徐德林，蔡振锋，张 林，储士润，祝 飞，钱 刚

(1.遵义医学院 细胞生物学与遗传学教研室，贵州 遵义 563099；2.遵义医学院 第一临床学院，贵州 遵义 563099)

由于金钗石斛极高的经济和药用价值[1]，长期以来被人们过度采摘，再加上其自然生长缓慢、繁殖率低等生物因素影响，野生资源渐近枯竭，目前资源濒危[2]，已被列为国家二类保护植物并列入《国家重点保护野生植物名录》[3]。因此，如何保护种质资源，并降低人们对野生金钗石斛的依赖，实现金钗石斛资源的可持续发展和利用迫在眉睫。近年来，随着生物技术的进步和栽培技术的不断发展，金钗石斛的人工繁育已成一定规模[1,4]，高产优质种苗正成为科研工作者积极探索的热点。针对金钗石斛种子自然发芽率极低的状况，本研究明确了最适种子萌发的培养基；并利用植物组织培养技术寻求诱导金钗石斛愈伤组织培养基，为实现其快速无性繁殖提供保障和技术参数，也为细胞悬浮培养、细胞杂交、多倍体优质种苗培育等后续研究奠定了坚实的实验基础[5]。

1 材料与方法

1.1 实验材料 金钗石斛未开裂的蒴果。

1.2 金钗石斛蒴果消毒 取尚未开裂的金钗石斛蒴果，流水下冲洗20 min，置超净工作台上用75%酒精浸泡30 s，并不断轻摇，用无菌水冲洗3次，然后在加入有两滴Tween-80的0.1%升汞中浸泡12 min，浸泡过程中不断轻摇，最后用无菌水冲洗5次，用吸水纸吸干表面的水分，备用。

1.3 金钗石斛种子的播撒 在超净工作台上将消毒后的金钗石斛蒴果用无菌解剖刀纵向剖开，用无菌镊子轻轻镊取种子播撒在预先配置好的固体培养基内，每瓶培养基播撒量以均匀铺陈在培养基表面为宜。……