花生抗黄曲霉相关基因PnLOX2的原核表达及RNAi载体的构建与转化
2015-01-07��张廷婷马登超宫清轩李春娟闫
山东农业科学 2014年9期
��+张廷婷+马登超+宫清轩+李春娟+闫彩霞+赵小波+单世华
摘要:本研究对利用基因芯片技术从抗、感黄曲霉花生品种中分离出的差异表达基因PnLOX2进行原核表达,得到分子量为121.5 kD的融合表达产物;构建了PnLOX2基因的3′端反向重复结构并转化花生,得到了转基因花生苗,为反向鉴定PnLOX2基因在花生抗黄曲霉侵染过程中的功能奠定基础。
关键词:花生;抗黄曲霉;原核表达;反向重复结构
中图分类号:S565.203.53文献标识号:A文章编号:1001-4942(2014)09-0001-06
花生是我国主要的油料作物和经济作物,在国家油脂安全和农产品国际贸易中占有举足轻重的地位。我国是世界生产花生最多的国家。花生易受黄曲霉感染,黄曲霉污染不仅直接危害人们的健康而且影响花生的品质和外贸出口,因此人们一直设法采取各种措施防止[1]。应用抗病品种是病害防治最直接有效的方法,但花生抗黄曲霉种质资源匮乏,加之常规育种周期长使得抗病品种远不能满足生产需求。随着生物技术的发展,运用基因工程手段将外源抗病基因导入花生为其抗病育种带来了新的希望[2]。
目前国内外已有不少关于花生抗黄曲霉基因克隆和鉴定的研究。Moyne等[3]从Bacillus subtilis AU195菌中分离出芽孢霉素,体外试验证明其对黄曲霉菌生长具有很强的抑制作用,目前该基因的分离克隆已经完成。还有研究认为,大豆脂肪酸氧化酶基因(LOX)对黄曲霉菌的侵染和产毒具有抗性作用[4],但该观点尚需要进一步验证。核糖体失活蛋白(RIP)对抑制黄曲霉菌侵染和产毒也具有重要作用[5]。……
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