高钺，刘舒云，黄靖香，郭维民，陈继凤，张莉，赵斌，彭江，汪爱媛，王玉，许文静，卢世璧，郭全义



人脱细胞软骨细胞外基质对异种软骨种子细胞的影响

高钺，刘舒云，黄靖香，郭维民，陈继凤，张莉，赵斌，彭江，汪爱媛，王玉，许文静，卢世璧，郭全义

100853 北京，中国人民解放军总医院骨科研究所

观察人脱细胞软骨细胞外基质（hACAM）对异种兔软骨种子细胞增殖和表型的影响。

将差速梯度离心法制作的人脱细胞软骨细胞外基质，配制成 0.5% 的浆料，分别铺于 6 孔细胞培养板和 96 孔细胞培养板，形成 1 mm 厚的薄膜，以此培养板为实验组。空白对照组培养板仅使用单纯培养液培养。在培养板上培养兔关节软骨细胞。通过 hochest33258 染色验证人软骨细胞外基质脱细胞完全与否；分别在第 5、15 天两个时间点，通过倒置显微镜、甲苯胺蓝染色观察两种培养方法的兔软骨细胞的生长形态、细胞表型和增殖情况，用 CCK-8 细胞增殖实验比较两种培养方法在第1、3、7、10 天的增殖情况。

通过 hochest33258 染色发现差速梯度离心的人软骨细胞外基质脱细胞完全。通过倒置显微镜观察第 5 和15 天的实验组细胞增殖情况优于空白对照组，甲苯胺蓝染色的结果也证明这个观点；CCK-8 细胞增殖试验显示第 7 天 hACAM 组在细胞增殖方面明显地优于单纯培养液的对照组（= 0.0298），hACAM 组的软骨细胞与空白组的软骨细胞在第 10 天的增殖情况相比没有统计学差异。

hACAM 免疫原性低，无细胞毒性，能够很好地促进异种软骨细胞的增殖。

细胞外基质； 软骨； 软骨细胞； 组织工程；……