贺延新，刘素玲

(广东省深圳市平乐骨伤科医院，广东 深圳 518000)

普卢利沙星(NM441)是噻丁啶－喹啉羧酸衍生物(NM394)的脂溶性前体药物，口服易吸收并水解成NM394，NM394选择性分布于菌体内，抑制细菌DNA螺旋酶的活性，从而发挥广谱抗菌作用，但NM394口服吸收较差[1]。NM394作为NM441的合成母体及降解产物，因此有必要控制产品中NM394的量，以保证普卢利沙星产品的质量。本试验中采用反相高效液相色谱(RP－HPLC)流动相梯度洗脱法测定普卢利沙星中NM394含量及其他有关物质。

1 仪器与试药

日本岛津LC－2010AHT型高效液相色谱仪;FA2004型电子天平(上海精密科学仪器有限公司);CSB6L－1800型超声波清洗器(天津考德斯科技有限公司);AD－DI30(UV)型超纯水系统(上海讯辉环保科技有限公司)。普卢利沙星对照品(纯度为99．4%)、NM394对照品(天津市汉康医药生物技术有限公司，含量为99．6%);普卢利沙星片(批号为 090720，090721，090722，广州白云山制药股份有限公司)，规格为100 mg普卢利沙星相当于NM394 100 mg;乙腈、三乙胺为色谱纯，水为超纯水，磷酸二氢钠为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

色谱柱:Phenomenex C18柱(150 mm ×4．6 mm，5 μm);流动相:A为0．025 mol/L磷酸二氢钠溶液(用三乙胺调pH至6．0)，B为乙腈，用流动相A－B(80∶20)洗脱至NM394的峰完全检出约6 min，即换流动相A－B(60∶40)洗脱至普卢利沙星峰保留时间的 3 倍;流速:1．0 mL/min;检测波长:276 nm;进样量:20 μL。

2．2 溶液制备

取本品20片，研细，精密称取适量(约相当于普卢利沙星50 mg)，置100 mL容量瓶中，加流动相B 50 mL，超声处理5 min使溶解，加流动相A－B(60∶40)稀释至刻度，摇匀、过滤，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液1 mL，置100 mL容量瓶中，加流动相A－B(60∶40)稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取NM394对照品适量，精密称定，用流动相A－B(80∶20)溶解并稀释成每1 mL中约含2 μg的溶液，作为NM394对照品溶液。……