徐永威

2013年1月，新西兰牛奶及奶制品被检测出含有少量的有毒物质双氰胺，新西兰政府已经下令禁售含有双氰胺的奶类产品。由于中国是新西兰奶制品的出口大国，所以这一敏感的食品安全问题又一次触动了全中国人民的心。沃特世（Waters？）公司基于全新的ACQUITY UPC2技术平台，推出快速而便捷的UPC2-MS检测方案。二氰二氨（俗称双氰胺），缩写为DICY或DCD，是氰胺的二聚体，也是胍的氰基衍生物。化学式C2H4N4，白色结晶粉末，可溶于水、醇、乙二醇和二甲基甲酰胺，几乎不溶于醚和苯。不可燃，干燥时稳定。

双氰胺极性非常大，传统C18色谱柱及HILIC色谱柱均难以保留，对于复杂的奶制品基质来说会与杂质共流出，影响分析目标化合物的定量和定性，这是一个分析难点。UPC2技术，采用超临界CO2和适量的助溶剂为流动相，以正相的分离模式，实现化合物的分离。因此，对于反相LC难以保留的化合物，UPC2能提供很好的保留，并通过简易的梯度优化，即可实现很好的定量分离。

实验方法

样品前处理方法

取1g奶粉加2mL水溶解，然后加乙腈定容至10mL，并沉淀蛋白，12000转高速离心10min；取上清液，经0.22μm滤膜过滤后直接上样分析。

仪器方法

UPC2方法：

仪器：ACQUITY UPC2系统；

流动相A：CO2；

流动相B：甲醇（2%水）；

色谱柱：ACQUITY UPC2 BEH 3.0x50mm 1.7μm；

流速：2.2mL/min；

柱温：50℃；

背压：2200psi；

进样体积：3μL；

梯度曲线：见表1。

MS参数：

毛细管电压：3.2kv；

脱溶剂气温度：450℃；

脱溶剂气流速：800L/hr；

碰撞气流速：0.2mL/min（参阅表2）。

实验结果

双氰胺标准曲线（配置1.0、2.0、10.0、50.0、100.0ppb浓度双氰胺加奶粉基质标准溶液，每个点重复进样3针，根据检测结果获得的标准曲线见图1）。

结论

双氰胺极性非常大，传统C18色谱柱及HILIC色谱柱均难以保留，采用沃特世公司全新推出的ACQUITY UPC2系统，BEH 3.0x50mm 1.7μm色谱柱，对双氰胺有很好的保留，并能快速排除基质的干扰，进行双氰胺的定量分析。采用上述方法进行双氰胺的分析，可大大简化前处理的流程，只需简易的蛋白沉淀法，即可满足定量检测的要求，对于实际的检测工作，能使工作事半功倍。endprint

2013年1月，新西兰牛奶及奶制品被检测出含有少量的有毒物质双氰胺，新西兰政府已经下令禁售含有双氰胺的奶类产品。由于中国是新西兰奶制品的出口大国，所以这一敏感的食品安全问题又一次触动了全中国人民的心。沃特世（Waters？）公司基于全新的ACQUITY UPC2技术平台，推出快速而便捷的UPC2-MS检测方案。二氰二氨（俗称双氰胺），缩写为DICY或DCD，是氰胺的二聚体，也是胍的氰基衍生物。化学式C2H4N4，白色结晶粉末，可溶于水、醇、乙二醇和二甲基甲酰胺，几乎不溶于醚和苯。不可燃，干燥时稳定。

双氰胺极性非常大，传统C18色谱柱及HILIC色谱柱均难以保留，对于复杂的奶制品基质来说会与杂质共流出，影响分析目标化合物的定量和定性，这是一个分析难点。UPC2技术，采用超临界CO2和适量的助溶剂为流动相，以正相的分离模式，实现化合物的分离。因此，对于反相LC难以保留的化合物，UPC2能提供很好的保留，并通过简易的梯度优化，即可实现很好的定量分离。

