TGF-β1受体抑制剂LY2109761对成纤维细胞中PPARγ表达的影响
2014-10-21朱美抒
作者简介:姓名:朱美抒性别:女出生年月:1979年4月职位:主治医生 【摘要】目的 利用转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)受体抑制剂LY2109761作用于成纤维细胞,观察其对细胞核内过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨其潜在的抗衰老作用。方法 体外培养人成纤维细胞,利用MTT法筛选适宜浓度的LY2109761作用于成纤维细胞,用Western-blot、RT-PCR检测对PPARγ表达的影响。结果 TGF-β受体抑制剂LY2109761能显著增加PPARγ的表达,并呈剂量依赖效应。与对照组相比,LY2109761处理组PPARγ的表达量明显增多(p<0.01);且LY2109761处理组的PPARγ基因的表达量显著增加(p<0.01)。结论 TGFβ1受体抑制剂LY2109761可诱导PPARγ的表达增多,具有一定潜在的抗衰老作用。
【关键词】 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 转化生长因子β 成纤维细胞
【中图分类号】R619 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)07-0121-02
过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisorne proliferator-activated receptorγ,PPARγ)系一类可以被过氧化物酶体增殖剂激活的核转录因子超家族,参与机体的多种病理生理功能的调控,如糖尿病、炎症反应、细胞周期等[1-4]。近年来研究发现,PPARγ随着年龄的增加,表达量减少[5]。PPARγ具有一定的潜在抗衰老的作用。而激活TGFβ1信号通路能引起成纤维细胞出现一系列衰老表型,而其下游机制作用因子尚不明确。本课题组前期研究证实TGF-β1和PPARγ存在负相关关系,由此我们提出TGF-β1-PPARγ调控轴的概念。本研究旨在观察TGFβ1受体抑制剂LY2109761对PPARγ表达的影响,近一步分析 TGFβ1对PPARγ的调控。
1材料与方法
1.1材料 成纤维细胞购于中科院典型培养物保藏委员会细胞库。胎牛血清和高糖DMEM培养基购自Gibco公司,LY2109761购自selleck公司。Trizol、Real-time PCR试剂盒、SYBR购于TAKARA公司,引物购美国Invitrogen公司。TGFβ1和PPARγ抗体均购自Santa Cruz公司,蛋白浓度检测试剂盒购于Bio-Rad公司,全细胞裂解试剂盒购于凯基公司。
1.2细胞……
