ［12］报道基本一致，因此鉴定该化合物为3-甲基鞣花酸-4-0-β-D-木榶苷。

化合物4：白色无定型粉末（甲醇）。1H-NMR（CD3OD，584 MHz）δ：1.23（1H，m，H-1α），1.36（1 H，m，H-1β），1.61（1 H，m，H-2α），2.61（1H，m，H-2β），3.99（1H，m，H-3），1.61（1H，m，H-5），1.48（2H，m，H-6），1.38（1H，m，H-7α），1.58（1H，m，H-7β），1.84（1H，m，H-9），1.30（1 H，m，H-11α），2.05

（1H，m，H-11β），5.33（1H，br t，H-12），0.99（1H，m，H-15α），1.84（1H，m，H-15β），1.19（1H，m，H-16α），1.72（1H，m，H-16β），2.51（1H，s，H-18），1.36（1H，m，H-20），1.54（1H，m，H-21），1.84（1H，m，H-22），1.60（1H，m，H-22α），1.76（1H，m，H-22β），3.68（1H，d，J=11.1 Hz，H-23α），3.80（1 H，d，J=11.1 Hz，H-23β），3.66（1H，d，J=4.1 Hz，H-24α），3.78（1H，d，J=4.1 Hz，H-24β），0.92（3H，s，H-25），0.77（3H，s，H-26），1.35（3H，s，H-27），1.19（3H，s，H-29），0.93（3H，d，J=6.4 Hz，H-30），5.32（1H，d，J=8.2 Hz，H-1），3.34（1 H，dd，J=9.3，8.7 Hz，H-2），3.36（1H，m，H-3），3.37（1H，m，H-4），3.40（1 H，dd，J=4.5，2.4 Hz，H-5），3.68（1H，dd，J=11.1，4.5 Hz，H-6α），3.80（1H，dd，J=11.1，2.4 Hz，H-6β）。13C-NMR（CD3OD，146 MHz）δ：33.8（C-1），26.4（C-2），70.2（C-3），46.5（C-4），43.9（C-5），21.2（C-6），34.3（C-7），42.5（C-8），49.2（C-9），37.9（C-10），25.1（C-11），128.8（C-12），138.0（C-13），43.4（C-14），28.8（C-15），26.9（C-16），50.6（C-17），54.9（C-18），74.2（C-19），42.4（C-20），25.9（C-21），37.6（C-22），71.2（C-23），63.2（C-24），15.9（C-25），18.2（C-26），25.5（C-27），179.2（C-28），26.7（C-29），16.6（C-30），95.8（C-1′），73.8（C-2′），78.6（C-3′），72.1（C-4′），77.9（C-5′），63.2（C-6′）。上述波谱数据与文献［13］报道基本一致，因此鉴定该化合物为Clethric acid-28-0-β-D-glucopyranosyl-ester。

化合物5：白色无定形粉末 （氯仿-甲醇）。1HNMR（CD3OD，584MHz）δ：6.30（1H，d，J= 8.0 Hz，H-1′），5.35（1 H，br s，H-12），3.95（1H，m，H-2），3.85（1H，br s，H-3），3.30-3.44（6H，overlapped，H-2′，3′，4′，5′，6′a，6′b），3.83（1H，d，J=10.4 Hz，H-23a），3.72（1H，d，J=10.4 Hz，H-23 b），1.59（3H，s，H-27），1.27（3H，s，H-29），1.18（3H，s，H-24），1.14（3H，s，H-25），1.12（3H，d，J= 6.8 Hz，H-30），0.85（3H，s，H-26）。13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：48.9（C-1），70.6（C-2），78.3（C-3），43.4（C-4），48.7（C-5），18.2（C-6），32.7（C-7），41.1（C-8），48.2（C-9），38.3（C-10），24.3（C-11），128.6（C-12），138.2（C-13），42.0（C-14），28.0（C-15），27.3（C-16），48.8（C-17），55.0（C-18），73.6（C-19），42.6（C-20），25.9（C-21），38.7（C-22），72.0（C-23），16.9（C-24），18.2（C-25），18.3（C-26），25.3（C-27），177.9（C-28），27.3（C-29），17.1（C-30），96.4（C-1′），74.0（C-2′），78.9（C-3′），70.3（C-4′），77.9（C-5′），64.1（C-6′）。上述波谱数据与文献［14］报道基本一致，因此鉴定该化合物为nigaichigoside F2。

