孙 昊，刘建国，朱桂梅，李海云，郝再彬

(桂林理工大学化学与生物工程学院，中国桂林 541004)

工业生产剑麻纤维时剩余的抽丝汁液和残渣中含有丰富的剑麻皂苷资源，转化提取出的皂苷元可以改善小鼠糖耐量［1］;剑麻皂苷元能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平，对肾上腺素高血糖大鼠也有降血糖作用［2］.剑麻皂苷元(Tigogenin，图1)是螺甾烷醇的衍生物，是合成甾体激素类药物的医药中间体和重要原料，广泛应用于肾上腺皮质激素、性激素及蛋白同化激素，三大类激素可以制造200 多种药物［3-4］.用甲醇提取剑麻叶汁中的化合物，分离得到5 个甾体皂苷A、B、C、D、E［5］，均可用于皂苷元的转化.药理研究表明，这种皂苷元成分具有较明显的抗炎、抗菌、止血、抗衰老和降血糖的生物活性［6］.

图1 皂苷元结构Fig.1 The structure of tigogenin

目前工业生产剑麻皂苷元采用硫酸加热回流提取法，通过多次醇提酸解皂苷得到皂苷元产品.大量［7］醇和酸对环境造成很大危害，同时也提高了生产成本.因此，新型的无污染低能耗的剑麻皂苷元生产方法亟待研究与开发，本实验筛选出产生剑麻皂苷元的高活性发酵微生物，为工业化生产开辟了一条新途径.

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种与培养基 土壤样品:实验室采集桂林喀斯特地貌的土壤样品200 份.筛选培养基:绞股蓝皂苷2 g;琼脂2 g;硫酸亚铁0.001 g;硫酸镁0.05 g;氯化钠0.05 g;磷酸氢二钾0.05 g;硝酸钾0.1 g;水100 mL，用1 mol/L NaOH 调节pH 至7.5，121 ℃灭菌20 min，摇匀后倒平板.

1.1.2 试剂与仪器 试剂:剑麻皂苷元标准品(98%，HPLC 纯，上海研生生物技术有……