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缺氧卵巢癌细胞分化过程中LSD1表达的改变

2014-09-12薛端阳汪晓莺魏炜炜

中国老年学杂志 2014年6期

薛端阳 张 洁 汪晓莺 马 艳 魏炜炜

(南通大学医学院,江苏 南通 226019)

血管拟态(VM)是指具有高度侵袭性的肿瘤细胞可以通过自身的伸展、变形形成血管样细胞,这种肿瘤的特点就是具有高度可塑性。VM已在多种类型的肿瘤中被发现,而往往VM的发生都与不良的预后相关,可能受相关修饰酶的表遗传调控。LSD1是一种重要的表遗传调控酶类,具有组蛋白H3第4位赖氨酸二位去甲基化酶活性〔H3K4(2m)〕和组蛋白H3第9位赖氨酸去甲基化(H3K9)酶活性,从结构上来看,LSD1的C端2/3区域与FAD依赖性胺氧化酶有高度的序列同源性,其N端含一个SWIRM结构域,该结构域是蛋白-蛋白相互作用基序。SWIRM结构域使得LSD1及其家族与传统的胺氧化酶有所不同,在生物发育中扮演着重要的角色。目前LSD1在肿瘤发生中的研究主要集中在对细胞增殖生长的影响,尚未见到LSD1对于相关肿瘤细胞形成VM能力的报道。本文初步探讨LSD1分子在卵巢癌侵袭转移上的作用。

1 材料与方法

1.1试剂及主要仪器 RPMI-1640 细胞培养基、胰蛋白酶(Trypsin) 、胎牛血清(FBS) 购自北京鼎国生物有限公司;MTT、二甲基亚砜(DMSO) 为天津化学试剂二厂产品;余为国产分析醇。二氧化碳培养箱为日本SANYO 公司产品。An Thos TH2酶标仪为Austria公司生产。

1.2细胞培养和MTT 缺氧和对照组的人卵巢癌细胞株SKOV3 在RPMI-1640培养基中培养,并置于37℃、5% CO2饱和湿度的培养箱中培养。每48小时换液1次,0.25% 的胰蛋白酶消化传代,细胞单层贴壁生长,选择对数生长期细胞实验。将SKOV3细胞株分为对照组、缺氧组。对照组为未处理的SKOV3细胞株。采用MTT法测定72 h的细胞增殖的抑制效率,用0.25%的胰蛋白酶消化对数生长期的细胞株SKOV3,制成4×104/ml细胞悬液,以每孔200 μl接种于两个96孔板。……

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