★ 陈俊杰 张馨瑜 谌燕 杨世林 范玫玫*

(1.江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心 江西 南昌 330006;2.中国药科大学 江苏 南京 210009)

冠心舒为中草药复方制剂，处方来源于中国药典2005年版一部“冠心丹参胶囊”，通过应用现代提取技术、精制纯化技术，对处方中丹参、三七、降香三味药材中有效部位的提取精制后，并通过药效学筛选，制成的由丹参总酚酸、三七总皂苷、降香总萜三个有效组分组成的制剂，其有效成分的配比影响着药物的疗效。

1 材料与方法

1.1 实验药物 丹参总酚酸、三七总皂苷、降香油(本草天工制药有限公司提供)。

1.2 实验动物 清洁级Sprague-Dawley(SD)新生大鼠(1～3d)，雌雄不限(GCI公司提供)。

1.3 主要试剂 L-NAME、胰蛋白酶、Brdu、HEPES(均为Sigma公司产品)；MTT(Ameresco公司产品)；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(Beckman公司产品)；MDA、SOD、GPx、Catalase测定试剂盒(均为Beckman公司产品)；胎牛血清、MEM培养基(GIBCO BRL公司)；其余化学试剂均为分析纯。

1.4 方法 1.4.1 心肌细胞的分离培养 参照Spector等方法，取出生1～3d内SD乳鼠心脏，分离心室组织，经0.1%胰酶消化分离,用含15%胎牛血清的MEM培养基混悬后置CO2培养箱(5%CO2,37℃)培养2 h去除成纤维细胞,将悬浮的心肌细胞过200目不锈钢网,计算细胞悬液中台盼蓝拒染的活细胞数,达90%以上。再分别按5×105/孔、1×105/孔接种于24孔培养板或96孔培养板内，于CO2培养箱培养，隔天换培养液，前3 d加入终浓度为0.1 mmol/LBrdu抑制纤维细胞生长。培养4 d随机分组进行实验。

1.4.2 心肌细胞A/R模型建立 心肌细胞生长接近融合状态时，对培养心肌细胞换用模拟缺氧缺糖溶液，置于持续95%N2～5%CO2平衡的A/R装置(37℃)中缺氧孵育3 h后，再换用模拟再灌注溶液于95%O2～5%CO2复氧孵育2 h。……