赵俪梅 傅亚均 陈 勇

1.重庆市北部新区第一人民医院妇产科，重庆401121；2.重庆市西南医院妇产科，重庆400038

卵巢癌患者血清胸苷激酶1水平及其临床意义

赵俪梅1傅亚均1陈 勇2

1.重庆市北部新区第一人民医院妇产科，重庆401121；2.重庆市西南医院妇产科，重庆400038

目的探讨卵巢癌患者血清胸苷激酶1（TK-1）水平及其临床意义。方法研究2010年3月～2014年6月重庆市北部新区第一人民医院及重庆市西南医院就诊的初治卵巢癌患者116例（卵巢癌组），选择同期卵巢良性肿瘤患者54例（卵巢良性肿瘤组）及健康体检者56例（健康对照组）。记录三组一般情况、临床特征等资料，采集血清检测TK-1及CA125水平。对接受治疗患者定期随访，观察无进展生存情况。对影响无进展生存时间的危险因素进行多因素Logistic回归分析。采用Pearson和Spearman系数进行各指标间的相关性分析。结果卵巢癌组患者TK-1［（4.89±1.85）pmol/L］及CA125［（647.08±208.83）pmol/L］水平显著高于卵巢良性肿瘤组［（0.59±0.23）、（22.71±9.62）pmol/L］及健康对照组［（0.61±0.20）、（22.11±9.94）pmol/L］，且临床分期越高TK-1水平越高，有远处转移患者TK-1较无转移更高（均P＜0.01）。血清TK-1与CA125水平及临床分期呈正相关（r=0.657、0.567，均P＜0.01）。初始高TK-1水平（≥4.00 pmol/L）患者远期（30个月）无进展生存比率较低TK-1水平（＜4.00 pmol/L）患者更低，差异有统计学意义（P=0.011）。临床分期、初始CA125及TK-1水平是无进展生存时间的负性影响因素。结论卵巢癌患者血清TK-1显著升高，与临床分期及CA125水平相关。初始高TK-1水平预示预后较差，高临床分期、初始高CA125及TK-1水平影响治疗后无进展生存时间。

卵巢癌；胸苷激酶1；糖类抗原125；预后

卵巢癌是临床上常见的妇科生殖系统肿瘤，病理类型复杂多样，早期诊断困难，病死率高。每年全球约有超过22万女性发生卵巢癌，美国每年约新增22 500例，病死约14 600例，病死率高达67.7%［1］。卵巢癌早期与晚期预后差异巨大，且早期缺乏典型临床症状及特异性诊断方法，导致大部分患者发现时已是中晚期。同时，治疗后复发及远处转移也是导致临床上患者死亡的最重要原因。糖类抗原125（carbohydrateantigen，CA125）是目前临床应用最广，公认的用于卵巢癌患者诊断及预后评价的血清肿瘤学标志物［2］。然而CA125的准确性仍不够理想，假阳性率较高，临床上亟需寻找更为准确的指标或联合指标来改进对卵巢癌的诊断及预后判断。人胸苷激酶1（thymidine kinase 1，TK-1）是参予DNA合成的关键酶之一，是嘧啶补救合成DNA的关键，与肿瘤细胞增殖密切相关［3］。大量的研究显示，TK-1在多种恶性肿瘤性疾病（如肾癌、急性白血病、胃癌、乳腺癌等）中都有过度表达，是重要的临床诊断及预后指标［4-5］。因此，本研究通过检测卵巢癌患者血清TK-1并以CA125作为对照，长期随访患者，探讨TK-1水平差异的临床意义。现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2010年3月～2014年6月重庆市北部新区第一人民医院（以下简称“我院”）及重庆市西南医院诊断为卵巢癌的初治女性患者116例（卵巢癌组）。卵巢癌患者均经由组织活检病理确诊。患者临床分期及病理分型按照最新的国际妇产科协会（FIGO）制订的标准进行［6］。患者的临床分期情况：Ⅰ期13例（11.2%），Ⅱ期26例（22.4%），Ⅲ期29例（25.0%），Ⅳ期48例（41.4%）。病理分型情况：浆液性囊腺癌70例（60.3%），黏液性囊腺癌21例（18.1%），子宫内膜样癌10例（8.6%），透明细胞癌7例（6.0%），恶性畸胎瘤4例（3.4%）及分类不明型卵巢癌4例（3.4%）。同时纳入我院经影像或组织活检确诊良性卵巢肿瘤女性患者54例（良性肿瘤组），健康体检者56例（健康对照组）。良性卵巢肿瘤患者病理分型情况：浆液性囊腺瘤14例（25.9%），黏液性囊腺瘤8例（14.8%）、卵巢巧克力囊肿7例（13.0%），畸胎瘤13例（24.1%）及其他类型卵巢良性肿瘤12例（22.2%）。本研究（病历资料及标本使用）经由我院伦理委员会批准，所有检测项目在检测时均向患者进行了告知并知情同意。

