刘宪军

[摘要] 随着当代医学的发展，越来越多的疾病需要进行病理诊断，同时病理诊断也是尸体解剖、司法鉴定最具权威的手段，因此，病理诊断被冠以金色招牌，而组织制片的质量又是临床病理诊断和司法病理诊断的基础，临床病理医生及司法鉴定专家极其重视组织切片的质量，一组优秀的切片可以准确完整地反映疾病的病情、性质、预后并可为司法鉴定提供证据，因此质量好的病理切片是临床诊断及司法鉴定的基础。本研究通过总结分析常规病理制片中常易出现的问题，对实际工作的影响加以探讨，以期不断提高切片质量，从而保证准确、完整的临床病理诊断，为患者提供更好的服务。

[关键词] 病理技术；质量控制；常见问题；对策

[中图分类号] R446.8 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2014）08（a）-0148-03

The common problems and measures to control the quality of pathological section

LIU Xian-jun

Department of Pathology，Jilin Central Hospital in Jilin Province，Jilin 132001，China

[Abstract] With the development of modern medicine，more and more diseases need for pathological diagnosis，at the same time，pathological diagnosis is becoming the most authoritative method of for autopsy，forensic identification，so the pathological diagnosis was dubbed the golden signboard，the quality of tissue sectioning is the basis of clinical and forensic pathological diagnosis，clinicaldoctors and forensic experts attached great importance to the quality of tissue sections，a group of excellent slices can accurately reflect the disease condition，，properties，prognosis and provide evidence for forensic identification，therefore the good quality pathological sections is basis of clinical diagnosis and forensic identification.In this study，through the analysis of common problems in routine pathological section，discusses the influence to the practical work in order to constantly improve the chip quality，thus ensuring the clinical accurate and complete pathological diagnosis of complete to provide the better service for patients.

[Key words] Pathological technique；Quality control；Common problems；Countermeasures

石蜡制片技术是临床病理技术的基础，病理实验员是这个工作的操作者。石蜡制片技术包括标本受理、组织固定、医生取材、组织的脱水、透明、浸蜡包埋处理及切片、染色等一系列过程，每个步骤都有其特殊的意义，顺序唯一，试剂唯一，技术人员必须熟练掌握其每一步骤 ，确保最终病理切片[1-2]的质量，使病理医生签发出准确的病情诊断。现将活体组织石蜡制片中的常见问题及应对方法总结如下。

1 标本接收

标本接收是病理室石蜡制片的第一步，在实际工作中常被忽视，很容易出现一些差错，如送检标本件数与申请单上所填写的不符；标本名称部位与实际不符[3]；接收的标本未及时固定；标本袋上的姓名与申请单上不符等。技术员要及时、准确地为病理申请单编号，同时将此编号粘贴在对应患者的标本袋上。不能将粘贴标签污损，模糊不清。要做好接收标本，首先需要提高技术人员的责任心，从主观思想上认识到接收标本的重要性；科室应建立完善的工作制度，由专职技术员负责接收标本，认真核查登记。初步掌握该患者的基本信息及临床资料，为下一步取材作准备。

2 取材环节

取材环节需要技术员与诊断医生高度配合。技术员要准确无误地向取材医生提供该患者的姓名、性别、年龄、标本名称及病史、检查项目、手术所见、传染病史等，取材过程中技术员要准确地录入取材记录，同时书写与病理申请单号码相同的包埋盒递送给取材医生。每一个标本或全部标本取完材，必须核对好某个标本和全部标本的材块数。对于小的组织或特殊标本，技术员应亲自参与取材，以备包埋及切片时引起重视。

3 取材后的组织处理

根据实际工作中遇到的问题加以阐述，现在病理科已经应用自动脱水机，在夜间进行自动脱水时组织提篮有时卡在外面，未进行组织脱水，第2天发现组织已干枯，此时的处理方法是将干枯的组织浸入40℃的生理盐水中浸泡30 min[4]，使干枯的组织尽量恢复到原状态，目的是软化组织，使细内部结构变化很小，然后进行AF液的处理30 min，经两次95%乙醇，两次无水乙醇各60 min，然后进入二甲苯透明 45 min，最后进行浸蜡处理，时间2 h以上，这样可挽救处理过程中的失误。再者因脱水机的故障直接透明了，此时应将组织提篮迅速移除，使用无水乙醇加温45℃换洗两次，再用蒸馏水换洗两次，校对好脱水机后，重新从AF液开始组织处理。在实际工作中还发生过组织直接浸蜡了，此时应将组织框及时取出，反复水浴加热70℃ 30 min 3次，倒掉水分，再用无水乙醇洗涤两次，然后水浴加热45℃二甲苯容器30 min，再用无水乙醇洗涤两次，再进行组织脱水处理。endprint

