龙石太+吴宪红+胡亮+字向东

摘要：以川中黑山羊肝脏组织总RNA为模板，通过RT-PCR技术对黑山羊RBP4基因进行克隆测序及序列分析。结果表明，所克隆的665 bp片段为预期的川中黑山羊RBP4基因cDNA序列，包含整个CDS区，该编码区长为606 bp，编码201个氨基酸。用DNAMAN软件进行同源性比对，结果显示，川中黑山羊RBP4基因编码区与GenBank中报道的牛、猪、马、黑猩猩、小鼠、大鼠、人的同源性分别是98.5%、91.3%、92.2%、91.4%、83.0%、82.3%、91.3%；氨基酸序列同源性分别为97.5%、91.5%、93.5%、91.5%、83.6%、83.6%、91.5%。利用NJ法和MP法以该基因编码区核苷酸序列构建物种间分子进化树，其结果基本一致。聚类结果与遗传距离大小一致，表明RBP4基因编码区适用于构建物种间分子系统进化树。

关键词：川中黑山羊；RBP4基因；分子克隆；序列分析

中图分类号：S826；Q785 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）03-0697-04

视黄醇结合蛋白（Retinol-binding proteins，RBPs）是存在于动物体内以实现维生素A从肝细胞内转运至靶组织，并参与血清和细胞内视黄酸、视黄醇转运代谢的一种特异性运载蛋白，类属于疏水小分子结合蛋白家族[1]。RBPs在协助维生素A发挥生理功能中起着不可替代的作用。首先，RBP与维生素A结合后再与甲状腺素运载蛋白结合，形成VA-RBP-TTR复合体，伴随血液循环流经靶组织，与RBP的可识别受体结合，然后将维生素A转运到细胞内的受体上，以此完成其运载功能[2]。RBP主要在肝脏细胞中合成，合成后释放到血液中，最后通过内循环进入动物体内各组织。但RBP基因的mRNA在哺乳动物的卵巢、输卵管、卵泡、黄体、子宫内膜、肝脏、小肠、睾丸和附睾等多种组织中都有表达，只是在不同物种、组织器官和不同发育时期存在表达差异[3]。……