方 芳 邹来勇 汤群珍

(江西省抚州市妇幼保健医院药械科，江西 抚州 344000)

牛膝多糖对兔膝关节骨性关节炎修复的影响※

方 芳 邹来勇1汤群珍1

(江西省抚州市妇幼保健医院药械科，江西 抚州 344000)

目的观察牛膝多糖对兔膝关节骨性关节炎修复的影响。方法将48只新西兰大白兔随机分为2组，各24只。采用改良Hulth模型建造兔膝关节骨性关节炎模型。治疗组予牛膝多糖2 g/kg灌胃治疗，对照组予0.9%氯化钠注射液2 mL/kg灌胃对照。每日1次，连续灌胃3个月。观察比较2组治疗前后膝关节活动度及数字化X线摄影(DR)影像学分级。结果对照组治疗前后膝关节活动度比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组治疗后膝关节活动度与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)，且与对照组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05)，膝关节活动度明显增加；2组治疗前DR影像学分级比较差异无统计学意义(P>0.05)，2组治疗后DR影像学分级比较差异有统计学意义(u=2.33，P<0.05)，治疗组能够明显修复膝关节炎性改变。结论牛膝多糖治疗膝关节骨性关节炎能够改善周围软组织肿胀情况，减少关节间隙的变窄，缩小关节面的变化及减轻骨赘情况的发生，增加膝关节屈伸最大角度，改善膝关节活动度，从而有利于骨性关节炎的修复。

骨关节炎，膝；疾病模型，动物；兔

骨性关节炎是中老年人群常见的慢性进行性关节疾患，其诊断及治疗方法尚缺乏明确的结论，主要依靠其影像学表现做出诊断及评价[1]。牛膝多糖是从中药牛膝中分离提纯出的一种中药活性成分，具有提高巨噬细胞吞噬功能、增强自然杀伤细胞活性、提高免疫力、抗炎、抗肿瘤、抗凝血等作用[2]。本实验通过分析膝骨关节炎兔模型的数字化X线摄影(DR)影像学检查结果及膝关节活动度等指标，探讨牛膝多糖对膝骨关节炎修复的影响，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 SPF级健康6个月龄新西兰大白兔48只，雌雄各半，体质量1.8～2.5 kg，由南昌大学医学院动物科学部提供，动物合格证号：江西医动证字第02146-02号。

1.1.2 药物 牛膝由江西中医药高等专科学校附属医院中药房提供，牛膝多糖的提取工艺由江西中医药高等专科学校附属药厂完成。牛膝多糖经乙醇及蒸馏水提取后，经透析脱盐，减压浓缩，冷冻干燥，得白色冻干粉牛膝多糖纯化物。

1.2 实验方法

1.2.1 造模及分组 将48只大白兔随机分为对照组(24只)和治疗组(24只)。根据相关文献采用改良Hulth模型造模[4]：采用3%戊巴比妥钠对新西兰大白兔耳缘静脉注射麻醉后，动物仰卧固定于手术台上，左膝关节局部脱毛，备皮，无菌消毒，于关节内侧处行长约4 cm纵切口，切断家兔内侧副韧带，摘除内侧半月板，切断前交叉韧带，保留后交叉韧带，勿损伤关节软骨面，彻底止血，冲洗关节腔，抽屉试验阳性后，逐层缝合，包扎伤处，不予固定。术后连续3 d肌肉注射青霉素40万U，预防感染。根据临床上超疲劳活动容易提前出现骨关节炎的发病特点，术后1周每日强迫模型兔活动30 min，3个月后可获得稳定的膝关节骨性关节炎模型。

1.2.2 给药方法 从造模成功后第1 d开始进行对比实验，治疗组予牛膝多糖2 g/kg灌胃治疗，对照组予0.9%氯化钠注射液2 mL/kg灌胃对照。每日1次，连续灌胃治疗3个月。日常观察大白兔全身总体状况，定期测量体质量，并做相关记录。动物饲养安排在清洁级兔类实验室，温度(25.0±2.0)℃，每组在同一笼内自由活动、进食及饮水。

1.3 观察指标及方法 观察比较2组治疗前后膝关节活动度及DR影像学分级。采用量角器测量膝关节屈伸最大角度，每个膝关节测量3次，取其平均值得膝关节活动度。麻醉后行DR影像学检查周围软组织、关节间隙、关节面的变化及骨赘情况，并进行分级判断。X线分级参照Kellgren-Lawrence的分级标准制订：Ⅰ级：轻微骨赘，关节间隙可疑变窄；Ⅱ级，明显的骨赘，关节间隙可疑变窄；Ⅲ级：中等量骨赘，关节间隙中度变窄，软骨下骨硬化；Ⅳ级：大量骨赘，关节间隙明显变窄，严重软骨下骨硬化及明显畸形[3]。

2 结 果

2.1 2组治疗前后膝关节活动度比较 见表1。

由表1可见，对照组治疗前后膝关节活动度比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组治疗后膝关节活动度与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)，且与对照组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05)，膝关节活动度明显增加。

表1 2组治疗前后膝关节活动度比较 ±s

与本组治疗前比较，*P<0.05；与对照组治疗后比较，△P<0.05

2.2 2组治疗前后DR影像学分级比较 见表2。

表2 2组治疗前后DR影像学分级比较 只

经Ridit分析，2组治疗前DR影像学分级比较差异无统计学意义(P>0.05)，2组治疗后DR影像学分级比较差异有统计学意义(u=2.33，P<0.O5)，治疗组能够明显修复膝关节炎性改变。