4 包埋

包埋环节处理得当，可以为切片做好帮助，一些难处理的标本，如宫颈锥切组织可以与切片刀锋方向小角度顺长包埋，淋巴结每个包埋盒以3枚最佳[5]，各种镜检的小组织要聚集紧凑，而且在同一包埋面上要利于切面完整，连续切片。所有管腔组织、囊壁组织均应立式包埋，镜下才能看到上皮组织，对于前列腺电切组织应该整齐排列包埋，横向对齐，每盒4条为宜；对于乳腺、甲状腺、肾活检、淋巴结等各种穿刺活检组织每条长度以0.5 cm为宜，过长组织应折返包埋，每盒3条，确保于同一切面且完整，最大限度地切出病变。小组织的包埋是包埋环节的重点，容易丢失，难以确认包埋面，可以在取材时点上低浓度的伊红或苏木精染液，借助放大镜使用电热镊子准确轻柔地夹持组织包埋。不宜使用凉的普通镊子夹持组织，避免将小组织因石蜡凝固带走，造成技术事故。

5 切片

切片是病理制片较难的一步，即使从事技术工作十数年，也会出现一些问题。

5.1 常规石蜡切片

常规石蜡切片厚度以2 μm为宜，但是有一些特殊组织如凝血组织，胶质丰富的甲状腺组织、钙化组织、骨组织等切片厚度以1 μm为好，且烤片时应使切片紧贴在烤片机面上15 min方可。切片时为了防止崩飞组织，刀头、刀片、蜡块均应夹紧，角度一般以10°为宜，动作均匀，轻柔，削蜡块深浅适中，以暴露最大组织切面即可[6]，连续切片。所用的载玻片需洁净，防止脱片，展片水面洁净防止混入，温度以42～43℃为宜，展脂肪组织切片温度40℃即可，组织应捞在载玻片磨砂面一侧，利于粘贴不干胶时同时封住铅笔的号码。烤片的温度略高过石蜡熔点，平放在烤片机面上2 min即可。如果未直接烤片，则烤片机应调整到80℃ 15 min。

5.2 切片

切片过程中时有切片不完整，主要是包埋时组织没在同一平面，组织块固定不牢，刀片未夹紧，注意事项及处理方法已经在前面探讨过。

5.3 切片厚薄不均，难以连续切片

切片厚薄不均，难以连续切片的主要原因是组织处理过程中的问题，未及时更换刀片。如果组织有限，处理方法是重新浸蜡2 h，及时更换刀片，能够取得较理想的效果。实际工作中总结提示，95%乙醇中脱水效果更佳，所以此方法也是解决制片过程中组织处理不好的手段，对骨组织、甲状腺钙化组织、骨髓活检组织需要脱钙处理，脱钙液用8%～10%的稀硝酸处理效果不错[7]，30 min为好，以取材刀片能切下但不能成泥样为准，否则组织成分都被破坏，无法制片了。

5.4 手工染色

现在有的病理科使用了全自动染色机，但是手工染色还是每一个病理技术员必须掌握的。我科室在实际工作中使用了如下方法，组织切片烤片后进入二甲苯脱蜡45 min后，经过无水乙醇，95%的乙醇后直接进入85～90℃的热水水洗，吹去漂浮的石蜡，放入苏木精染液中染色，再用同样的热水洗涤，也能达到返兰的目的，效果也很好。切片染色的成功主要是前期组织处理好的情况下，脱蜡要彻底，之后酒精洗涤时要保证酒精的纯度，水洗后载玻片均匀，无水流，染液浓度适宜，染色时间因染液的浓度而掌握，染完色水洗后保证梯度酒精的浓度，最后进入不同的容器二甲苯透明5～7 min即可。

6 封片

封片环节看似简单，但要注意以下事项，手工封片应采用湿封法，可以使中性树胶顺畅展开，同时可避免气泡的产生[8]，盖玻片应从载玻片的下沿行排赶法驱使中性树胶均匀向上移动，可使树胶分布均匀。

总之，随着科技的发展，先进的技术为病理诊断技术的进一步发展提供了强大的支持，为临床病理诊断疾病起到了不可替代的作用，病理技术人员在实际工作中更应该注重病理技术质量监控，不断地总结经验，改进制片工作的程序，消除隐患，不断提高工作效率，从而制作出合格的病理切片。

[参考文献]

[1] 陈元栋，严晓昱，陈同钰，等.影响病理技术质量的若干因素及对策[A].2006 全国病理学技术进展和应用研讨会[C].张家界，2006：107-109.

[2] 龙绪华.对提高病理技术质量的几点建议[J].求医问药·学术版，2012，10（3）：267.

[3] 马恒辉，周晓军.病理技术质量控制常见问题与对策[J].临床与实验病理学杂志，2011，27（5）：533-536.

[4] 马恒辉，周晓军.病理技术质量控制常见问题与对策[A].中华医学会病理学分会2011年全国病理技术新进展研讨会论文集[C].南宁，2011：294-298.

[4] 闵静.常规病理制片的质量控制及体会[J].河北联合大学学报·医学版，2012，14（1）：47.

[5] 刘颖.常见病理技术差错原因分析及防范措施[J].当代医学，2009，15（12）：71-72.

[6] 马恒辉，周晓军.组织切片常见问题与对策[J].临床与实验病理学杂志，2009，25（2）：211-214

[7] 谢寿城.病理技术质量控制的探讨[J].中国现代药物应用，2010，4（7）：23-24.

[8] 吴志川.病理技术质量控制常见问题与对策[J].大家健康（中旬版），2012，6 （10）：102-104.

（收稿日期：2014-05-26 本文编辑：许俊琴）endprint