小麦散黑穗病病原菌PCR检测方法的研究
2014-07-18朱桂清迟文娟曹远银陈秀梅
朱桂清 迟文娟 曹远银 陈秀梅
摘要:小麦散黑穗病由小麦散黑粉菌引起,是世界各麦区发生的典型种传病害。近些年来,因缺少简便有效的种子检测技术,从而影响其防治的种子处理决策,使该病呈现出加重趋势。本研究以真菌rDNA非编码区ITS1、5.8S和ITS2的通用引物,分别对小麦散黑穗病菌等10种相关病菌进行PCR扩增、测序、Genbank搜索,通过Accelrys Gene 25软件比对,设计以小麦散黑穗病菌为靶标的特异引物,对上述10种病菌进行检测,唯有靶标病菌呈阳性;经1ng~1fg 7个靶标病菌的DNA浓度灵敏度检测,表明对其最低检测限为1pgDNA。本方法检测小麦散黑穗病快速、准确、灵敏,为实现带病种子检测提供了关键技术支撑。
关键词:小麦散黑穗病;PCR检测;种传病害;特异性引物
中图分类号:S435.121.4+4文献标志码:A文章编号:1002-1302(2014)01-0036-03
收稿日期:2013-05-01
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项(编号:2013016);国家科技支撑计划(编号:2012BAD19B04)。
作者简介:朱桂清(1959—),女,高级实验师,主要从事植物病理学研究。E-mail:zhugq1959@126.com。
通讯作者:曹远银,研究员,博士,主要从事植物免疫学与分子植物病理学研究。E-mail:caoyy66@yahoo.com.cn。小麦散黑穗病由小麦散黑粉菌[Ustilago tritici (Pers.) Rostr.]引起,各国小麦产区均有发生[1]。在我国以华中和华东麦区发病最重,而东北麦区则重于西北麦区。该病为典型的种传病害,带菌种子(胚内菌丝体)是唯一的传播途径。小麦单株一经罹病,其产量损失就近100%,换句话说,小麦发病株率可约等于产量损失率。从对整体生产危害情况来看,未见有毁灭性的报道,严重地块可达10%以上,但一般中等发病率田块仅为1%~5%。……
