谢腾+刘玉忠+王升+刘谈+康利平+郭兰萍

[摘要] 新疆紫草Arnebia euchroma是药用紫草的主要来源，其最重要成分紫草素类化合物具有很高的药用和工业价值。研究采用GATEWAY技术，构建新疆紫草次生代谢关键酶基因PAL， HMGR， PGT的过表达载体和RNAi载体，为相关转基因株系的构建搭建好平台。新疆紫草次生代谢关键酶基因过表达和RNA干扰载体的构建，是基于遗传物质的遗传研究平台的搭建，对于次生代谢途径上基因功能验证和功能基因的挖掘提供了极大的便利，同时也填补了新疆紫草在转基因领域研究的空白，对于培育紫草素高产株系具有重要意义。

[关键词] 新疆紫草;过表达载体;RNAi载体;GATEWAY技术

[收稿日期] 2014-06-18

[基金项目] 国家自然科学基金项目（81130070，81072989）;国家科技支撑计划项目（2012BAI29B02，2012BAI28B002）

[通信作者] *郭兰萍，Tel：（010）64011944，E-mail：glp01@126.com

[作者简介] 谢腾，硕士，Tel：18310830559，E-mail：txwsxtws@163.com

新疆紫草Arnebia euchroma （Royle） Johnst是药用紫草的主要来源[1]，其重要成分紫草素类化合物具有止血、抗癌、抗HIV等多种药理活性[2-4]，同时也是天然的化工染料和食品添加剂[5-6]。

紫草素类化合物通常认为是在限速酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）、甲戊二羟酸单酰辅酶A还原酶（HMGR）和对羟基苯甲酸香叶基转移酶（PGT）催化下，通过苯丙氨酸（phenylpropan-oid，PP）-甲羟戊酸（mevalonate，MVA）复合途径合成。PAL是PP途径中的起始代谢酶，催化L-苯丙氨酸生成反式肉桂酸，进而开启对羟基苯甲酸（PHB）的合成。MVA途径上的HMGR将甲戊二羟酸单酰辅酶A还原为甲戊二羟酸，进而生成PP和MVA途径的中间产物焦磷酸香叶酯（GPP）。最后PHB，GPP在PGT的催化下合成紫草素类化合物前体香叶基-对羟基苯甲酸（GHB）[7-8]。

次生……