罗格列酮逆转Burkitt淋巴瘤raji细胞对紫杉醇耐药的作用及机制
2014-09-21朱红霞王保芳牛保华
朱红霞 王保芳 牛保华
Burkitt淋巴瘤是一种比较少见的淋巴造血组织肿瘤,在欧美占儿童淋巴瘤的30%~50%,而散发型Burkitt淋巴瘤在全世界各地均有发生[1]。在Burkitt淋巴瘤的治疗方面,尽管高强度,化疗方案的改进使Burkitt淋巴瘤治疗有了很大的提高,新的化疗药物和治疗方案仍有待发现。最近研究认为噻唑烷二酮类(thiazolidinedione,TZD)化合物为过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)配体,可通过激活PPAR-γ发挥诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤增殖和血管生成等作用[2],但尚未见其对人Burkitt淋巴瘤细胞系作用的报道。本研究旨在研究罗格列酮(Rosiglitazone,RGZ)对人Burkitt淋巴瘤raji紫杉醇耐药细胞株增殖和凋亡的影响,并探讨其逆转Burkitt淋巴瘤耐药的作用及机制,为其临床应用提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料 人Burkitt淋巴瘤raji细胞株购自南京凯基生物有限公司。RPMI 1640培养基购自杭州吉诺生物医药技术有限公司。小牛血清购自杭州四季青公司。罗格列酮(Rosiglitazone,RGZ)购自葛兰素史克公司。UA和碘化丙啶(propidium iodide,PI)染料和二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)试剂购自美国Sigma公司;β-actin,P-gp和MRP抗体均购自美国Santa Cruz 。辣根过氧化酶标记物山羊抗小鼠IgG(二抗)和碱性磷酸酶显色试剂盒购于北京中山生物技术有限公司。RGZ溶于RPMI 1640培养基制成100mmol/L的母液,过滤除菌后-20℃备用。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养和耐药细胞株的建立 raji细胞接种于含10%胎牛血清体积分数的RPMI 1640培养液(pH值7.2~7.4,含100U/mL青霉素和100U/mL链霉素)。于37℃、5%CO2、饱和湿度的恒温培养箱中传代培养,取对数生长期细胞用于实验。
采用逐步间歇药物浓度递增法建立紫杉醇耐药细胞株,历时172d,药物浓度从5.0nmol/L 开始逐渐加量,最终获得了一株能在25nmol/L的TAX含药培养液稳定生长的raji细胞耐药细胞株,命名为raji/TAX25。……
