冯晓琴 王毅民 王怀秀 刘建荣 李 弘

山西省人民医院，山西省太原市 030012

720例生殖异常患者的染色体核型分析

冯晓琴 王毅民 王怀秀 刘建荣 李 弘

山西省人民医院，山西省太原市 030012

目的：探讨男性少、弱、无精症以及胎停育、畸胎、反复性流产等生殖异常患者的细胞遗传学原因。方法：针对我院720例生殖异常患者，做常规技术的外周血淋巴细胞培养，采用G显带法进行染色体核型分析。结果：720例生殖异常患者中，检出异常核型69例。其中，多态性核型为49例，包括9qh＋3例，inv（9）1例，Ds＋/Gs＋10例，Yqh＋35例。Turner综合征3例，Klinefelter综合征12例，平衡易位等5例。结论：染色体核型异常与生殖异常存在密切的关系，异常核型会导致男性少、弱、无精症以及畸胎孕产史和妊娠的反复失败，且染色体多态性与生殖异常关系尤为密切，建议临床应给予足够重视。

染色体核型分析 生殖异常 染色体多态性

染色体核型分析是从遗传学角度检测人类染色体的数目和结构有无异常的一项诊断技术，作为辅助生殖技术中不可或缺的诊断技术，为辅助生殖、遗传普查、产前诊断和遗传咨询提供可靠细胞遗传学依据。染色体是组成细胞核的基本物质，是基因的载体，控制着生物体各种生理和形态的遗传性状。染色体的数目和形态结构的异常会导致染色体疾病。如果夫妻双方产生染色体数目异常的配子，会产生非整倍体的异常胚胎，进而导致流产、死胎、畸胎等。如果染色体异常携带者自身染色体出现断裂、重接和互换、易位、重复、倒位等异常染色体，同样会导致复发性流产、胎停育等不良妊娠[1］。我科室对就诊的720例生殖异常患者做外周血染色体核型分析检查，并结合理论确认其临床生殖异常表现与染色体核型异常的关系，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 分析2013年2月－2015年6月前来我院就诊的720例生殖异常患者中，355例为其本人或其妻有反复流产史；211例为少、弱精症，无精症，单侧或双侧隐睾及睾丸发育不良；73例为有畸形儿娩出史，剩余81例为原发性不孕，继发性不孕及两性畸形等。

1.2 方法 对上述患者作外周血淋巴细胞培养和染色体核型分析，按照常规方法无菌采血0.3～0.5ml，37℃恒温培养72h。收获时，秋水仙碱1μg/μl终止，0.075%KCl低渗处理，甲醇∶冰醋酸（3∶1）固定，悬滴制片。采用G显带法进行核型分析，根据人类遗传学国际命名体制（ISCN，2009）对染色体命名。每例计数20个中期分裂相，分析3～5个核型。

2 结果

2.1 染色体核型结果 720例生殖异常患者中，检出异常核型69例。其中，多态性核型为49例，包括9qh＋3例，inv（9）1例，Ds＋/Gs＋10例，Yqh＋35例。特纳氏综合征3例，Klinefelter综合征12例，平衡易位等5例。染色体多态核型如图1所示，Klinefelter综合征和易位核型如图2所示。

图1 染色体多态性核型

图2 Klinefelter综合征和易位核型

2.2 染色体异常核型与生殖异常的关联 本研究中，染色体多态性核型为49例，包括9qh＋3例，inv（9）1例，分别表现为反复性流产和睾丸发育不良；Ds＋/Gs＋10例，D组6例，分别表现为无精症、反复性流产等；G组4例，同样临床表现为反复性流产。Yqh＋35例，表现为少、弱精症，无精症，隐睾，睾丸发育不良以及其配偶反复性流产。Turner综合征3例，表现为原发性闭经、不孕、子宫发育不良，其中有1例超声显示腹腔有形似睾丸组织。Klinefelter综合征12例，表现为无精症或睾丸发育不良。平衡易位等5例，表现为无精症、反复性流产、畸胎或胎停育。染色体异常核型与生殖异常临床表现见表1，各类核型占异常核型的比率及异常检出率见表2。

3 讨论

染色体数目和结构异常直接导致人体表型的不同变异，近年来发现，染色体核型分析诊断对于临床辅助生殖具有重要作用。染色体异常是导致男性少、弱、无精症以及胎停育、不孕、畸形胎儿和反复性流产的一类重要原因[2］。

3.1 染色体多态性与生殖异常 从表1中看出，反复性流产患者的染色体核型存在不同程度的变异，既有染色体的多态性类型，也有平衡易位和罗伯逊易位的类型，但是以多态类型居多。染色体的多态性是指染色体结构和带纹强度存在恒定的但并非病理性的细微差异，通常存在于1、9、16号染色体和Y染色体的次缢痕以及D/G组的随体区域，属于结构性异染色质。传统观点认为，染色体的多态性缺乏遗传活性，通常不引起表型的异常变化，不具有临床意义[3］。然而，近年来研究表明，许多不良妊娠患者的核型分析在1、9、16号和Y染色体上大都存在一定的多态性改变，提示结构性异染色质产生的多态性可能会干扰着丝粒的功能，在细胞分裂时姐妹染色单体结合和分离出现紊乱，从而产生异常生殖细胞，造成不良妊娠[4］。端着丝粒染色体短臂上核仁组织区含有rRNA基因，在个体中差异性表达，核糖体rRNA可引起随体区联合，增加染色体在减数分裂时不分离的几率[5，6］。本研究检出的49例反复性流产患者，其中，9号多态性4例，D/G组多态性10例，提示9号次缢痕多态性和随体多态性可能会增加减数分裂形成异常配子的不稳定性以及胚胎的不稳定性，是影响正常妊娠的干扰因素。另外35例反复性流产不良妊娠患者的核型大都是表现为其丈夫Y染色体多态性，这就提示Y染色体多态可能是引起流产的潜在原因。Y染色体长臂有一段开放阅读框，其翻译出的转录因子有助于正常精子的生成和发育。若Y染色体长臂此区域缺失或异常增加，都会导致男性的少、弱、无精症[4］。大Y染色体患者在临床上表现为严重无精症或反复性流产，在某种程度上增加了体外受精妊娠失败的风险[7，8］。

