山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌双重PCR 检测方法的建立
2014-09-21亢宁宁刀筱芳冯旭飞马晓楠杨发龙
亢宁宁,刀筱芳,冯旭飞,虎 啸,马晓楠,杨发龙
(西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041)
呼吸道疾病是影响山羊养殖业的重要疾病之一,主要引起山羊群体性发病、死亡或生产性能下降,给山羊养殖户造成了严重的经济损失。其中,山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)可引起山羊传染性胸膜肺炎,该病以严重的纤维素性胸膜肺炎为主要特性,是一种高度传染性、致死性的山羊呼吸道传染病,发病率可达到100%[1-2],该病在我国青海、甘肃等地发生并广泛流行[3-5],近年报道其可引起藏羚羊的胸膜肺炎[6]。多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是存在于羊上呼吸道的条件致病菌,在长途运输、营养不良、过度拥挤以及其他支原体或病毒感染等条件作用下,迅速增殖而引起山羊肺炎的发生[7]。山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌可混合感染亦可继发感染[8-9],给疾病的诊断和治疗造成困难。
传统的细菌分离培养及鉴定费时费力,此外,支原体在体外培养较为困难,且生长周期相对较长,一般需要1周~2周,因此不常作为常规手段用于病原的鉴定、疾病的诊断及流行病学调查。而PCR技术以其快速、灵敏等优点,已逐渐成为病原鉴定和疾病诊断的常规方法。针对山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌,Woubit S[10]分别建立了特异性PCR方法,并已广泛用于这两种病原的检测及其感染的诊断[6,11]。由于山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌均可引起山羊肺炎,且可以混合感染,因此有必要建立一种能够同时检测该两种病原的双重PCR方法,从而为生产中快速、准确检测这两种病原及其感染的鉴别诊断和流行病学调查提供一种新手段。……
