曹 鑫，姜胜华，林赠华，张亚平，黄红铭，王信峰，尹 红，丁佐凤，刘 红，钱 宇

（南通大学附属医院血液内科，江苏226001）

B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHLs)根据形态学和免疫表型分为数个亚型。套细胞淋巴瘤(MCL)是一种侵袭性B-NHL，占NHLs的3%～10%，主要为老年男性。大多数患者病情进展较快，因此及时和准确的诊断有利于患者及时得到合适的治疗。大多数套细胞淋巴瘤可根据 CD5+，FMC7+，CD10-和CD23+/-特征性的免疫表型 和t(11；14)(q13；q32)诊断。后者是套细胞淋巴瘤特征性的基因异常，并能导致CCND1的过表达。但是约10%的套细胞淋巴瘤缺乏CCND1表达和t(11;14)(q13;q32),却存在CCND2或CCND3的表达。此外，CCND1也可能在浆细胞疾病、毛细胞白血病(HCL)和DLBCL中表达，[1]这很容易导致误诊。因此，单纯依靠CyclinD1诊断套细胞淋巴瘤并非完全可靠。SOX11是一个在胚胎神经生长发育、组织重塑中起重要作用的转录因子，近年发现在套细胞淋巴瘤细胞核中高表达[2]。人类SOX11位于染色体2p25.3,是SOX基因C家族的一员。Chen等[3]发现套细胞淋巴瘤存在SOX11核表达，而其它B细胞淋巴瘤有不同程度的细胞胞浆表达，提示SOX11对套细胞淋巴瘤诊断有用。此外最近研究显示，SOX11在套细胞淋巴瘤核中强表达,但部分Burkitt淋巴瘤(BL)和幼稚淋巴细胞疾病也有表达。本文收集我院2008年1月—2013年12月103例B细胞性非霍奇金淋巴瘤患者，采用免疫组织化学法,探讨SOX11在各型B细胞性非霍奇金淋巴瘤B患者中表达差异。

1 资料与方法

1.1 一般资料 B细胞性非霍奇金淋巴瘤103例患者中，男76例，女27例，年龄36～82岁，平均68.3岁。诊断根据WHO标准为原发性B-NHL，其中弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma,DLBCL）45例、MCL 21例、滤泡性淋巴瘤（follicular lymphoma，FL）11例、伯基特淋巴瘤（Burkitt lymphoma,BL）9例、小淋巴细胞淋巴瘤（small lymphocytic lymphoma,SLL）13例、淋巴结边缘区淋巴瘤（nodal marginal zone lymphoma,N-MZL）4例。21例MCL诊断根据形态学、流式细胞术、CCND1过表达和t(11;14)(q13;q32)异常，免疫组化CCND1均阳性。肿瘤标本在化疗药物应用前取自淋巴结、骨髓、皮肤、消化道等，对照标本淋巴结反应性增生（reactive hyperplasia,RH）取自12个良性的淋巴组织。

1.2 免疫组织化学法 常规方法取材，3～4μm切片，常规脱蜡至水，柠檬酸修复液（pH6.0）热修复30min。SOX11兔抗人IgG多克隆抗体（美国spring bioscience公司），稀释度1∶300，室温过夜。通用型二抗（DAKO）室温孵育1h，DAB显色。根据细胞着色的数量、部位和显色强度，分为阴性（细胞质或核均不着色）、细胞质阳性、细胞核阳性3种情况。阳性对照采用人脑星形细胞瘤组织和已知SOX11阳性的MCL[1]，阴性对照用PBS代替一抗。

1.3 统计学处理 统计分析采用SPSS 17.0软件，率的组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 良性淋巴组织中SOX11的表达 12例良性淋巴组织中SOX11表达均阴性（图1）。

图1 SOX11在正常淋巴细胞中不表达（400×）

2.2 各型 B-NHLs中SOX11的表达 21例MCL中19例(90.5%)表达SOX11,表达强度具有异质性，从中等到强表达不等，MCL胞浆和核都不表达2例（图2）。45例DLBCL中细胞核表达15例（33.3%）（图3），阳性细胞主要为肿瘤细胞，反应性淋巴细胞不表达。11例FL中细胞核表达4例（36.4%），阳性细胞主要为滤泡内肿瘤细胞，滤泡间反应性淋巴细胞不表达（图 4）。9例 BL中细胞核表达2例（22.2%）（图5）。13例SLL中细胞核散在弱阳性1例（7.7%），多数小淋巴细胞不表达（图6）。4例NMZL中细胞核中度表达1例（25.0%），阳性细胞为肿瘤性边缘区细胞，残留的生发中心细胞不表达（图7）。 经统计分析，SOX11在MCL的表达率与其他类型淋巴瘤比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨 论