实验方法

样品前处理方法

取1g奶粉加2mL水溶解，然后加乙腈定容至10mL，并沉淀蛋白，12000转高速离心10min；取上清液，经0.22μm滤膜过滤后直接上样分析。

仪器方法

UPC2方法：

仪器：ACQUITY UPC2系统；

流动相A：CO2；

流动相B：甲醇（2%水）；

色谱柱：ACQUITY UPC2 BEH 3.0x50mm 1.7μm；

流速：2.2mL/min；

柱温：50℃；

背压：2200psi；

进样体积：3μL；

梯度曲线：见表1。

MS参数：

毛细管电压：3.2kv；

脱溶剂气温度：450℃；

脱溶剂气流速：800L/hr；

碰撞气流速：0.2mL/min（参阅表2）。

实验结果

双氰胺标准曲线（配置1.0、2.0、10.0、50.0、100.0ppb浓度双氰胺加奶粉基质标准溶液，每个点重复进样3针，根据检测结果获得的标准曲线见图1）。

结论

双氰胺极性非常大，传统C18色谱柱及HILIC色谱柱均难以保留，采用沃特世公司全新推出的ACQUITY UPC2系统，BEH 3.0x50mm 1.7μm色谱柱，对双氰胺有很好的保留，并能快速排除基质的干扰，进行双氰胺的定量分析。采用上述方法进行双氰胺的分析，可大大简化前处理的流程，只需简易的蛋白沉淀法，即可满足定量检测的要求，对于实际的检测工作，能使工作事半功倍。endprint

2013年1月，新西兰牛奶及奶制品被检测出含有少量的有毒物质双氰胺，新西兰政府已经下令禁售含有双氰胺的奶类产品。由于中国是新西兰奶制品的出口大国，所以这一敏感的食品安全问题又一次触动了全中国人民的心。沃特世（Waters？）公司基于全新的ACQUITY UPC2技术平台，推出快速而便捷的UPC2-MS检测方案。二氰二氨（俗称双氰胺），缩写为DICY或DCD，是氰胺的二聚体，也是胍的氰基衍生物。化学式C2H4N4，白色结晶粉末，可溶于水、醇、乙二醇和二甲基甲酰胺，几乎不溶于醚和苯。不可燃，干燥时稳定。

双氰胺极性非常大，传统C18色谱柱及HILIC色谱柱均难以保留，对于复杂的奶制品基质来说会与杂质共流出，影响分析目标化合物的定量和定性，这是一个分析难点。UPC2技术，采用超临界CO2和适量的助溶剂为流动相，以正相的分离模式，实现化合物的分离。因此，对于反相LC难以保留的化合物，UPC2能提供很好的保留，并通过简易的梯度优化，即可实现很好的定量分离。

实验方法

样品前处理方法

取1g奶粉加2mL水溶解，然后加乙腈定容至10mL，并沉淀蛋白，12000转高速离心10min；取上清液，经0.22μm滤膜过滤后直接上样分析。

仪器方法

UPC2方法：

仪器：ACQUITY UPC2系统；

流动相A：CO2；

流动相B：甲醇（2%水）；

色谱柱：ACQUITY UPC2 BEH 3.0x50mm 1.7μm；

流速：2.2mL/min；

柱温：50℃；

背压：2200psi；

进样体积：3μL；

梯度曲线：见表1。

MS参数：

毛细管电压：3.2kv；

脱溶剂气温度：450℃；

脱溶剂气流速：800L/hr；

碰撞气流速：0.2mL/min（参阅表2）。

实验结果

双氰胺标准曲线（配置1.0、2.0、10.0、50.0、100.0ppb浓度双氰胺加奶粉基质标准溶液，每个点重复进样3针，根据检测结果获得的标准曲线见图1）。

结论

双氰胺极性非常大，传统C18色谱柱及HILIC色谱柱均难以保留，采用沃特世公司全新推出的ACQUITY UPC2系统，BEH 3.0x50mm 1.7μm色谱柱，对双氰胺有很好的保留，并能快速排除基质的干扰，进行双氰胺的定量分析。采用上述方法进行双氰胺的分析，可大大简化前处理的流程，只需简易的蛋白沉淀法，即可满足定量检测的要求，对于实际的检测工作，能使工作事半功倍。endprint