张治文

婴幼儿肌酸激酶同工酶假性增高原因分析

张治文

目的 探讨引起婴幼儿肌酸激酶同工酶(CK-MB)增高的原因, 避免临床误诊。方法 利用免疫抑制法测定CK-MB和动力学法测定肌酸激酶(CK), 计算CK-MB/CK比值, 比值＞30%的标本测定CK-MB质量。结果 比值＞30%的标本测定CK-MB质量均在正常范围内。结论 婴幼儿CK-MB结果增高影响因素很多, 应该综合分析原因避免误诊。

同工酶；脑型肌酸激酶同工酶；免疫抑制法；质量测定

血清肌酸激酶(creatine kinase, CK)及其同工酶的测定是诊断急性心肌梗死(AMI)最具有价值的生化指标之一［1］, 但由于方法学不完善及其他可引起肌酸激酶同工酶(CK-BB)升高的因素很多, 导致临床上出现所检测的CK-MB活性假性增高的现象, 甚至出现CK-MB活性高于或相当于总CK活性的情况, 针对此种现象, 作者做了如下实验, 报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年6～12月儿科重症病房患儿68例, 均排除心脏和肌肉损伤；同时从本院产科选取26例正常婴儿, 检测CK-MB, CK活性及比值均在正常范围内, 手工致其轻度溶血(Hb＜160 mg/L), 检测溶血后CK-MB, CK活性及比值。

1.2 仪器与试剂 选用迈瑞BS2000M全自动生化分析仪, CK(速率法)和CK-MB(免疫抑制法)测定选用原装配套试剂；CK-MB质量测定仪器为贝克曼库尔特ACCESS化学发光分析仪及配套原装试剂。

1.3 方法 实验前校正仪器, 保证测定项目在控。将所有标本先用干化学法分别测定CK-MB, CK活性, 对CK-MB/ CK比值＞30%的标本行CK-MB质量测定。

2 结果

68例患儿CK-MB活性升高的有36例, 其中黄疸患儿27例, 脑损伤患儿9例, 36例患儿中有4例CK-MB活性高于总CK活性；人工致轻度溶血组测定的CK-MB和CK活性较溶血前有轻度升高。对所有CK-MB活性升高的标本行CK-MB质量测定, 结果均在正常范围内。实验表明, CK-MB活性增高有时是一种假性增高, 不能严格作为婴幼儿心肌梗死的诊断标准。

3 讨论

肌酸激酶同工酶有三种, CK-BB(CK1)为脑型同工酶, 主要分布于脑、前列腺、肠和肺等组织；CK-MB(CK2)主要分布于心肌中；CK-MM(CK3)主要分布于骨骼肌和心肌。正常人血清中以CK-MM为主, 在琼脂糖凝胶电泳法测定中占94%～96%, CK-MB含量＜5%, CK-BB含量甚微［2］。目前, 肌酸激酶同工酶活性测定采用的是免疫抑制法, 其检测原理是在抗体CK-M单体的抗体存在下, 标本中的全部CK-MM活力和50%CK-MB活力被抑制, 而CK-MB和CK-BB中的B亚基活力则不受影响, 故将CK-B活力测定值乘以2即得CK-MB活力。因此, 凡是可使CK-BB升高的疾病均可影响CK-MB的测定, 使其假性增高。根据国内外相关报道, 其主要原因如下。

3.1 CK-BB干扰 CK-BB主要存在于脑内神经元和星形胶质细胞中对反映脑神经元和胶质细胞损伤具有较好的特异性。脑神经受损时CK-BB从脑细胞释放直接进入脑脊液或通过受损的血脑屏障进入外周血。婴幼儿血脑屏障发育不完善, 当新生儿发生窒息、缺氧、感染、酸中毒、饥饿、低血糖、早产或应用某些药物时, 可使血脑屏障开放或通透性增加,非结合胆红素得以进入脑组织而发生胆红素脑病, 抑制脑组织对氧的利用, 导致脑损伤。研究显示高胆红素血症脑病患儿、缺氧缺血性脑病患儿血清CK-BB水平均出现异常增高［3］。吕为萍等［4］也有相关报道, 当新生儿出现缺氧时会引起CK-BB升高, 从而导致测定的CK-MB假性增高。朱演葵等［5］研究显示, 在HIE、新生儿窒息患儿血清中CK-BB分别占总CK的(13.9±16.8)%、(2.6±3.1)%, CK-MB分别占总CK的(2.5±2.0)%、(8.2±7.5)% ；CK-MM分别占总CK的(91.4±14.1)%、(94.0±5.8)%, 可见当婴幼儿出现脑损伤时,脑型同工酶所占比例直线上升, 由于测定方法的不完善, 将CK-BB活性全部计入CK-MB, 导致CK-MB活性升高甚至大于总CK活性的情况。

3.2 标本溶血 根据上述实验可发现, 当标本发生溶血时也会使CK-MB活性升高, 而且作者工作中发现CK-MB活性升高程度和溶血程度成正比, 此结论和朱演葵等［5］相关报道一致, 因此, 当发现标本溶血时要及时与临床医生联系,要拒绝接收标本。

3.3 巨型CK干扰 沈毅等［6］曾报道, 巨CK的干扰亦可导致CK-MB的假阳性。巨CK分为巨CK1和巨CK2两种,巨CK1是CK-BB与IgA或IgG形成的复合物, 巨CK2即CK与线粒体形成的聚合物CK-Mt, 其活性不受CK-M单体抗体的抑制, 容易导致检测结果偏高。

3.4 CK-MB校准品和质控品 多数医院未使用CK-MB校准品和质控品, 进行仪器项目设置时采用试剂盒统一的定标因数, 而试剂盒说明书提供的只是理论因数, 不同仪器项目因数设置略有差异。另一个重要原因是CK-MB试剂盒没有校准品和质控品, 而市场上的校准品和质控品比较昂贵。

肌酸激酶及其同工酶活性测定可作为窒息后心肌损害的早期、灵敏、特异的重要诊断指标, 同时可作为反映新生儿窒息严重程度的指标, 用于疗效观察, 及时采取相应治疗以减少并发症及病死率［7］。但目前CK-MB的干化学测定方法还不完善, 其质量测定方法比较昂贵, 因此, 在临床中发现CK-MB升高且与临床不符时, 应当综合临床表现、心电图等检查分析是否存在心肌损害, 避免临床误诊。

［1］ 毕经丽, 李桂芹.CK与CK-MB结果不相符的原因分析.检验医学与临床, 2010, 2(7):258-259.

［2］ 王鸿利.实验诊断学.北京:人民卫生出版社, 2013:166-167.

［3］ Gao C, Wang J, Miao SX.Relationship between hybrid muscle creatine kinase isozyme and changes of bilirubin level in neonates with hypoxic-ischemic encephalopathy.Journal of Applied Clinical Pediatrics, 2005, 20(6):543-544.

［4］ 吕为萍, 李建友 , 王洁 , 等.新生儿缺氧缺血性脑病血清肌酸激酶及其同工酶动态变化的临床研究.中国实用儿科杂志, 2007, 22(1):28-30.

［5］ 朱演葵, 陈卫文.不同程度溶血标本对心肌酶测定值的影响.中国医学创新, 2013, 10(5):108-109.

［6］ 沈毅, 王海峰 , 亓艳 , 等.免疫抑制法测定CK-MB活性假性升高40例分析.中国误诊学杂志, 2010, 10(1):159-160.

［7］ 刘翼昌.新生儿窒息时监测心肌酶谱变化的临床意义.赣南医学院学报, 2010, 30(4):626.

2014-08-11］

455000 河南安阳中医院检验科