化合物6：黄色粉末 （甲醇），FeCl3反应呈阳性。1H-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：5.90（1H，d，J=1.9 Hz，H-6），5.89（1H，d，J=2.3 Hz，H-8），6.79（1H，d，J=1.9 Hz，H-2′），6.80（1H，d，J=7.2 Hz，H-5′），6.69（1H，dd，J= 7.2，1.9 Hz，H-6′），2.87（1 H，dd，J=5.2，16.0 Hz，H-4），2.53（1H，dd，J=8.0，16.0 Hz，H-4），4.56（1H，d，J=7.2 Hz，H-2），3.99（1H，m，H-3）。13C-NMR（CD3OD，100 MHz）δ：82.7（C-2），68.9（C-3），28.6（C-4），100.8（C-4α），156.9（C-5），95.4（C-6′），157.8（C-7），96.2（C-8），157.5（C-8α），131.9（C-1′），114.8（C-2′），146.0（C-3′），145.7（C-4′），115.2（C-5′），121.4（C-6′）。上述波谱数据与文献 ［11，15］报道基本一致，因此鉴定该化合物为儿茶素。

化合物7：白色粉末（甲醇），Liebermann-Burchard、Molish反应均呈阳性。与β-胡萝卜苷对照品展开，发现两者TLC行为一致，因此鉴定该化合物为β-胡萝卜苷［16］。

化合物8：白色针晶（氯仿），Liebermann-Burchard反应呈阳性［16］。与β-谷甾醇对照品在同一块硅胶G薄层板上展开，5%硫酸乙醇显色，105℃下烘烤3 min，在与对照品相应的地方显示出相同颜色的色谱斑点，因此鉴定该化合物为β-谷甾醇。

4 结论

前期研究中，从地蜂子中分离得到的化合物包括黄酮、三萜及甾体类化合物。本实验从中分离鉴定出8个化合物 （1～8），其中化合物1和2均为首次从委陵菜属植物中分离得到的黄酮类化合物，化合物3～6为首次从该植物中分离得到的化合物。地蜂子资源丰富，其化学成分和药理作用有待进一

步发掘，发展前景广阔。

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Chem ical constituents from Potentilla freyniana

CHEN Hui-ling1， YAN Bin1， QIN Zhu1， WU He-zhen1，2，3， YANG Yan-fang1，2，3*

（1.College of Pharmacy，Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 43OO65，China；2.Hubei Provincial Key Laboratory of Resource Scidence and Chemistry in Chinese Medicine，Wuhan 43OO61，China；3.Collaborative Innovation Center of Traditional ChineseMedicineof New Products for Geriatrics Hubei Province，Wuhan 43OO65，China）

AIM To study the chemical constituents from Potentilla freyniana.METHODS The compounds were isolated from the ethyl acetate extract of P.freyniana by silica and Toyopearl gel column chromatography. Their structures were then elucidated by physicochemical properties and spectroscopic data.RESULTS Eight compoundswere isolated and identified as phloridzosid（1），4′-0-ethyl-catechin（2），3-methyle ellagic acid-4-0-β-D-xylopyranoside（3），clethric acid-28-0-β-D-glucopyranosyl ester（4），niga-ichigoside F2（5），catechins（6），daucostarine（7），β-sitosterol（8）.CONCLUSION Compounds 1 and 2 are firstly obtained from genus Potentilla.Compounds 3，4 and 6 are isolated from this plant for the first time.

Potentilla freyniana；chemical constituents；isolation and identification

R284.1

A

1001-1528（2015）12-2674-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.12.022

2014-12-23

湖北省卫生和计划生育委员会科学研究项目 （2012Z-B21）

陈会玲 （1988—），女，硕士，从事中药品种、质量及资源开发研究。E-mail：936796383@qq.com

*通信作者：杨艳芳（1971—），女，博士，副研究员，从事中药及其制剂有效成分的研究。E-mail：yyf0204@aliyun.com