表1 染色体异常核型与生殖异常表现

表2 异常核型比率和异常检出率

3.2 其他平衡易位等与生殖异常 其他畸形胎儿孕产史和个别反复流产是由于平衡易位造成的，染色体之间容易发生易位的现象并非偶然，可能与各染色体核仁组织区重复DNA序列和结构以及在间期中核仁的形成方式有关[1］。平衡易位携带者一般不会出现表型的改变，但其子代接受易位染色体后可能会形成异常胚胎，罗氏易位者，其子代容易产生单体型或三体型，引发流产[9］。

从表2可以看出，Yqh＋、Ds＋/Gs＋和Klinefelter综合征占异常核型比例较高，且这三类异常检出率比其他异常核型较高一些。这就提示，在导致不孕不育的染色体异常核型因素中，Y染色体多态性、随体组多态性和Klinefelter综合征是更大的潜在异常因素。

综上所述表明，第一，夫妇任何一方染色体核型异常，都会导致胎停育和反复性流产等生殖异常临床症状。第二，反复性流产患者核型检测大都表现为9号多态性、D/G组多态性和Y染色体多态性，由此可见，染色体多态性可能是导致反复性流产的潜在不稳定因素。第三，在无精症患者中，Klinefelter综合征的异常检出率较高，是导致不孕的重要原因。第四，平衡易位和罗氏易位者，也能引起流产和畸形胎儿孕产史。针对上述几点，关于染色体异常导致的生殖异常，临床应给予足够重视和深入思考，以便于染色体核型分析诊断技术可以为辅助生殖和遗传学咨询提供更客观合理的指导，有助于育龄夫妇做出较佳的生育计划。

[1]杜传书，刘祖洞.医学遗传学〔M〕.北京：人民卫生出版社，1983.

[2]Zhimulev IF，Beliaeva ES.Heterochromatin，gene position effect and gene silencing〔J〕.Genetica，2003，39（2）：187－201.

[3]李侃，熊焰，张静.遗传咨询者染色体多态性与生殖异常关系的分析〔J〕.中国优生与遗传杂志，2010，18（10）：40－41.

[4]Madon PF，Athalve AS，Parikh FR.Polymorphic variants on chromosomes probably play a significant role in infertility〔J〕.Reproductive Bio Medicine，2005，11（6）：726－732.

[5]Shen Y，Wang C，Hong D，et al.The relationship between polymorphisms in the promoter region of Tim－3and unexplained recurrent spontaneous abortion in Han Chinese women〔J〕.Reprod Biol Endocrinol，2013，11：104.

[6]昌业伟，杨苏亚，杨迎桂.染色体多态性与疾病关系的探讨〔J〕.中国优生与遗传杂志，2012，20（5）：65－66.

[7]王小荣，邓剑霞，李津津.染色体多态性与临床效应及生殖关系的探究〔J〕.遗传，2007，29（11）：1362－1366.

[8]李亚丽，高福禄，段相林.Y染色体多态性与临床遗传学效应的研究〔J〕.中国妇幼保健，2013，28（25）：4192－4194.

[9]赵利娟，涂建成.170对习惯性流产夫妇染色体核型分析〔J〕.国际检验医学杂志，2010，31（11）：1229－1233.

（编辑雅文）

Karyotype Analysis of 720 Patients with Abnormal Reproduction

FENG Xiaoqin，WANG Yimin，WANG Huaixiu，et al.Shanxi Provincial People’s Hospital，Taiyuan City，Shanxi Province 030012

Objective：To investigate the cytogenetic reason of patients under going reproductive abnormalities such as azoospermia，malformation fetus，recurrent spontaneous abortion.Methods：For examination of 720patients with reproductive abnormalities，as a conventional technique of peripheral blood lymphocyte culture，by using G banding karyotype analysis.Results：Of 720patients with abnormal reproductive，69cases of abnormal karyotypes was detected in this study.Among them，there were 49cases of the polymorphism karyotype，including 3cases in 9qh＋，1case in inv（9），10cases in Ds＋/Gs＋，35cases in Yqh＋，3cases in Turner syndrome，12cases in Klinefelter syndrome，5cases in balanced translocation.Conclusion：Abnormal chromosome karyotype and there is a close relationship between reproductive abnormalities and abnormal karyotype，leading azoospermia，malformation fetus，recurrent spontaneous abortion and so on.Further more，the relationship is closer between chromosome polymorphism and reproductive abnormalities，therefore，much more attention should be given to this point in clinical.

Karyotype analysis，Reproductive abnormalities，Chromosome polymorphism

R363.2＋5

A

1001－7585（2015）22－3040－03

2015－07－14