谭玉琴 张红芳 樊有赋 彭 琴 詹寿发 陈 晔

(九江学院药学与生命科学学院 江西九江 332000)

道地药材单叶蔓荆内生真菌生态分布*

谭玉琴 张红芳 樊有赋 彭 琴 詹寿发 陈 晔

(九江学院药学与生命科学学院 江西九江 332000)

文章研究不同产地单叶蔓荆内生真菌生态分布，结果显示，从不同产地单叶蔓荆植株中分离获得内生真菌257株，分别属于4纲5目6科26属。研究发现不同产地单叶蔓荆内生真菌的种类与分布均存在差异，以江西都昌多宝产单叶蔓荆内生真菌的生物多样性最为丰富，共67株，而广东汕头产单叶蔓荆植株中分离获得内生真菌最少；不同地理条件和生长环境的单叶蔓荆内生真菌种类和分布存在差异，从湖滨沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌菌株数最多，湖中沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌菌株最少。该研究为揭示单叶蔓荆内生真菌对其药用品质的形成，探讨内生真菌与单叶蔓荆道地药材相关性提供依据。

产地，单叶蔓荆，内生真菌，生态分布

单叶蔓荆(Vitex trifolia )为马鞭草科牡荆属多年生落叶藤本灌木植物，自然分布于江西、山东、浙江、福建、广东等沙滩地，具有很强的抗逆能力。单叶蔓荆为传统中药，具有疏风散热，镇静止痛，行气散瘀，清利头目等功效。单叶蔓荆作为江西地道药材[1,2]，有关单叶蔓荆道地性研究主要重于外部生态环境对其药材道地性的影响，缺乏对单叶蔓荆内环境的研究，尤其是植物内生真菌对其药材优良品质的形成研究鲜见报道。笔者以单叶蔓荆为材料，研究不同产地单叶蔓荆内生真菌分布和生态分布规律，以期为揭示单叶蔓荆内生真菌对其药用品质的形成，探讨内生真菌与单叶蔓荆道地药材相关性，将有助于阐明单叶蔓荆道地性的形成机制。

1 材料与方法

1.1 试验材料

201 1 年9月-2012年10月于江西都昌多宝、抚州大港、星子蓼花、吴城吉山、新建厚田，广东汕头、山东威海等地各采集60株单叶蔓荆健康植株。保存于无菌自封袋中带回实验室。供试培养基为PDA固(液体)培养基。

1.2 试验方法

1.2.1 内生真菌的分离纯化、鉴定 按常规组织分离方法，进行内生真菌的分离纯化、鉴定[3-6]。

1.2.2 真菌的多样性分析 真菌种群的多样性水平采用Shannon-wiener指数(H)、Pielou均匀度指数(J)和Margalef丰富度指数(R)进行分析[7]。

H=-∑[ni/NLn(ni/N)]；J=H/InS；R=(S-1)/lnN

其中ni为第i个种的个体数目，N为群落中所有种的总个体数，S为每个样点的物种种数。

2 结果与分析

2.1 不同产地单叶蔓荆内生真菌分布

通过经典组织分离法，从单叶蔓荆1500个组织中分离获得内生真菌257株，分别属于4纲5目6科26属。7个产地的单叶蔓荆植株中，以江西都昌多宝产单叶蔓荆内生真菌的生物多样性最为丰富，共67株，星子蓼花位居第二，共55株，抚州大港居第三，共47株，不同产地单叶蔓荆内生真菌的种类与分布均存在差异，详见表1。

表1 不同产地单叶蔓荆内生真菌分布

由表1可知，7种不同产地共有属青霉属、葡萄孢属、丛梗孢属、链格孢属、拟青霉属，但分离菌株数不同，曲霉属和球壳孢属为江西星子蓼花、都昌多宝、吴城吉山、新建厚田、抚州大港和广东汕头等6种产地共有属。拟青霉属为江西星子蓼花、都昌多宝、吴城吉山、新建厚田、抚州大港和山东威海等产地共有属。单端孢属在江西都昌多宝、星子蓼花、抚州大港、新建厚田、广东汕头和山东威海产地分离获得。盾壳霉属和根霉属在江西都昌多宝、星子蓼花、抚州大港、新建厚田、吴城吉山产地分得。毛霉属、拟茎点霉属和白丝菌丝无孢子在都昌多宝、星子蓼花、抚州大港、新建厚田产地分离获得。头孢属、痂圆孢属明枝霉属和褐色菌丝无孢子类只在都昌多宝、星子蓼花两产地分离获得。黑团孢属在新建厚田、山东威海两产地分离获得。胶帚霉属、盘二孢属、色串孢属和毛壳属等分别只在都昌多宝、新建厚田、广东汕头，吴城吉山等产地分离获得。说明某些菌株表现出一定的地域专一性。