1.2 血清TK-1及CA125检测

良性肿瘤组及健康对照组于就诊或体检时采集静脉血，卵巢癌组患者于首次住院时采集空腹静脉血，离心分离血清，冻存于-20℃冰箱备用。血清TK-1的检测使用人可溶性TK-1酶联免疫吸附试剂盒（上海恒斐生物科技有限公司），检测方法按照试剂盒相关步骤进行（每份血清标本设置2个复孔），使用酶标仪（Scientific Multiskan FC，Thermo公司）进行定量检测，根据标准曲线计算单孔TK-1浓度，患者血清TK-1浓度由复孔检测浓度取平均值。血清CA125测定使用电化学发光法，使用COBAS6000（罗氏）电化学发光生化免疫分析仪检测，试剂为配套试剂。

1.3 患者临床资料收集及随访

初次就诊时采集患者一般情况及临床检测信息，住院进行B超、CT或病理活检确定肿瘤临床分期及病理类型。所有接受治疗患者均进行定期门诊及电话随访，根据临床查体、B超、CT、实验室检查等方式了解患者治疗效果及肿瘤复发情况，记录患者失访情况。无进展生存期定义为患者手术或药物治疗后肿瘤无复发、增大及远处（淋巴结）转移。

1.4 统计学方法

使用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，Graph-Pad Prism 5.0软件绘图。符合正态分布计量资料的均数用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；不符合正态分布的改用中位数或四分位数间距表示，两组间比较采用非参数检验（秩和检验）；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Pearson和Spearman；生存曲线分析使用Log-rank（Mantel-Cox）检验；影响预后因素分析使用多因素Logistic回归。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

表1 三组一般情况及血清TK-1、CA125水平比较（x±s）

2 结果

2.1 三组一般情况及血清TK-1及CA125水平

各组患者年龄、体重指数（BMI）、绝经情况、吸烟及饮酒情况之间差异无统计学意义，具可比性。卵巢癌组患者血清TK-1水平高于良性肿瘤组及健康对照组，差异有高度统计学意义（均P＜0.01）。卵巢癌组患者血清CA125水平也高于良性肿瘤组及健康对照组。见表1。

2.2 不同临床资料卵巢癌患者血清TK-1及CA125水平

不同临床资料卵巢癌患者TK-1及CA125水平结果为：临床分期为Ⅳ期时TK-1及CA125最高，不同病理分型中浆液性囊腺癌患者TK-1及CA125最高，有远处转移患者TK-1及CA125高于无远处转移者，差异均有高度统计学意义（P＜0.01）。根据是否已绝经、有饮酒史及吸烟史区分的患者之间TK-1及CA125水平相似，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 不同临床资料卵巢癌患者血清TK-1及CA125水平（pmol/L，x±s）

2.3 血清TK-1与CA125、年龄、临床分期、BMI的相关性分析

Pearson相关性分析结果显示，卵巢癌患者血清TK-1与CA125水平呈显著正相关（r=0.657，P＜0.01），与年龄并无相关性（r=-0.017，P=0.852）（图1）。使用Spearman相关性分析显示，卵巢癌患者血清TK-1水平与临床分期呈正相关（r=0.567，P＜0.01），与BMI无相关性（r=-0.029，P=0.758）。

2.4 患者治疗及随访情况

除外18例（15.5%）患者因身体状况无法耐受手术及化疗，其余患者（n=98）均根据自身情况进行了规范的手术或药物化疗。同时通过门诊及电话进行随访，中位随访时间为34.17个月（29.12～40.31个月）。根据治疗前初始血清TK-1水平将98例患者分为TK-1＜4.00 pmol/L组（n=43）及TK-1≥4.00 pmol/L组（n=55），随访观察两组随时间增加的无进展生存率变化情况。随访至40个月时，TK-1＜4.00 pmol/L组失访4例，失访率为9.3%（4/43）；TK-1≥4.00 pmol/L组失访3例，失访率为4.5%（3/55）。随访至40个月时，TK-1＜4.00 pmol/L组患者无进展生存比例为36.43%，TK-1≥4.00 pmol/L组无进展生存比例为24.61%，两组之间差异有统计学意义（P=0.011）（图2）。

