鞠瑞，陈晨，郭磊，李娟，叶菜英，张德昌



羧胺三唑抑制肿瘤细胞诱导的巨噬细胞中肿瘤坏死因子-α的释放

鞠瑞，陈晨，郭磊，李娟，叶菜英，张德昌

100005 北京，中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所药理学系

观察体外培养的肿瘤细胞对巨噬细胞炎症因子——肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的诱导作用；初步探索羧胺三唑（CAI）对肿瘤诱导的巨噬细胞中 TNF-α 释放的影响。

利用 transwell 装置，建立 Lewis 肺癌细胞（LLC）与 RAW264.7 巨噬细胞共培养体系，采用荧光定量 PCR 方法和 ELISA 方法分别分析 RAW264.7 中 TNF-α 的表达和释放；用 LLC 条件培养基（LCM）诱导 RAW264.7，同时给予 CAI 处理，采用 CCK-8 方法分析 LCM 和 CAI 对 RAW264.7 活力的影响，采用 ELISA 方法分析 CAI 对诱导后的 RAW264.7 中 TNF-α 释放的影响。

与 LLC 共培养 24 h 可显著增加RAW264.7 中 TNF-α 相对表达量[单独培养 vs 共培养，（1.00 ± 0.12）vs（2.23 ± 0.17），< 0.01]和释放[单独培养 vs 共培养，（65.21 ± 12.76）vs （143.92 ± 19.22）pg/ml，< 0.05]；LCM 和 CAI 在 1 h 和 4 h 对 RAW264.7 活力没有影响，CAI 可以显著抑制 LCM 对RAW264.7 中 TNF-α 释放的诱导（4 h，< 0.01）。

LLC 肿瘤微环境可以诱导 RAW264.7 中 TNF-α 的表达增加；CAI 对这种诱导的抑制使其在肿瘤环境中表现出一定的抗炎作用，可能是其抗肿瘤作用的机制之一。

肿瘤坏死因子 α； 巨噬细胞； 共培养； 羧胺三唑

巨噬细胞是一种易被周围环境所诱导的细胞，大致可以被分为 M1 表型（经典激活的巨噬细胞）和 M2 表型（替代激活的巨噬细胞）。在对肿瘤的影响方面，一般认为 M1 巨噬细胞能够分泌大量促炎介质，具有杀伤肿瘤细胞的功能；而 M2 巨噬细胞则参与组织重塑和创伤修复过程，分泌促炎介质减少，具有促进肿瘤发展的作用[1]。

肿瘤组织中浸润的巨噬细胞，即肿瘤相关巨噬细胞（TAM），其主要细胞因子的释放特征被认为与 M2 巨噬细胞相似。然而，TAM 不能被简单等同于 M2 巨噬细胞，它也有 M1 巨噬细胞的某些特征，也能通过长期释放低浓度的促炎介质在肿瘤微环境中引起“并不剧烈”的炎症反应[2-3]。……