3 讨 论

骨性关节炎的概念最早于1890年由Garrod提出，1909年Nichols和Richardson研究后认为骨性关节炎的病理特征为非炎症性病变，骨性关节炎主要病理变化是关节软骨的损伤，关节软骨损伤缺失，胶原纤维变性，导致骨质暴露，关节面之间的摩擦增加，软骨面逐渐粗糙、软化、碎裂，关节边缘代偿性增生，然后出现反应性的骨质增生，形成骨赘，当膝关节原有的力学平衡被破坏，随着关节的不断活动，必然又会损伤关节软骨，最终导致关节间隙的改变，故称之为退行性关节病变更能体现该病的临床病理特征[4]。通过影像学检测骨赘及关节间隙对评价疗效具有可行性及实用性。

骨性关节炎属中医学痹证范畴。目前中医治疗膝关节骨性关节炎的方法较多，多以活血化瘀，解痉通络，缓解病态发展，改善肌萎缩及肌张力低下，增加膝关节稳定性及提高膝关节功能为目的，均取得了一定成果[5-6]。牛膝味苦酸，性平，归肝、肾经，具有补肝肾、强筋骨、活血祛瘀、疏经通络的功效。牛膝多糖是从牛膝中提取的活性成分，相对分子质量小，水溶性好，药源广泛，既可口服，又可注射。有研究表明，牛膝多糖具有显著的抗炎镇痛作用，对热刺激和醋酸所导致的小鼠疼痛具有显著的抑制作用，对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀法和醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加也具有显著的抑制作用[7]；牛膝多糖还具有免疫调节功能，能提高正常及免疫低下小鼠的红细胞免疫功能[8]。

本研究结果表明，牛膝多糖治疗膝关节骨性关节炎能够改善周围软组织肿胀情况，减少关节间隙的变窄，缩小关节面的变化及减轻骨赘情况的发生，增加膝关节屈伸最大角度，改善膝关节活动度，从而有利于骨性关节炎的修复。

[1] 张晋华.关节镜治疗不同严重程度膝关节骨性关节炎疗效分析[J].中国现代药物应用，2011，5(9)：3-4.

[2] 郑海南.牛膝多糖的研究进展[J].实用中西医结合临床，2008，8(6):93-94.

[3] Kellgren JH，Lawrence JS．Radiological assessment of osteo-arthrosis[J].Ann Rheum Dis，1957，16(4)：494-502．

[4] Gardner DL.The nature and causes of osteoarthrosis[J].Br Med J (Clin Res Ed)，1983，286(6363):418-424.

[5] 卢笛，徐卫星，郭峭峰，等.针刀配合透明质酸钠关节内注射治疗膝骨性关节炎疗效观察[J].全科医学临床与教育，2010，8(3):299-301.

[6] 王世彪，郁俊文，张建军，等．骨痹威灵丸治疗骨性关节炎临床研究[J]．中国中医骨伤科杂志，2004，12(3)：41-42.

[7] 李伟平，何良艳，马哲龙，等.土牛膝多糖抗炎镇痛作用的研究[J].中华中医药学刊，2012，30(4):747-749.

[8] 邵树军，买玲，陈瑛．牛膝多糖对小鼠红细胞免疫功能的影响[J]．中国药物与临床，2002，2(5)：281-282．

(本文编辑：石 康)

Effectofachyranthanontherepairofrabbitkneeosteoarthritis

FANGFang*，ZOULaiyong，TANGQunzhen.

*DrugandEquipmentSection，MaternalandChildHealthHospitalofFuzhouCityinJiangxiProvince，Jiangxi，Fuzhou344000

ObjectiveTo study the effect of achyranthan on the repair of rabbit knee osteoarthritis. Methods 48 New Zealand white rabbit were randomly divided into two groups，each only 24. Using improved Hulth model to build the rabbit model of knee osteoarthritis. Treatment group

lavage treatment according to the achyranthan，2 g/kg，and control group received lavage treatment of 0.9% sodium chloride injection 2 mL/kg. 1 times a day，continuous lavage treatment for 3 months. Knee joint mobility and DR imaging classification were compared before and after the treatment in two groups.ResultsThere was no difference between before and after treatment in control group on knee joint mobility (P>0.05). There was significant difference between before and after treatment in treatment group on knee joint mobility (P<0.05). There was significant difference between two groups on knee joint mobility after treatment (P<0.05). There was no difference between two groups on DR imaging classification before treatment (P>0.05). There was significant difference between two groups on DR imaging classification after treatment (u=2.33，P>0.05). The treatment group can repair knee joint inflammatory change obviously.ConclusionAchyranthan for the treatment of knee osteoarthritis can improve soft tissue swelling，reduce joint space narrowing，reduce changes in the articular surface and mitigate osteophytes situation，increase the maximum angle of knee flexion，improve knee range of motion，thus is conducive to restoration of osteoarthritis.

Osteoarthritis; Knee; Disease models; Animal; Rabbit

※ 项目来源：2012年江西省卫生厅中医药科研基金课题(编号：2012A048)

1 江西中医药高等专科学校医疗系，江西 抚州 344000

方芳(1968—)，女，主管药师，学士。从事药械科工作。研究方向：中药制剂。

R446-33；R684.3

A

1002-2619(2014)05-0749-03

2013-05-06)