图1 TK-1与CA125、年龄的相关性分析

图2 不同TK-1水平下接受治疗的卵巢癌患者无进展生存比率（n=98）

2.5 影响远期预后的因素分析

接受治疗的卵巢癌患者（n=98）在各类因素不同暴露水平下的无进展生存时间及差异，除外临床分期（P=0.021）、血清TK-1（P=0.001）及CA125（P= 0.006）水平外，其他因素不同水平的无进展生存时间之间差异无统计学意义（P＞0.05）。以无进展生存时间作为因变量，将血清TK-1（＜4.00 pmol/L为0，≥4.00 pmol/L为1）、CA125水平（＜600.00 pmol/L为0，≥600.00 pmol/L为1），卵巢癌临床分期（Ⅰ～Ⅱ期为0，Ⅲ～Ⅳ期为1）进行赋值作为协变量并纳入二元Logisitic回归分析。临床分期（β=-0.511，OR=0.600，95%CI为0.478～1.029，P=0.048）、初始CA125水平（β=-1.133，OR=3.105，95%CI为1.349～7.142，P= 0.008）、初始TK-1水平（β=-1.504，OR=4.500，95%CI为1.910～10.603，P=0.001）是无进展生存时间的危险因素。见表3。

表3 各影响因素不同暴露水平无进展生存时间

3 讨论

TK-1是一类在细胞周期循环中发挥重要作用的蛋白，正常生理状态下，TK-1主要表达于成人的高增殖细胞（再生的肝组织）或胎儿组织（骨髓、脂肪组织）中。TK-1的分子量约为25 kD，在血液循环中主要以四聚体形式存在，而且在低温环境下活性及浓度十分稳定（超过5年）［7］。人TK-1组要参予调控细胞周期中的S期（DNA合成期），与细胞分类增殖密切相关，其生物学功能的发挥也主要依靠四聚体的重构来实现［8］。随着对TK-1的深入研究发现，在多种恶性肿瘤疾病中，病灶组织及循环中的TK-1表达可出现显著升高（甚至达到生理水平的2～100倍）［9］。现有的关于TK-1的研究主要集中在肾癌、乳腺癌、胃癌及非小细胞肺癌等，这些肿瘤一般是存在高速恶性增生的实体肿瘤，细胞DNA合成旺盛［10-11］。

大量的研究证明了TK-1在多种实体肿瘤中存在差异性表达，有重要的诊断价值［4］。如在Li等［12］针对非小细胞肺癌患者（n=250）的研究中，肿瘤患者血清中TK-1水平显著高于正常对照组，而且升高水平与癌症分期相关，转移组也显著高于未转移组。Chen等［13］开展的大规模筛查研究中（n=35 365）发现，不同的血清TK-1水平可以反映肿瘤的大小、分期及是否转移情况，而且TK-1的降低提示了抗肿瘤治疗的效果。血清TK-1作为可靠的无创性指标，对多种恶性肿瘤有着早期预测及诊断的重要价值。然而，针对卵巢癌患者TK-1表达情况的研究相对较少。在本研究中发现，卵巢癌患者血清TK-1水平是显著高于良性肿瘤患者及健康对照，而且是否有远处转移及不同的临床分期患者之间的TK-1水平有着明显的差别（Ⅳ期及有远处转移患者TK-1水平显著升高），但不同病理分型患者之间差异并不显著。同时，CA125是临床上应用最广泛的卵巢癌诊断预后血清学指标，其特异性及灵敏度都得到了大量临床数据的验证。本研究使用CA125作为对照观察血清TK-1水平与卵巢癌临床分期及预后的关系，结果显示卵巢癌患者血清TK-1与CA125呈显著正相关（r=0.657，P＜0.01），也为寻找与CA125联合来诊断及判断预后的指标提供了参考。因此，血清TK-1可用于作为卵巢癌的无创血清学诊断指标，其水平的高低可以反映卵巢癌的临床分期及转移情况。