2.2 单叶蔓荆不同生境内生真菌分布

笔者在采样时发现单叶蔓荆的生长环境有4种类型，即湖滨沙滩荒洲、河岸沙滩荒洲，、湖中沙滩荒洲和海边沙滩荒洲。江西星子蓼花和都昌多宝产单叶蔓荆属第一种类型，江西新建厚田和抚州大港产单叶蔓荆属第二种类型，江西吴城吉山产单叶蔓荆属第三种类型，广东汕头和山东威海产单叶蔓荆属第四种类型。从研究结果可知，不同地理条件和生长环境的单叶蔓荆内生真菌种类和分布存在差异，从湖滨沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌菌株数最多，共计122株，占总株数的47.47%。可能是单叶蔓荆主要生长分布在沿鄱阳湖滨地区，尤以星子县和都昌县产量大、历史久、质量优。故从两地产的单叶蔓荆分得内生真菌最多。其次为河岸沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌菌株数83株，占总数的32.30%。再次是海边沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌27株，占总数的10.51%。从湖中沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌25株，菌株最少，占总数的9.73%。可见单叶蔓荆内生真菌与其地理条件和生长环境密切相关。

2.3 不同产地单叶蔓荆内生真菌多样性分析

由表2可见，不同地区间的单叶蔓荆内生真菌种群的多样性水平存在差异，从7个采样地点分离获得内生真菌的Shannon-wiene多样性指数(H)、丰富度指数(R)和Pielou均匀度指数(J)来看，它们从高到低的顺序均为，都昌多宝>星子蓼花>抚州大港>新建厚田>吴城吉山>山东威海>广东汕头，都昌多宝产的单叶蔓荆内生真菌多样性指数(H)、丰富度指数(R)和Pielou均匀度指数(J)均最高，分别为1.1397、11.894和0.2711，而广东汕头Shannon-wiene多样性指数(H)、丰富度指数(R)和Pielou均匀度指数(J)最低，真菌种类最少。

表2 不同产地单叶蔓荆内生真菌多样性指数分析

3 讨论

笔者对不同产地单叶蔓荆中内生真菌的种类和分布进行了比较，发现不同地区间的单叶蔓荆内生真菌种群的多样性水平存在差异，其中以江西都昌产单叶蔓荆内生真菌的种类最丰富。不同地理条件和生长环境的单叶蔓荆内生真菌种类和分布存在差异，从湖滨沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌菌株数最多，湖中沙滩荒洲产单叶蔓荆分得内生真菌菌株最少。因为湖中沙滩荒洲与外界形成自然地理隔离，物种迁入率较低，土壤贫瘠，光照时间较长等，导致根际真菌种类稀少主要因素。而湖滨沙滩荒洲土壤较肥沃、水分充足、林中其它生物物种丰富，为真菌生长提供有利环境，进一步说明环境影响内生真菌的种类和数量。

[1]梁芳，周国珍，曹岚．我国单叶蔓荆药用植物资源调查[J]．安徽农业科学，2011，39(35)：21638.

[2]田华，杜婷，黄开合，等．蔓荆子的药理作用研究进展[J]．中国医药导报，2013，10(9)：29.

[3]何佳，刘笑洁，赵启美，等．植物内生真菌分离方法的研究[J].食品科学，2009，30(15)：108.

[4]Berg G，Smalla K．Plant species and soil type cooperatively shape the structure and function of microbial communities in the rhizospher[J]．FEMS Microbiology Ecology，2009，68 (1)：1.

[5]魏景超．真菌鉴定手册[M]．上海：上海科学技术出版社，1979.34.

[6]詹寿发，张红芳，彭琴，等．单叶蔓荆内生真菌多样性研究[J]．广东农业科学，2012，(20)：18.

(责任编辑胡安娜)

Ecological Distribution of Endophyty Fungi Isolated from Vitex trifolia

TAN Yuqin，ZHANG Hongfang，FAN Youfu，

PENG Qin，ZHAN Shoufa，CHEN Ye

(College of Pharmacewtical and Life Sciences， JiuJiang University， Jiujiang,Jiangxi 332000， China)

The study was about ecological distribution of endophyty fungi isolated from vitex trifolia.The results showed that 257 strains of endophytic fungi were isolated from vitex trifolia in different regions， belonging to 26 genera and 6 famihelies， 5 orders and 4 classes. The study found that the species and distribution of endophytic fungi of vitex trifolia in different regions are various. Jiangxi Duchang had the most abundant biodiversity of endophytic fungi of vitex trifolia where there was a total of 67 strains， while endophytic fungi of vitextrifolia in Guangdong Shantou were isolated by the least. The strains and distributions of endophytic fungi of vitex trifolia from different geographical conditions and the growth environment varied a lot. The maximum number of endophytic fungi strains was from a lakeside beach desert， and the least was from the beach in lake. The study was to reveal medicinal quality formation of the endophytic fungi of vitex trifolia and provided the basis of the correlation between endophytic fungi and genuine medicinal materials.

place of production, vitex trifolia, endophytic fungi, ecological distribution

江西省自然科学基金项目(编号2010GZN0130)的成果之一。

谭玉琴(1965-)，女，学士，副教授，主要从事真菌资源研究。

Q 949.32

A

1674-9545(2014)04-0057-(00)