B-NHL是一种异质性疾病，其中MCL临床进展较快，因此准确的诊断对指导治疗很重要。CCND1的过表达是MCL的标志，常用来鉴别诊断。然而CCND1阴性的MCLs常被误诊，而SOX11可能是一个有助于鉴别诊断的潜在指标。近年来很多研究发现MCL特异性表达SOX11。Dictor等[4]发现SOX11阳性表达的172例中，既有B细胞也有T细胞淋巴瘤。此外也有报道核SOX11在大多B/T淋巴增殖性疾病和一半的儿童BL中存在强表达，但在一些HCL中只是弱表达。Chen等[3]研究SOX11与t(11;14)(q13;q32)和CCND1过表达的关系。发现在B细胞性肿瘤211例中，浆细胞骨髓瘤无表达30例，其中存在t(11;14)(q13;q32)12例。提示SOX11和t(11;14)(q13;q32)在非套细胞B细胞肿瘤中是独立的现象。但也有研究发现一小部分HCL中核SOX11强表达与CCND1的过表达相关。

图2 SOX11弥漫表达在MCL细胞核中，反应性淋巴细胞不表达。（EnVision法，200×）图3 SOX11表达在DLBCL中，反应性小淋巴细胞阴性。（EnVision法，200×）图4 SOX11主要表达在FL的生发中心细胞核上滤泡间区少量细胞表达，为滤泡间浸润的肿瘤细胞。（EnVision法，200×）图5 SOX11表达在BL细胞核上。（EnVision法，400×）图6 SLL中少量细胞核表达SOX11，阳性细胞比小淋巴细胞略大，为前淋巴细胞和副免疫母细胞。(EnVision法，400×）图7 SOX11表达在N-MZL的细胞质和细胞核中，中央阴性为残留的生发中心，周围透亮细胞为肿瘤细胞。(EnVision法，100×）

本研究观察了成熟B细胞非霍奇金淋巴瘤103例SOX11的表达情况，结果显示除MCL外，SOX11可广泛表达在多种类型的B细胞非霍奇金淋巴瘤，包括FL、DLBCL、N-MZL和SLL。结合文献分析，这种现象可能与免疫组化所使用的抗体有关。Mozos等[2]和Chen等[3]使用瑞典Atlas的SOX11多克隆抗体，在Ek等[5]和Dictor等[4]的研究中，所使用的多克隆兔抗人SOX11为自主研发。但Nordström等[6]应用SOX11单克隆抗体研究发现所有MCL细胞核均强表达 SOX11,而 B/T LBL、FL、CLL、HCL、扁桃体组织、非恶性的骨髓组织等其它淋巴组织均未表达SOX11，仅2/4例BL存在中等程度的核表达。和多克隆抗体研究结果不同，SOX11-C1单克隆抗体的研究结果显示，SOX11在MCL中接近100%强表达。因此SOX11-C1单克隆抗体的应用可能会提高免疫组化特异性和敏感性。此外，单克隆抗体可应用于流式细胞术，较IHC更方便迅速。本研究采用美国spring bioscience公司的SOX11兔抗人多抗，免疫组化中使用不同克隆的抗体往往是影响结果的重要因素之一。是否SOX11能在多种类型的淋巴瘤内表达，仍有待于更多研究证实。

本研究结果显示尽管除MCL外，其他类型的淋巴瘤也出现了SOX11的核表达，但MCL阳性率显著高于其他类型的淋巴瘤。因本研究中无CyclinD1阴性的MCL病例，未能观察SOX11是否可用于CyclinD1阴性MCL的辅助诊断。本组13例SLL中，出现散在细胞核阳性仅1例，提示SOX11对MCL和SLL的鉴别诊断有一定辅助价值。在王燕婴等[7]研究发现，部分MCL出现细胞质表达SOX11，与细胞核表达SOX11的病例比较，前者的临床表现更具侵袭性，生存期较短。

目前对淋巴造血肿瘤中SOX11的研究尚在初步阶段，对SOX11的表达情况、细胞定位，作用机制和在肿瘤发生中的作用等问题并未澄清，有待于更深入研究。

[1]Chang ST,Liao YL,Lu CL,et al.Plasmablastic cytomorphologic features in plasma cell neoplasms in immunocompetent patients are significantly associated with EBV［J］.Am J Clin Pathol,2007,128(2):339-344.

[2]Mozos A,Royo C,Hartmann E,et al.SOX11 expression is highly specific for mantle cell lymphoma and identifies the cyclin D1-negative subtype［J］.Haematologica,2009,94(11):1555-1562.

[3]Chen YH,Gao J,Fan G,et al.Nuclear expression of sox11 is highly associated with mantle cell lymphoma but is Independent of t(11;14)(q13;q32)in non-mantle cell B-cell neoplasms［J］.Mod Pathol,2010,23(1):105-112.

[4]Dictor M,Ek S,Sundberg M,et al.Strong lymphoid nuclear expression ofSOX11 transcription factordefineslymphoblastic neoplasms,mantle cell lymphoma and Burkitt’s lymphoma［J］.Haematologica,2009,94(11):1563-1568.

[5]Ek S,Dictor M,Jerkeman M,et al.Nuclear expression of the non B-cell lineage Sox11 transcription factor identifies mantle cell lymphoma［J］.Blood,2008,111(2):800-805.

[6]Nordström L,Andréasson U,Jerkeman M,et al.Expanded clinical and experimental use of SOX11-using a monoclonal antibody［J］.BMC Cancer，2012,12:269.

[7]王燕婴,于珍,易树华,等,SOX11基因在套细胞淋巴瘤患者中的表达及其临床意义［J］.中华血液学杂志,2012,33(7):556-560.