卵巢癌易出现复发及远处转移，这也是导致患者病死的最重要原因。临床上一直在寻找优良的无创预后判断指标来更好的指导临床治疗及评估预后［14］。本研究通过对患者远期随访观察，探讨了不同血清TK-1水平患者的远期预后及相关危险因素。根据初始KT-1水平高低分组的随访显示，中远期（30～40个月）高TK-1组患者无进展生存比率较低TK-1组更低，预后更差。其中影响患者无进展生存时间的危险因素主要是临床分期、初始CA125及TK-1水平（均P＜0.01）。而患者的年龄、BMI、是否吸烟饮酒及病理类型并不是影响无进展生存比率的危险因素。值得一提的是，有研究显示浆液性卵巢癌的预后就其他病理类型更差［15］，但在本次研究中并未显示出相似结果。可能是因为本研究属于回顾性研究，无法均等纳入各类型肿瘤（包含不同阶段临床分期），造成了选择性偏倚。并且TK-1作为反映细胞恶性增生的指标，更与肿瘤组织的大小、增生程度及远处转移相关，用作区分与预后相关的肿瘤病理类型反而不够准确［16］。

本研究检测了卵巢癌患者血清TK-1水平，研究了TK-1与患者临床特征的相关性，并通过长期随访研究，分析了TK-1与患者预后的关系及相关危险因素。TK-1作为近年研究关注的一类肿瘤标志物，其在卵巢癌患者的诊断及预后中都显示出了重要的价值，TK-1水平与临床分期及CA125水平有着良好的相关性，高TK-1也是影响远期预后的重要危险因素。然而本研究也存在样本量较少，纳入患者存在一定偏倚的不足，在后续的研究中还需对TK-1与卵巢癌的关系进行深入探讨，为更准确的临床诊断及预后提供参考。

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Clinical significance of serum Thymidine Kinase1 in ovarian cancer

ZHAO Limei1FU Yajun1CHEN Yong2
1.Department of Obstetrics and Gynecology,the First People's Hospital of Chongqing New North Zone,Chongqing 401121,China;2.Department of Obstetrics and Gynecology,Southwest Hospital of Chongqing City,Chongqing400038, China

ObjectiveTo investigate the serum thymidine kinase 1(TK-1)level and its clinical significance of patients with primaryovarian cancer.MethodsThe research included 116 patients with ovarian cancer(ovarian cancer group) from March 2010 to June 2014 in the First People's Hospital of Chong Qing New North Zone and Southwest Hospital of Chongqing,while the 54 patients with ovarian benign tumor(ovarian benign tumor group)and 56 cases of healthy control(healthy controls group)were selected.The general situation,clinical manifestations of three groups were recorded and levels of serum TK-1 and CA125 were detected.Patients with treatment were followed up regularly,and the risk factors of progression-free survival time were analyzed with Logistic regression.The correlation between the indexes were analyzed by Pearson and Spearman coefficient.ResultsThe levels of TK-1［(4.89±1.85)pmol/L］and CA125［(647.08±208.83)pmol/L］of patients in the ovarian cancer group were significantly higher than those in the ovarian benign tumor group［(0.59±0.23),(22.71±9.62)pmol/L］and healthy control group［(0.61±0.20),(22.11±9.94)pmol/L］.The TK-1 levels were higher in patients with advanced clinical stageor and distant metastasis than others(all P＜0.01).The level of TK-1 was significant positive correlation with CA125 level and clinical stage(r=0.657,0.567,all P＜0.001). The long-term(about 30 months)progression-free survival rate of patients with initial high level of TK-1(≥4.00 pmol/L) was lower than that of the low level(＜4.00 pmol/L),the difference was statistically significant(P=0.011).Clinical stage,initial levels of CA125 and TK-1 were negative risk factors of progression-free survival time.ConclusionThere is significant increase of serum TK-1 level in ovarian cancer patients,and it is related to the CA125 level and clinical stage.Initial high TK-1 level predicts poor prognosis.Advanced clinical stage,the initial high level of CA125 and TK-1 affect progression-free survival time after treatment.

Ovarian cancer;Thymidine kinase 1;Carbohydrate antigen 125;Prognosis

R737.31

A

1673-7210（2015)02（b)-0039-05

2014-11-14本文编辑：任念）

傅亚均（1976.3-），女，副主任医师；研究方向：妇科恶性肿瘤性疾病的临床治疗。